Antimicrobial peptides (AMPs) have been isolated and characterized from tissues and organisms representing virtually every kingdom and phylum. Their amino acid composition, amphipathicity, cationic charge, and size allow them to attach to and insert into membrane bilayers to form pores by 'barrel-stave', 'carpet' or 'toroidal-pore' mechanisms. Although these models are helpful for defining mechanisms of AMP activity, their relevance to resolving how peptides damage and kill microorganisms still needs to be clarified. Moreover, many AMPs employ sophisticated and dynamic mechanisms of action to carry out their likely roles in antimicrobial host defense. Recently, it has been speculated that transmembrane pore formation is not the only mechanism of microbial killing by AMPs. In fact, several observations suggest that translocated AMPs can alter cytoplasmic membrane septum formation, reduce cell-wall, nucleic acid, and protein synthesis, and inhibit enzymatic activity. In this review, we present the structures of several AMPs as well as models of how AMPs induce pore formation. AMPs have received special attention as a possible alternative way to combat antibiotic-resistant bacterial strains. It may be possible to design synthetic AMPs with enhanced activity for microbial cells, especially those with antibiotic resistance, as well as synergistic effects with conventional antibiotic agents that lack cytotoxic or hemolytic activity.
This study investigated the dyeing properties and bio-functions of cotton fabrics dyed with naturally fermented Ecklonia cava extract in order to compare it with a comparison of unfermented extract. Hot water-extracted Ecklonia cava was fermented naturally under the various conditions of a fermenting period (2-8 days) and amount of molasses (0.1-1.8% v/v); in addition, it was also tested for characterization by FT-IR, antioxidant activity, total polyphenol content, and anti-microbial activity. For dyed cotton fabrics, color strength (K/S), physical color properties, dyeing fastness, sun protective property, and anti-microbial activity were evaluated considering dyeing conditions. As a result, the fermented dye under fermentation condition of 0.1% v/v with molasses during 4 days was revealed as having a similar chemical structure to the unfermented one and showed a total polyphenol content with 32.88mg/g and better antioxidant activity than the unfermented one. As for dyed fabrics, the color strength value by K/S was the highest under the condition of 0.1% v/v of molasses during 4 days among all fermenting conditions. The dyed fabrics had a reasonably good fastness (except for light). Anti-microbial activity against K. pneumoniae was better for the fermented extract-dyed fabric especially with lower dye concentrations.
To investigate the function of N-glycosylation of Cel5A (endoglucanase II) from Hypocrea jecorina, two N-glycosylation site deletion Cel5A mutants (rN124D and rN124H) were expressed in Saccharomyces cerevisiae. The weights of these recombinant mutants were 54 kDa, which were lower than that of rCel5A. This result was expected to be attributed to deglycosylation. The enzyme activity of rN124H was greatly reduced to 60.6% compared with rCel5A, whereas rN124D showed slightly lower activity (10%) than that of rCel5A. rN124D and rN124H showed different thermal stabilities compared with the glycosylated rCel5A, especially at lower pH value. Thermal stabilities were reduced and improved for rN124D and rN124H, respectively. Circular dichroism spectroscopy showed that the modification of secondary structure by mutation may be the reason for the change in enzymatic activity and thermal stability.
방선균 Streptomyces mobaraensis IFO13819 유래 transglutaminase(mTGase)는 칼슘 비의존성으로 식품산업에서 유용하게 이용되고 있는 효소이다. mTGase는 406개의 아미노산으로 구성되어 있는데 leader와 pro 부위는 75개, 구조 부위는 331개의 아미노산으로 구성되어있다. mTGase의 pro와 구조 유전지를 pYAEG-TER 벡터에 클로닝하고 Saccharomyces cerevisiae 2805에 형질전환하였다. 형질전환체에서 mTGase의 발현을 Northern hybridization을 통해 확인하였으며, 최대 26 mU/ml의 mTGase의 활성을 측정할 수 있었다.
Anaerobic ammonium oxidation with nitrite to $N_2$(anammox) is a recently discovered microbial reaction with interesting potential for nitrogen removal from wastewater. Here we investigated the microbial community structure in the sequencing batch reactor(SBR) with an anammox activity. The SBR was optimized for the enrichment of a very slowly growing microbial community and showed that possibility of anaerobic ammonium oxidation. Fluorescence in situ hybridization(FISH) analysis revealed that anaerobic ammonium oxidizers were Candidatus Brocadia anammoxidans and Candidatus Kuenenia stuttgartiensis. Furthermore, Nitrosomol1as spp. of the ${\beta}$ -subclass of Proteobacteria was also present within the anaerobic SBR microorganisms.
Single-stranded DNA binding protein (SSB) is well-characterized as having a helix-destabilizing activity. The helix-destabilizing capability of SSB has been re-examined in this study. The results of restriction endonuclease protection assays and titration experiments suggest that the stimulatory effect of SSB on strand exchange acts by melting out the secondary structure which is inaccessible to RecA protein binding; however, SSB is excluded from regions of secondary structure present in native single-stranded DNA. Complexes of SSB and RecA protein are required for eliminating the secondary structure barriers under optimal conditions for strand exchange.
