Identification of blood cells and their physological functions in the cultured scallop, Patinopecten yessoensis collected from Abashiri Bay, Hokkaido, Japan were studied by electron microscopic structure and histological observations. The physiological function of each blood cell type was studied on the basis of its cytological structure, the lysosome in the blood cell and its phagocytosis. The blood cells were classified as Type I, Type II and Type III. The morphological characteristics of each blood cell type are as follows ; Type I : The cell is oval shaped and its cytoplasm contains comparatively low electron dense materials. The oval nucleus is sometimes ramified into two nuclei. Lumps of tubular smooth endoplasmic reticula and vacuoles are distributed near the nucleus. Type II : The cell appears long and oval shaped, and its cytoplasm contains high electron dense materials. The oval nucleus does not ramify, and large numbers of sac-like smooth endoplasmic reticula and free ribosomes are developed around the nucleus. No vacuoles exist in the cytoplasm Type 1II : The cell is round in shape and the electron density of the cytoplasm is the highest among the three types of cells because of large quantities of roughsurfaced endoplasmic reticula and no vacuoles. Particularly, the nucleus reveals a wheel-like shape owing to lumps of tuberous chromatin. The cells of Type I and II seem to have the role of carrying out phagocytosis on either foreign materials such as bacteria or endogenous old cells and the transport of nutritive materials. The type III cell, which has not been found in any bivalve species of non Pectinidae, may be said to have the function of production and the secretion of protein related to some humoral defense materials.
Kim, Sung-Phil;Choi, Yong-Hee;Kang, Mi-Young;Nam, Seok-Hyun
Applied Biological Chemistry
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v.48
no.3
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pp.285-291
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2005
Effects of the aqueous or 50% ethanolic extracts prepared by various extraction procedures on macrophage activation were determined by using the mouse macrophage cell line RAW264.7 cells as a indicator cell. The results demonstrated that the fractions prepared by aqueous extraction for 2 h and by microwave extraction with 50% ethanol at 60 W for 3 min had the greatest inducing abilities for NO production, and that the greatest ROS scavenging abilities were found in the fractions prepared by hot water extraction for 2 h or 3 h, by microwave extraction with 50% ethanol at 60 W for 3 min and by 0.5% HCl extraction, respectively. Phagocytotic activities against Candida albicans were found to be highest for the 50% ethanolic extracts prepared by microwave extraction for 3 min at 60 W, 80 W and 12 W, respectively. Especially, we found that a extract prepared by microwave extraction with 50% ethanol at 60 W for 3 min enables to induce effectively overall functional activation of macrophage, such as NO production, ROS scavenging and phagocytosis of C. albicans, respectively. These results demonstrated that a 50% ethanolic extraction using microwave at 60 W for 3 min would be useful for enrichment of macrophage-activating components contained in Hericium erinaceus, implying participation of protein-bound polysaccharides as a active factor.
Rosa rugosa has been used as a folk medicine with various pharmacological properties for a long time in Asia. Recently, it has been reported that the extract of fractions from different parts of Rosa rugosa have various pharmacological effects on diverse diseases including diabetes, inflammatory diseases and tumor. We investigated effects of fructus extracts of Rosa rugosa(RRF) and semen extracts of this herb(RRS) on macrophage to evaluate the possibilities as a biological response modifier. We showed increased effects on tumoricidal activity, phagocytic activity, TNF-$\alpha$ and NO production in RRF-treated groups without direct tumor cell cytotoxicity. RRS-treated groups increased direct tumor cell cytotoxicity at high dose without tumoricial activity except increasing of TNF-$\alpha$ release. These results provide further possibilities for the beneficial immunomodulating effects of RRF on immune system with relatively larger safety margin rather than RRS.
Kim, Young-Hee;Jyoti, Anirban;Byun, In-Sun;Oh, Ik-Hyun;Min, Young-Ki;Yang, Hun-Mo;Lee, Byong-Taek;Song, Ho-Yeon
Journal of the Korean Ceramic Society
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v.45
no.10
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pp.618-624
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2008
Various calcium phosphate bioceramics are distinguished by their excellent biocompatibility and osteoconductivity. Especially, the exceptional biodegradability of $\beta$-TCP makes it a bone graft substitute of choice in many clinical applications. The activation of osteoclasts, differentiated from macrophage precursor cells, trigger a cell-mediated resorption mechanism that renders $\beta$-TCP biodegradable. Based on this evidence, we studied the biodegradation process of granular-type $\beta$-TCP bone graft substitute through in vitro and in vivo studies. Raw 264.7 cells treated with RANKL and M-CSF differentiated into osteoclasts with macrophage-like properties, as observed with TRAP stain. These osteoclasts were cultured with $\beta$-TCP nano powders synthesized by microwave-assisted process. We confirmed the phagocytosis of osteoclasts by observing $\beta$-TCP particles in their phagosomes via electron microscopy. No damage to the osteoclasts during phagocytosis was observed, nor did the $\beta$-TCP powders show any sign of cytotoxicity. We also observed the histological changes in subcutaneous tissues of rats implanted with granule-type $\beta$-TCP synthesized by fibrous monolithic process. The $\beta$-TCP bone graft substitute was well surrounded with fibrous tissue, and 4 months after implantation, 60% of its mass had been biodegraded. Also, histological findings via H&E stain showed a higher level of infiltration of lymphocytes as well as macrophages around the granule-type $\beta$-TCP. From the results, we have concluded that macrophages play an important role in the biodegradation process of $\beta$-TCP bone graft substitutes.
