Two bacterial strains capable of degrading trichloroethylene (TCE), isolated form soils contaminated with various chlorinated alkenes, were identified as Alcaligenes odorous N6 and Nocardia sp. Hl7. In addition, four KCTC strains, including three strains of Pseudomonas putida and one strain of Sphingomonas chlorophenolica, exhibited an ability to degrade toluene. A. odorans N6 and Nocardia sp. H17 degraded 84% of the initial amount of TCE in a basal salts medium (BSM), containing 0.2 mM TCE as the sole source of carbon and energy, in a day. The optimal pH for growth was within a range of 7.0-8.0. A mixed culture of the four toluene-degrading isolates degraded 95% of 0.2 mM TCE with 1.5 mM toluene as an inducer, whereas no TCE was degraded by the same mixture without an inducer. When a mixed culture of all 6 isolates was used, the degradation efficiency of 0.2 mM TCE was 72% without an inducer, in a day, and 82% with toluene as an inducer. In a continuous treatment, 1,000 mg/1 of TCE in an artificial wastewater was completely removed within 18 h when an activated sludge was used along with the microbial mixture, which was 27 h laster than when only an activated sludge was used. Accordingly, it would appear that such a microbial mixture could be effectively applied to the biological treatment of wastewater containing TCE with or without an inducer.
Park, Hyun-Suk;Min, Kyung-Jin;Cha, Chun-Geun;Song, Jin-Wook;Son, Jin-Chang
Journal of Environmental Health Sciences
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v.33
no.1
s.94
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pp.21-29
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2007
Paeonia lactiflora was stepwise extracted with hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol and water. Anti-microbial activity of each extract was investigated. Methanol extract of P. lactiflora revealed anti-microbial activity against S. mutans, C. albicans, and S. aureus. Also, hexane fraction revealed anti-bacterial activity against S. mutans and ethyl acetate fraction acted as potent anti-microbial agent on C. albicans and S. aureus. The relative growth ratio(RGR) of hexane fraction of P. lactiflora against S. mutans were determined as 77.8% in concentration of 0.125 mg/ml, 98.46% in 0.25 mg/ml and 100% in 0.5 mg/ml. The ethyl acetate fraction of P. lactiflora revealed RGR against C. albicans as 52.5% in concentration of 0.125 mg/ml, 60.83% in 0.25 mg/ml and 78.33% in 0.5 mg/ml. It indicate that increasing concentration increase RGR. The measured minimal inhibitory concentration(MIC) of hexane fraction on S. mutans KCTC 5316 strain was 0.5 mg/ml and MIC of ethyl acetate fraction on C. albicans KCTC 7270 was 2.0 mg/ml. The experiment of inhibition to growth of KB roll(oral squamous cell carcinoma) result 61.9% in butanol, 76.7% in hexane extract of P. lactiflora. The hexane extract exhibit potent inhibition effect to the growth of KB cell. These results suggest that the hexane extract of Paeonia lactiflora has antimicrobial activity against S. mutans and has preventive effect to dental caries in addition to potent inhibition to KB cell growth.
Proceedings of the Korean Society for Applied Microbiology Conference
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1979.04a
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pp.113.2-114
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1979
$\beta-Galactosidase$ is an enzyme which catalizes hydrolysis of lactose, a natural substrate, to glucose and galctose and transferring some monosac-charide units to active acceptors as sugar or alcohol. The occurence of $\beta-Galactosidase$ is known in various microorganisms, animals and higher plants and has been studied by many investigatigators. Especially, a great deal of articles for the enzyme of E. coli have been presented in genetic control mechanism and induction-repression effects of proteins, On the other hand, in the dairly products industry, it is important to hydrolyes lactosd which is the principal sugar of milk and milk products. During the last few years, the interest in enzymatic hydrolysis of milk lactose has teen increased, because of the lactose intolerence in large groups of the population. Microbial $\beta-Galactosidases$ are considered potentially most suitable for processing milk to hydrolyse lactose and, in recent years, the immobilized enzyme from yeast has been examined. Howev, most of the microbial $\beta-Gal$ actosidase are intracellular enzymes, except a few fungal $\beta-Gala-$ ctosidases, and extracellular $\beta-Galactosidase$ which may be favorable to industrial applieation is not so well investigated. On this studies, a mold producing a potent extracellular $\beta-Galactosidase$ was isolated from soil and identified as an imperfect fungus, Beauveria bassians. In this strain, both extracellular and intracellular $\beta-Galactosidases$ were produced simultaneously and a great increase of the extracellular production was acheved by improving the cultural conditions. The extracellular enzyme was purified more than 1, 000 times by procedures including Phosphocellulose and Sephadex G-200 chromatographies. Several characteristics of the enzymewas clarified with this preparation. The enzyme has a main subunit of molecular weight of 80, 000 which makes an active aggregate. And at neutral pH range, it has optimum pH for activity and stability. The Km value was determined to be 0.45$\times$10$^{-3}$ M for $o-Nitrophenyl-\beta-Galactoside.$ In any event, it is interesting to sttudy the $\beta-Galactosidase$ of B. bassiana for the mechanism of secretion and conformational structure of enzyme.
