본 연구에서는 느타리버섯의 생육단계별 미생물 군집을 species수준에서 조사하였다. 살균전 배지에서는 그람 양성균이 우점하였다. 반면 배양완료 배지, 수확 후 배지, 그리고 자실체에서는 그람 음성균이 우점하였다. 미생물의 다양성을 확인한 결과 살균 전 배지가 다른 생육단계에 비해 다양한 미생물을 포함하고 있는 것을 확인하였으며, 배양완료배지, 자실체, 수확 후 배지의 순서로 다양성이 감소하는 경향을 보였다. 미생물의 유사도분석을 한 결과 배양완료배지와 수확 후 배지가 유사한 미생물군집을 보이는 것을 확인하였고, 자실체의 경우 일부 유사성을 보이지만 전반적으로는 차이를 나타내었다. 이러한 결과를 토대로 확인하였을 때 살균과정을 거치지 않은 살균 전 배지에서는 검출되지 않은 Pseudomonas tolaasii가 살균 과정을 거친 배양완료배지, 수확후 배지에서 검출된 것으로 보아 살균 이후 접종 혹은 배양하는 과정에서 미생물이 유입하였을 것으로 추정된다. 또한 유해균이 유입되었지만 병징이 나타나지 않은 것은 유해균을 억제하는 유익균의 존재와 병징을 일으키는 농도보다 낮은 것의 영향으로 추정된다. 앞으로, 유해균이 유입되었지만 병징이 나타나지 않은 원인과 기작에 대한 연구가 필요하다.
송이는 동양권 문화에서는 중요하며, 값비싼 버섯으로 알려져 있다. 채집된 송이의 자실체에 분리된 송이균사에서 추출된 DNA를 RAPD 방법을 통하여 비교하였다. 비교된 송이균사들은 각각 분리된 송이자실체에서 분리되었으며, PDA에서 성장이나 균총의 형태가 다른 것들을 취하여 비교하였다. 그런데, 이 실험을 통하여, PCR 조건에서 만들어진 RAPD-밴드를 집괴분석한 것을 비교하였으며, 또 다른 방법으로는 Southern blotting 통하여 확인하였다. 그결과, 두 방법에서 송이균사로 추정되는 균사를 확인하여, 이들의 균사에 대한 실험실내의 성장과 균총을 확인하였다. 균사의 성장은 매우 느리며 (10 cm per month), 균총은 반투명한 것이며, 현미경관찰하에 어떤 후막포자와 갈고리모양의 균사가 발견되지 않았다.
본 연구는 mushroom complete medium(MCM) 액체배지에 수삼 추출물(GE, $65^{\circ}Bx$)을 첨가하여 면역활성이 증진된 노루궁뎅이버섯(Hericium erinaceum) 균사체를 배양하고, 균사체로부터 활성다당성분을 분획하고자 하였다. MCM에 대하여 GE를 5, 10과 15%(v/v) 첨가한 액체배지에서 균사체를 배양하고, 각각의 조다당획분(HE-GE-5-CP, HE-GE-10-CP와 HE-GE-15-CP)으로 분획하여 면역활성을 측정한 결과, HE-GE-10-CP는 HE-GE-5-CP와 HE-GE-15-CP보다 높은 활성을 나타내었으며, GE를 첨가하지 않은 MCM에서 배양된 균사체 조다당획분(HE-CP)보다 유의적으로 증진된 면역활성을 나타내었다. 또한, HE-GE-10-CP의 DEAE-Sepharose CL-6B 분획물 중 가장 높은 활성을 나타낸 HE-GE-10-CP-II획분은 대조군인 HE-CP의 어떠한 획분보다도 유의적으로 높은 면역활성과 암 전이 억제활성을 나타내었다. 한편, 활성획분인 HE-GE-10-CP-II는 arabinose, rhamnose, galactose, glucose와 uronic acid(molar ratio; 0.34:0.26:0.99:1.00:0.39)로 구성되어 있으나, 대조군인 HE-CP의 동일용매 용출획분으로서 HE-GE-10-CP-II보다는 활성이 낮은 HE-CP-II는 fucose, mannose, galactose와 glucose(molar ratio; 0.32:0.55:1.00:0.96)를 함유하여 다른 구성당 분포를 나타내었다. 따라서 노루궁뎅이버섯 균사체 액체배양에서 수삼 추출물 첨가는 균사체의 구성당 변화를 통한 면역활성 증진에 관여하는 것으로 사료되어 기능성 소재 개발에 유용할 것으로 사료된다.
Fazenda, Mariana L.;Harvey, Linda M.;McNeil, Brian
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제20권4호
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pp.844-851
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2010
Controlling the dissolved oxygen (DO) in the fed-batch culture of the medicinal mushroom Ganoderma lucidum led to a 2-fold increase of the maximum biomass productivity compared with uncontrolled DO conditions. By contrast, extracellular polysaccharide (EPS) production was two times higher under oxygen limitation (uncontrolled DO) than under increased oxygen availability (controlled DO). Morphologically, dispersed mycelium was predominant under controlled DO conditions, with highly branched hyphae, consistent with the enhanced culture growth noted under these conditions, whereas in the uncontrolled DO process mycelial clumps were the most common morphology throughout the culture. However, in both cultures, clamp connections were found. This is an exciting new finding, which widens the applicability of this basidiomycete in submerged fermentation. In rheological terms, broths demonstrated shear-thinning behavior with a yield stress under both DO conditions. The flow curves were best described by the Herschel-Bulkley model: flow index down to 0.6 and consistency coefficient up to 0.2 and 0.6 Pa $s^n$ in uncontrolled and controlled cultures DO, respectively. The pseudoplastic behavior was entirely due to the fungal biomass, and not to the presence of EPS (rheological analysis of the filtered broth showed Newtonian behavior). It is clear from this study that dissolved oxygen tension is a critical process parameter that distinctly influences G. lucidum morphology and rheology, affecting the overall performance of the process. This study contributes to an improved understanding of the process physiology of submerged fermentation of G. lucidum.
