The effect of subculture intervals and passages on plant regeneration from seed-derived callus was determined. Regeneration capacity of callus varied with rice cultivars and subculture intervars tested. The callus subcultured every 2 weeks produced more plants than that of 4 weeks. The calli from a Tongil-type rice cultivar, Milyang 23, lost easily their regeneration ability when the calli were subcultured every 2 weeks and 4 weeks. The callus induced from a japonica cultivar, "Yeongdeogbyeo", showed to maintain high frequency(>70%) of plant regeneration when it was subcultured every 2-week intervals. Casein hydrolysate supplemented in callus induction medium enhanced callus growth and its regeneration. High frequency of plant regeneration was obtained from the calli transferred on $N_6$ medium supplemented with kinetin(2mg/1) and NAA(1mg/1). The subcultured calli in the medium supplemented with casein hydrolysate(2 g/1), myo-inositol(200mg/1) and thiamine-HCl(2mg/1) increased the frequency of embryogenic callus formation and plant regeneration.
The response of callus growth of rice (Oryza sativa L.) cultivars which showed different responses to herbicides as seedlings was investigated to select resistant or tolerant calli. Callus growth of IR28 which was susceptible to thiobencarb (S-[(4-chlorophenyl)methyl]diethylcarbamothioate) during callus induction was not inhibited by $10^{-5}$ M and $10^{-6}$ M thiobencarb, indicating that there was a difference in tolerance among callus induction and growth, and the intact plant level. A similar result was obtained with IR31917-45-3-2-2 to butachlor [N - (buthoxymethyl) -2-chloro-N- (2, 6-diethylphenyl) acetamide]. The fresh weight of IR28 callus transferred into $10^{-5}$ M thiobencarb after treatment at $10^{-6}$ M for 30 days was not affected by the herbicide, indicating that transferring callus into gradually higher herbicide concentrations can be a useful method for selection of herbicide-tolerant cell lines.
In order to substract the time and cost of propagation for inducing the haploid plants per each species. 500 anthers of late uninucleate microspore on early binucleate microspore stage of Robinia pseudoacacia (Fuel tree) Punius granatum (Ornamental tree). Aleurites fordii (Faty tree) and Styrax japonica (Silvicultural tree) were cultured on the modified Murashige and Skoog's medium supplemented with Kinetin, 2.4-D and NAA as growth regulators. And I observed the samples of cultured anthers under the microscope which were made by Microtoming method and Paraffin method. The results were summarized as follows: 1) Among 500 cultured anthers per each species, anther numbers inducing the diploid callus were as follow: Styrax japonica 20 (4% for the species total); Aleurites fordii 10 (2% for the species, total) and Punica granatum 45 (9% for the species total) were showed. 2) 2n Callus were induced from anther wall. but haploid callus were induced from anther locule. 3) Haploid callus were induced only in 25 anthers (5% for the species total) of Robinia pseudoacacia. 4) These haploid callus were not originated from body cell of anther wall tissue, but from reduced microspores, 5) Since already reported many herbaceous haploid plants were induced from the callus which were originated from reduced microspores, I conclude that the anther of woody plant which induced the haploid callus also will be cultured haploid plant.
In order to optimize tissue culture conditions of Kentucky bluegrass(Poa pratensis L.), effects of culture medium supplements, media and cultivars on embryogenic callus induction and regeneration of plants were investigated. MS medium containing 3mg/L 2,4-D and 0.1mg/L BA was optimal for embryogenic callus induction from mature seeds. The highest plant regeneration frequency(57.7%) was observed when the embryogenic calli were cultured on N6 medium supplemented with 1mg/L 2,4-D and 3mg/L BA. Among several basic media, MS and N6 medium were optimal for callus induction and plant regeneration, respectively. Genotype was an important factor in plant regenerability. ‘Newport’ showed to have higher regeneration frequency of 53.4%. Regenerated plants were grown normally when shoots transplanted to the soil. A short tissue culture period and high-frequency regeneration system would be beneficial for molecular breeding of Kentucky bluegrass through genetic transformation.
Kim Do-Hyun;Lee Dong-Gi;Lee Sang-Hoon;Woo Hyun-Sook;Lee Ki-Won;Choi Myung-Suk;Lee Byung-Hyun
Journal of Plant Biotechnology
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v.32
no.3
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pp.187-193
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2005
In an effort to optimize tissue culture conditions for genetic transformation of tall fescue (Festuca arundinacea Schreb.), an efficient plant regeneration system from seed-derived calli was established. MS medium containing 6 mg/L 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D) and 0.1 mg/L benzyladenine (BA) were optimal for embryogenic callus formation from mature seed and had a strong effect on successive plant regeneration. The plant regeneration frequency above 50% was observed when embryogenic calli induced in this medium were transferred to N6 medium supplemented with 1 mg/L 2,4-D and 3 mg/L BA. Among several basic media, MS and N6 medium were optimal for callus induction and plant regeneration, respectively. 'Kentucky-31' showed to have high frequencies of embryogenic callus induction and plant regeneration up to 58.3 and 50%, respectively. Addition of sucrose to the regeneration medium as a carbon source increased regeneration frequency up to 55%. A short tissue culture period and high-frequency regeneration system established in this study will be useful for molecular breeding of tall fescue through genetic transformation.