The olive flounder, Paralichthys olivaceus is susceptible to viral hemorrhagic septicaemia virus (VHSV) at $15^{\circ}C$ but no mortality at $20^{\circ}C$ even though the virus can grow well in vitro at $20^{\circ}C$. Thus, we designed an experiment to know immune response of olive flounder against VHSV when the host reared at $15^{\circ}C$ or $20^{\circ}C$. cDNA microarray analysis was performed to compare the gene expression patterns of the kidney cells between the host reared at $15^{\circ}C$ or $20^{\circ}C$. The expression of MHC class I, IL-8, myeloperoxidae and endonuclease G-like having function for the antigen presentation and chemokine-factor were up-regulted both the $15^{\circ}C$ and $20^{\circ}C$ during VHSV infection. MHC class II gene existing on antigen-presenting cells and B cell lymphocytes, immunoglobulin (Ig) genes and phagocytosis related genes were down-regulated at $15^{\circ}C$ but highly expressed at $20^{\circ}C$. It can be thought that innate immune related antigen presentation by MHC class I and phagocytosis reaction against VHSV are efficiently occur both the temperature but macrophage or B cell related antigen presentation via MHC class II fails to induce downstream immune reactions (adaptive immunity) to make antibody, and it can be one of the reason that causes high mortality only at $15^{\circ}C$.
Background: Crocus sativus and its major constituent crocin are well established to have anti-cancer properties in breast cancer cells (MCF-7). However the role of C. sativus extract (CSE) and crocin on caspase signaling mediated MCF-7 cell death at molecular level is remains unclear. In this study, we tried to unravel role of CSE and crocin on caspase mediated MCF-7 cells death and their in vivo preclinical toxicity profiling and immune stimulatory effect. Materials and Methods: CSE extract was fractionated by HPLC and crocin was isolated and characterized by NMR, IR, and MS. MCF-7 cells were treated with both CSE and crocin and expression of Bcl-2 and Bax was assessed after 24 and 36 hours. Furthermore, caspase 3, caspase 8 and caspase 9 expression was determined by Western blotting after 24 hours of treatment. DNA fragmentation analysis was performed for genotoxicity of CSE and crocin in MCF-7 cells. The in vivo toxicity profile of CSE (300 mg/kg of b.wt) was investigated in normal Swiss albino mice. In addition, peritoneal macrophages were collected from crocin (1, 1.5 and 2 mg/kg body weight) treated mice and analyzed for ex vivo yeast phagocytosis. Results: Immunoblot analysis revealed that there was time dependent decline in anti-apoptotic Bcl-2 with simultaneous upregulation of Bax in CSE and crocin treated MCF-7 cells. Further CSE and crocin treatment downregulated caspase 8 and 9 and cleaved the caspase 3 after 24 hours. Both CSE and crocin elicited considerable DNA damage in MCF-7 cells at each concentration tested. In vivo toxicity profile by histological studies revealed no observable histopathologic differences in the liver, kidney, spleen, lungs and heart in CSE treated and untreated groups. Crocin treatment elicited significant dose and time dependent ex vivo yeast phagocytosis by peritoneal macrophages. Conclusions: Our study delineated involvement of pro-apoptotic and caspase mediated MCF-7 cell death by CSE and crocin at the molecular level accompanied with extensive DNA damage. Further we found that normal swiss albino mice can tolerate the maximum dose of CSE. Crocin enhanced ex vivo macrophage yeast phagocytic ability.
Kim, Hyun-Jeong;Woo, Sung-Ho;Kim, Jin-Woo;Park, Soo-Il
Journal of fish pathology
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v.18
no.2
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pp.167-178
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2005
Streptococcus iniae is one of the major bacterial pathogens of cultured olive flounder, Paralichthys olivaceus in Korea. This study was carried out to investigate the interaction between morphological characteristics and immune response such as phagocytosis and serum killing activity. They were differentiated phenotypically into two groups, the viscous colonies and the non-viscous colonies, but the strains in both groups were similar in physiological and biochemical characteristics. Electron microscopic examination of the viscous form revealed thick, electron-dense exopolysaccharide materials surrounding polycationic ferritin-stained cells, while the exopolysaccharide material was absent around the non-viscous form of S. iniae. The viscous type strains were disclosed more virulent than those of non-viscous type for olive flounder. The viscous strains were resistant to normal serum killing activity, while the non-viscous strains were susceptible to bactericidal activity of normal serum from olive flounder. The viscous strains were more resistant to opsonophagocytosis and decreased the chemiluminescence response of head kidney macrophages of olive flounder. All of the tested non-viscous S. iniae strains were efficiently destroyed by the macrophage after phagocytosis. Both the viscous and the non-viscous strains invaded and replicated in cultured fish cell line (CHSE-2l4). This cellular invasion may contribute to the pathogenesis of invasive S. iniae infection.