Clitocybin A, an isoindolinone from Clitocybe aurantiaca, was investigated to assess its anti-wrinkle properties, through reactive oxygen species (ROS)-scavenging and elastase inhibitory activities, procollagen synthesis, and matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) expression, in human primary dermal fibroblast-neonatal (HDF-N) cells. Clitocybin A exhibited no significant cytotoxicity up to 10 ppm in HDF-N cells, with cell viability and cell proliferation activity greater than 94.6% and 91.9%, respectively. Strong and concentration-dependent ROS radical scavenging activities of clitocybin A were observed following irradiation with UVB at $30mJ/cm^2$. Furthermore, clitocybin A treatment of cells at 0.1, 1, and 10 ppm exhibited decreased elastase activity, in a concentration-dependent manner, by 1.97%, 6.6%, and 8.31%, respectively, versus the control group. The effects of clitocybin A on procollagen synthesis and MMP-1 expression were investigated. Clitocybin A treatment of cells at 1, 5, and 10 ppm increased procollagen synthesis, by 67.9%, 74.4%, and 112.9%, respectively, versus the control group. At these concentrations, MMP-1 expression decreased significantly following UV irradiation. Together, these findings suggest that clitocybin A may be an effective ingredient for use in anti-wrinkle cosmetic products.
한국교원대학교 주변의 아카시아림 및 상수리나무와 아카시아의 혼합림에서 민자주방망이버섯(L. nuda)을 채집하여 균사를 순수분리하였다. 분리된 균사와 농진청 균이과에서 분양 받은 균사를 시료로 수종의 기질에 따른 균사의 성장을 나무 건중량과 탄산가스 발생량으로 측정하였다. 이 결과 아카시아, 뽕나무, 느티나무 순으로 균사의 성장을 나타냈다. 아카시나무 톱밥, 조 및 옥수수를 이용한 고형발효를 한 결과 균사의 성장에 관련된 성장곡선은 그렸으나, 자실형성을 하지 못하였다. 그러나, 앞으로 유망한 식용버섯으로 다른 수종의 나무에 자라는 균사를 얻었으며, 자실체 형성을 위하여서는 많은 연구가 필요하다.
Pseudomonas sp. P7014 박테리아를 통한 큰느타리버섯 균사체의 생육촉진에 관한 연구가 수행되었다. 박테리아 배양액으로 부터 분리한 ethyl acetate 분획물(F5)에는 성장촉진물질(GPC)이 함유되어 있음을 확인하였다. TLC, HPLC, NMR 및 MS/MS분석법으로 확인한 바, indole acetic acid (IAA)로 확인되었다. 큰느타리버섯 균사체는 성장촉진물질(GPC)이 첨가된 PDA와 PDB 배지에서 빠른 성장을 보였다. 성장촉진물질(GPC)의 농도는 1.0 nM로 매우 낮았지만, 확인된 tryptophan은 IAA의 전구체로써 IAA가 아민화된 형태였다. 이들 결과는 박테리아에서 분비된 성장촉진물질(GPC)은 IAA이었고 큰느타리버섯 균사체의 생육촉진에 중요한 역할을 하는 것으로 확인되었다.
Objectives : The purpose of this study was to investigate extracts from mixed culture of Oriental medicines and cereal medium and mycelia of Trichloma matsutake and Cordyceps militaris by fermentation to develop new material for pharmaceutical products and medicinal food, Methods : To evaluate physiological activities of OCM extracts, we examined antioxidant activity(total polyphenol contents, electronic donating ability, SOD-like activity), ${\beta}$-glucan contents, nitric oxide production and cytotoxicity by MTT assay. Results : Total polyphenol contents of fermented OCM(UF) and non-fermented OCM(UM) extracts were more than 40% UM and UF of DPPH radical scavenging activity was 25.67%, 23.43% respectively. Total polyphenol content of non-fermented extract (UME) was 12.57%, while that of fermented extract(UFE) was 7.05%. SOD like activity showed UM 85.35%, UF 76.18%, UME 58.42%, UFE 72.21%. UME, and UFE 31.43%, ${\beta}$-glucan contents of UME and UFE were more than 40%. NO productions of UME, and UFE showed a LPS dose dependent tendency. Cytotoxicity on Raw 264.7 cell showed more than 90% viability. Inhibitory effect of UFE on HT1080 cell growth was higher than UME. Conclusions : These results showed that extracts from mixed culture of mushroom mycelium and OCM have physiological activities which can be used in pharmaceutical products and medicinal food.
뽕나무 버섯균은 식용버섯으로써 노인병, 중풍, 현기증, 두통, 신경쇠약, 불면증, 사지마비, 소아마비, 간질 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있으므로, 뽕나무 버섯 균사체의 고농도 배양을 위한 최적 조건확립 하고자 하였다. 뽕나무 버섯균사체 생산의 최적배지 선정을 위하여 7종의 배지를 대상으로 수행한 결과 맥아즙배지가 뽕나무 버섯 균사체 생산에 가장 우수하였다. 맥아즙 배지에서 뽕나무 버섯균 균사체 생산을 위한 적정조건은 맥아즙 농도 $15\;Brix^{\circ}$이었으며 온도, pH, 배양기간의 조건을 반응표면 분석법에 의해서 실행한 결과, $25.9^{\circ}C$, pH 5.72, 15.22일의 배양에서 3,40 g/50 ml의 최대 예측치를 나타내었다. 이는 실제 실험결과치와도 대체로 일치하는 경향이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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