This study was conducted to investigate the physiological and biochemical elements relating embryogenisis. Also we examined the differences of protein in embryogenic callus and nonembryogenic callus by SDS-PAGE and two-dimensional gel electrophoresis. In this study, we have focused attention on the process of total proteins during sometic embryogenesis of rice. When compared the proteins of embryogenic callus and nonembryogenic callus, some different proteins were observed and serval proteins were increased in embryogenic callus. Some proteins were decreased or disappeared in embryogenic callus. Near 43kD protein band was only observed in embryogenic callus. The other bands were similar to each lines. The result of two-diimensional gel electrophoresis, E-callus specific proteins were observed. This Results may indicate that these proteins were associated with somatic embryogenesis.
In order to optimize the conditions of callus induction and plant regeneration in seed culture of Italian ryegrass, the effects of basic medium and carbon sources on seed culturability and genotypic difference of plant regenerability were investigated. MS medium was better than N6 and B5 medium in enhancing callus growth and plant regeneration. Sucrose was superior to maltose in plant regeneration as carbon source in the medium. The genotypic difference in plant regenerability was obvious among four cultivars of Italian ryegrass tested. 'Rio' and 'Jeanne' showed to have higher regenerability with the frequency of 38% and 56%, respectively.
This study was carried out to determine the effects of growth regulators, carbon sources and silver nitrate on callus formation and plant regeneration of turfgrass. The results were summarized as fallows : Callus from Korean lawngrass (Zoysia japonica Steud.) and pencross creeping bentgrass (Agrostis palustrir Huds.) induced better in MS medium than in N6 medium and by addition of 2,4-D than by that of NAA. Callus formation from Korean lawngrass and penncross creeping bentgrass was very effective at MS medium adding 1mg/L 2,4-D and at the medium adding 2mg/L 2,4-D, repectively. Growth of callus was good at MS medium containing 2mg/L 2,4-D+0.2mg/L NAA. Callus growth of Korean lawngrass and penncross creeping bentgrass was good when kinetin was added 0.2mg/L and 0.3mg/L, individually, to MS medium containg 2mg/L 2,4-D+0.2mg/L NAA. Regeneration rate from leaf and stock callus of Korean lawngrass was 44% at MS medium adding 2,4-D 2mg/L+NAA 0.2mg/L+kinetin 0.3mg/L and 32% at the medium containing 2,4-D 2mg/L+NAA 0.2mg/L+kinetin 0.3mg/L, each and that from leaf and stock callus of penncross creeping bentgrass was 80% and 67%, each, at the medium adding 2,4-D 2mg/l+NAA 0.2mg/L+kinetin 0.3mg/L. Regeneration rate of Korean lawngrass and penneross creeping bentgrass increased by 3 to 4% and by 10 to 16%, respectively, when added $AgNO_3$ 1~2mg/L to the above-mentioned regeneration medium.
So far, the cultivated peony is known to be originated from an indigenous species, Paeonia albiflora $P_{ALLAS}$ var. trichocarpa $B_{UNGE}$ (PAT). In this study, these two species were morphologically examined in the external and internal feature and in the pattern of callus formation by tissue culture. Also, they were compared with another indigenous species, P. japonica $M_{IYABE}$ et $T_{AKEDA}$ var. pilosa $N_{AKAI}$ (PJ), which were regarded as being scarcely related to them. The root of the cultivated peony is massive consisting with several storage roots, each of them is a hypotrophic and fusiform. The root of PAT consists of several storage roots, each of them is branching and slender. And the storage root of PJ is short, bended buried horizontally, protruding a number of corpulent lateral root. The secondary xylem of the cultivated peony is small clusters of vessels and xylem fibres are arranged in scalariform and among these cluster, single vessel is joined, but that of PAT is small clusters of vessels are arranged in separate scalariform but are not connected with each other and that of PJ is vessels and xylem fibers are grouped together in elongated clusters that radiate outward from the center. Protoxylem of the cultivated peony is surrounded by four large metaxylem, but that of PAT and PJ by seven. On the other hand, the callus formation patterns of these peonies were different; the cultivated peony callus is formed in an orderly fashion by the mammalate meristematic cell groups, PAT callus is in disorder by the meristematic cells arranged in linear, and PJ callus is in order by the meristematic cells arranged in linear. By the comparison of three different plants in the anatomical appearance and the callus formation pattern, it is evident that the cultivated peony is not derived from PAT.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.31
no.3
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pp.211-216
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2011
The present study was conducted to determine the optimum in vitro conditions for callus induction and plant regeneration from mature seed derived callus of four cultivars of Timothy. In order to investigate the effects of genetic variations of timothy in tissue culture, calli were induced from mature seeds of four varieties, 'Colt', 'Chair', 'Richmond' and 'Hokuo' and plant regeneration frequency was compared. Significant differences were observed among the cultivars in both callus induction and plant regeneration. Genotype 'Colt' consistently performed best in the callus subculture and plant regeneration. The complete plantlets were thereafter transplanted to grow under greenhouse condition. Regenerated timothy plants were morphologically uniform with normal leaf and growth pattern.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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