Phosphomannomutase (ManB) is involved in the biosynthesis of GDP-mannose, which is vital for numerous processes such as synthesis of carbohydrates, production of alginates and ascorbic acid, and post-translational modification of proteins. Here, we discovered that a deletion mutant of manB (BG101) in Streptomyces coelicolor (S. coelicolor) showed higher sensitivity to bacteriostatic chloramphenicol (CM) than the wild-type strain (M145), along with decreased production of CM metabolites. Deletion of manB also decreased the mRNA expression level of drug efflux pumps (i.e., cmlR1 and cmlR2) in S. coelicolor, resulting in increased sensitivity to CM. This is the first report on changes in antibiotic sensitivity to CM by deletion of one glycolysis-related enzyme in S. coelicolor, and the results suggest different approaches for studying the antibiotic-resistant mechanism and its regulation.
In this study, the changes in microbial communities of lamb meat packaged in the air (plastic tray, PT) and in a vacuum pouch (VAC) were assessed by polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis (PCR-DGGE) during the storage at $4^{\circ}C$. For the PT lamb, the total viable count (TVC) was $10^7CFU/g$ on Day 5, and the dominated bacteria were Pseudomonas fragi, P. fluorescens, and Acinetobacter spp. For the VAC lamb, the TVC was $10^7CFU/g$ on Day 9, and the dominated bacteria were lactic acid bacteria, including Carnobacterium divergens, C. maltaromaticum, and Lactococcus piscium. One strain of Pseudomonas spp. also appeared in VAC lamb. The relative abundance of Enterobacteriaceae in VAC lamb was higher than that PT lamb, indicating a more important role of Enterobacteriaceae in spoilage for VAC lamb than that of PT lamb. The microbial compositions changed faster in the lamb stored in a PT than that stored in a VAC, and microbial community compositions of the late storage period were largely different from those of the early storage period for both the conditions. The findings of this study may guide improve the lamb hygiene and prolong the shelf life of the lamb.
Misbah, Asmae;Koraichi, Saad Ibnsouda;Jouti, Mohamed Ali Tahri
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.48
no.4
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pp.491-505
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2020
A newly isolated strain, Proteus vulgaris OR34, from olive mill waste was found to secrete an alkaline extracellular lipase at 11 U·ml-1 when cultivated on an optimized liquid medium. This lipase was purified 94.64-fold with a total yield of 9.11% and its maximal specific activity was shown to be 3232.58 and 1777.92 U·mg-1 when evaluated using the pH-stat technique at 55℃ and pH 9 and Tributyrin TC4 or olive oil as the substrate. The molecular mass of the pure OR34 lipase was estimated to be around 31 kDa, as revealed by SDS-PAGE and its substrate specificity was investigated using a variety of triglycerides. This assay revealed that OR34 lipase preferred short and medium chain fatty acids. In addition, this lipase was stable in the presence of high concentrations of bile salt (NaDC) and calcium ions appear not to be necessary for its activity. This lipase was inhibited by THL (Orlistat) which confirmed its identity as a serine enzyme. In addition, the immobilization of OR34 lipase by adsorption onto calcium carbonate increased its stability at higher temperatures and within a larger pH range. The immobilized lipase exhibited a high tolerance to organic solvents and retained 60% of its activity after 10 months of storage at 4℃. Finally, the OR34 lipase was applied in biodiesel synthesis via oleic acid mediated esterification of methanol when using hexane as solvent. The best conversion yield (67%) was obtained at 12 h and 40℃ using the immobilized enzyme and this enzyme could be reused for six cycles with the same efficiency.