Objectives : Dahuanghuanglianxiexin-tang(DHXT) has been prescribed for patients with anxiety disorder and has been believed to treat Haw-Byung. The present study was carried out to investigate whether Da-Huang, Huang-Lian and DHXT have beneficial effects on ability to recover from the stressful conditions. Methods : The mice were divided into normal group, control group, positive control group and experimental groups. The experimental groups were divided into Da-Huang, Hwan-gryun and DHXT group. In the positive control group, imiprimine at $500{\mu}g$/g/day of dose were applied to mice and in the experimental groups, Da-Huang, Huang-Lian and DHXT at $50{\mu}$/g/day of dose were applied to mice. After 1 hour, the mice in the rest of groups except normal group were exposed to immobilization stress. Their body weights, phagocytosis, nitric oxide in macrophage, iNOS in hippocampus, serum levels of corticosterone and adrenocorticotropic-hormone(ACTH) were observed. Results : Da-Huang, Huang-Lian and DHXT didn't increase the body weights of immobilization stressed mice but they improved phagocytosis in immobilization stressed mice. Also they worked on reducing the amount of nitric oxide in macrophages in immobilization stressed mice. Although Da-Huang, Huang-Lian and DHXT didn't affect the serum level of ACTH in immobilization stressed mice, they reduced the serum level of corticosterone in immobilization stressd mice. Conclusions : The present study suggests that Da-Huang, Huang-Lian and DHXT have beneficial effects on ability to recover from the stressful conditions.
Insulin-like growth factor-I(IGF-I) rich fraction, which was obtained molecules ranged between 30 and 1 kDa, was fractionated by ultrafiltration from bovine colostral whey. IGF-I rich fraction was confirmed by SDS-PACE and western blotting and then the quantity of IGF-I was measured by sandwich ELISA. ICF-I concentration in IGF-I rich fraction was 10 ng/mg proteins. IGF-I rich fraction, standard IGF-I and colostral whey weie treated to murine peritoneal macrophages. And then we experimented that effect of immune activity on macrophage and splenocyte. As a result, in group treated with IGF-I rich fraction $1{mu}g/mL$, production of interleukin-6 and nitric oxide were 9.85 ng and $17.17{\mu}M$ and production of phagocytosis, tumor necrosis factor-${\alpha}\;and\;H_{2}O_{2}$ were 78.3, 34.5 and 6% compared to the control group. In splenocyte immune response, B cell and T cell proliferation and NK cell activity were 103, 126 and 22.2% in group treated with IGF-I rich fraction $1{\mu}g/mL$ to compared to the control, respectively.
Park, Hye-Jung;Kim, Sang-Min;Kwon, Hyun-Ju;Lee, Hyun-Tae;Kim, Byung-Woo;Kim, Tae Hoon;Kim, Moon-Moo
Journal of Life Science
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v.24
no.3
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pp.219-226
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2014
The immune system protects the body from bacterial infection and disease, as well as cancer that develops following the mutation of cells. Aging exerts adverse effects on the immune system, such as chronic inflammation, resulting in rheumatoid arthritis. The purpose of this study was to investigate the anti-inflammatory effectiveness of Scutellaria baicalensis, which contains baicalin. HPLC analysis showed that S. baicalensis hot water extracts (SBWE) contained 42.2 mg/g of baicalin. To evaluate the cytotoxicity of SBWE, an MTT assay was carried out in Raw264.7 cells. No cytotoxicity was observed below 160 ${\mu}g/ml$ of SBWE. SBWE at 40 ${\mu}g/ml$ reduced the amount of nitric oxide produced by macrophages stimulated with lipopolysaccharide by 40%. In addition, SBWE inhibited phagocytosis stimulated with zymosan. Furthermore, the content of tumor necrosis factor-alpha ($TNF-{\alpha}$) produced by the macrophages was decreased in the presence of SBWE in a dose-dependent manner. SBWE also inhibited the production of interleukin-1 beta ($IL-1{\beta}$) in a time course experiment. Moreover, treatment with 20 ${\mu}g/ml$ of SBWE remarkably decreased the expression level of cyclooxynase-2. The results provide evidence that SBWE may exert an anti-inflammatory effect through modulation of the immune system.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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