Fire can affect microbial community structure of soil through altered environmental conditions, nutrient availability, and biotic source for microbial re-colonization. We examined the influence of fire on chemical properties and soil enzyme activities of soil for 10 months. We also characterized the soil microbial community structure through ester-linked fatty acid analysis(EL-FAME). For this study, we established five burned plots(1*1 m) and 5 unburned plots outside the margin of fire. Soil was sampled three soil cores in a each plots and composited for analysis at 1, 3, 5, 8, and 10 month after fire. The fire caused an increase in soil pH, exchangeable Ca, and Mg, organic matter, available $P_2O_5$ compared to unburned sites. The content of $NH_4-N$ in burned site was significantly higher than that of unburned site and this effect continued for 8 months after fire. There was no difference of $NO_3-N$ content in soil between burned and unburned site. Fire caused no change in acid phosphatase and arylsulfatase activities but $\beta$-glucosidase and alkaline phosphatase activities in burned site were increased compared to unburned site. Microbial biomass as estimated by total concentration of EL-FAMEs in burned sites was significantly higher than that of unburned sites at one month after fire. Burned site decreased the EL-FAMEs indicative of gram-positive bacteria and tended to increase the fatty acid associated with gram-negative bacteria at one and three months after fire. The sum of EL-FAME compound $18:2{\omega}6,9c$ and $18:1{\omega}9c$ as served fungal biomarkers was decreased in burned site compared to unburned site.
Chrost, Ryszard J.;Tomasz, Adamczewski;Kalinowska, Krystyna;Skowronska, Agnieszka
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제19권9호
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pp.858-868
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2009
The abundance, biomass, size distribution, and taxonomic composition of bacterial and protistan (heterotrophic and autotrophic nanoflagellates and ciliates) communities were investigated in six lakes of Masurian Lake District (north-eastern Poland) differing in trophic state. Samples were taken from the trophogenic water layer during summer stratification periods. Image analysis techniques with fluorescent in situ hybridization (FISH) as well as [$^3H$]-methyl-thymidine incorporation methods were applied to analyze differences in the composition and activity of bacterial communities. The greatest differences in trophic parameters were found between the humic lake and remaining non-humic ones. The same bacterial and heterotrophic nanoflagellate (HNF) cell size classes dominated in all the studied lakes. However, distinct increases in the contributions of large bacterial (>$1.0{\mu}m$) and HNF (>$10{\mu}m$) cells were observed in eutrophic lakes. The bacterial community was dominated by the ${\beta}$-Proteohacteria group, which accounted for 27% of total DAPI counts. Ciliate communities were largely composed of Oligotrichida. Positive correlations between bacteria and protists, as well as between nanoflagellates (both heterotrophic and autotrophic) and ciliates, suggest that concentrations of food sources may be important in determining the abundance of protists in the studied lakes.
Shifts in the activity and diversity of microbes involved in aliphatic and aromatic hydrocarbon degradation in contaminated soil were investigated. Subsurface soil was collected from a gas station that had been abandoned since 1995 owing to ground subsidence. The total petroleum hydrocarbon content of the sample was approximately 2,100 mg/kg, and that of the soil below a gas pump was over 23,000 mg/kg. Enrichment cultures were grown in mineral medium that contained hexadecane (H) or naphthalene (N) at a concentration of 200 mg/l. In the Henrichment culture, a real-time PCR assay revealed that the 16S rRNA gene copy number increased from $1.2{\times}10^5$to $8.6{\times}10^6$with no lag phase, representing an approximately 70-fold increase. In the N-enrichment culture, the 16S rRNA copy number increased about 13-fold after 48 h, from $6.3{\times}10^4$to $8.3{\times}10^5$. Microbial communities in the enrichment cultures were studied by denaturing gradient gel electrophoresis and by analysis of 16S rRNA gene libraries. Before the addition of hydrocarbons, the gas station soil contained primarily Alpha- and Gammaproteobacteria. During growth in the H-enrichment culture, the contribution of Bacteriodetes to the microbial community increased significantly. On the other hand, during N-enrichment, the Betaproteobacteria population increased conspicuously. These results suggest that specific phylotypes of bacteria were associated with the degradation of each hydrocarbon.
Bacillus subtilis ATCC 6633 was grown in BHIB medium supplemented with $Mn^{2+}$ for 96 h at $37^{\circ}C$ in a shaker incubator. After removing the microbial biomass, a lipopeptide biosurfactant was extracted from the supernatant. Its structure was established by chemical and spectroscopy methods. The structure was confirmed by physical properties, such as Hydrophile-Lipophile Balance (HLB), surface activity and erythrocyte hemolytic capacity. The critical micelle concentration (cmc) and erythrocyte hemolytic capacity of the biosurfactant were compared to those of surfactants such as SDS, BC (benzalkonium chloride), TTAB (tetradecyltrimethylammonium bromide) and HTAB (hexadecyltrimethylammonium bromide). The maximum hemolytic effect for all surfactants mentioned was observed at concentrations above cmc. The maximum hemolytic effect of synthetic surfactants was more than that of the biosurfactant produced by B. subtilis ATCC 6633. Therefore, biosurfactant would be considered a suitable surface-active agent due to low toxicity to the membrane.
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