α-Galactosidase is a debranching enzyme widely used in the food, feed, paper, and pharmaceuticals industries and plays an important role in hemicellulose degradation. Here, T26, an aerobic bacterial strain with thermostable α-galactosidase activity, was isolated from laboratory-preserved lignocellulolytic microbial consortium TMC7, and identified as Parageobacillus thermoglucosidasius. The α-galactosidase, called T26GAL and derived from the T26 culture supernatant, exhibited a maximum enzyme activity of 0.4976 IU/ml when cultured at 60℃ and 180 rpm for 2 days. Bioinformatics analysis revealed that the α-galactosidase T26GAL belongs to the GH36 family. Subsequently, the pET-26 vector was used for the heterologous expression of the T26 α-galactosidase gene in Escherichia coli BL21 (DE3). The optimum pH for α-galactosidase T26GAL was determined to be 8.0, while the optimum temperature was 60℃. In addition, T26GAL demonstrated a remarkable thermostability with more than 93% enzyme activity, even at a high temperature of 90℃. Furthermore, Ca2+ and Mg2+ promoted the activity of T26GAL while Zn2+ and Cu2+ inhibited it. The substrate specificity studies revealed that T26GAL efficiently degraded raffinose, stachyose, and guar gum, but not locust bean gum. This study thus facilitated the discovery of an effective heat-resistant α-galactosidase with potent industrial application. Meanwhile, as part of our research on lignocellulose degradation by a microbial consortium, the present work provides an important basis for encouraging further investigation into this enzyme complex.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.44
no.4
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pp.592-601
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2015
Rubus coreanus is known as Korean black raspberry, native to Korea, Japan, and China. Preliminary studies evaluating their potential for cancer treatment in mammalian test systems are ongoing. In recent years, interest has been renewed due to their high levels of anthocyanins. Anthocyanins in black raspberry are important due to their potential health benefits as dietary antioxidant, anti-inflammatory compound, and as a chemopreventive agent. In the present study, Saccharomyces cerevisiae BA29 was isolated from black raspberry fruit and fruit juice as a biogenic amine non-producing strain for manufacturing of black raspberry wine, after which we investigated its characteristics: biogenic amine-producing ability, cell growth ability, alcohol-fermentation ability, and resistance to alcohol, glucose, and sulfur dioxide. Based on preliminary experiments, we optimized culture medium compositions for improving dried cell weight of S. cerevisiae BA29 by response surface methodology (RSM) as a statistical method. Design for RSM used a central composite design, and molasses with the industrial applicability was used as a carbon source. Through statistical analysis, we obtained optimum values as follows: molasses 200 g/L, peptone 30 g/L, and yeast extract 40 g/L. For the model verification, we confirmed about 3-fold improvement of dried cell weight from 6.39 to 20.9167 g/L compared to basal yeast peptone dextrose medium. Finally, we manufactured black raspberry wine using S. cerevisiae BA29 and produced alcohol of 20.33%. In conclusion, S. cerevisiae isolated from black raspberry fruit and juices has a great potential in the fermentation of black raspberry wine.
Biogenic amines are produced primarily by microorganisms found in fermented foods and are often implicated in poisoning incidents in humans. In this study, 620 strains of microorganisms were isolated from traditional Korean fermented food in Sunchang in order to screen for non-biogenicamine-producing microorganisms present in these foods. One strain was identified and named Bacillus subtilis SCJ1, by using 16S rRNA sequencing and biochemical characterization. We investigated the cell growth of this organism in order to understand its potential for industrial application. To this end, we optimized the culture medium constituents by using the response surface methodology. The Plackett-Burman experimental design was used for screening of the medium constituents, such as molasses, yeast extract and peptone, for improving cell growth. In order to determine the optimal concentration of each constituent, we used a central composite design. Consequently, the optimized concentrations of molasses, yeast extract and peptone were predicted to be 27.5 g/l, 7.5 g/l and 17.5 g/l, respectively. By model verification, we confirmed that a 1.49-fold increase in dry cell weight compared to the basal medium-from 1.32 g/l, to 1.9722 g/l-was achieved.
The genus Paenibacillus is a new group of bacilli separated from the genus Bacillus, and most of species have been isolated from soil. In the present study, we collected 450 spore-forming bacilli from the roots of winter crops, such as barley, wheat, onion, green onion, and Chinese cabbage, which were cultivated in the southern part of Korea. Among these 450 isolates, 104 Paenibacillus-like isolates were selected, based on their colony shape, odor, color, and endospore morphology, and 41 isolates were then finally identified as Paenibacillus spp. by 16S rDNA sequencing. Among the 41 Paenibacillus isolates, 23 were classified as P. polymyxa, a type species of the genus Paenibacillus, based on comparison of the 16S rDNA sequences with those of 32 type strains of the genus Paenibacillus from the GenBank database. Thirty-five isolates among the 41 Paenibacillus isolates exhibited antagonistic activity towards plant fungal and bacterial pathogens, whereas 24 isolates had a significant growth-enhancing effect on cucumber seedlings, when applied to the seeds. An assessment of the root-colonization capacity under gnotobiotic conditions revealed that all 41 isolates were able to colonize cucumber roots without any significant difference. Twenty-one of the Paenibacillus isolates were shown to contain the nifH gene, which is an indicator of $N_{2}$ fixation. However, the other 20 isolates, including the reference strain E681, did not incorporate the nifH gene. To investigate the diversity of the isolates, a BOX-PCR was performed, and the resulting electrophoresis patterns allowed the 41 Paenibacillus isolates to be divided into three groups (Groups A, B, and C). One group included Paenibacillus strains isolated mainly from barley or wheat, whereas the other two groups contained strains isolated from diverse plant samples. Accordingly, the present results showed that the Paenibacillus isolates collected from the rhizosphere of winter crops were diverse in their biological and genetic characteristics, and they are good candidates for further application studies.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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