5,6-dihydroxyindole was easily oxidation with air and light Conditions. Availability of 5,6-dihydroxyindole was studied for hair dye as a precursor of melanin. This study used wet and dry coating process to stabilize 5,6-dihydroxyindole. In wet process used dimethicone and cyclometicone, the 5,6-dihydroxyindole had darkened through the drying process at $58^{\circ}C$. Wet coating process was inappropriate to stabilize the coating. In dry coating process, shea butter coating was stable until 3 days. Dextrin palmitate was most efficient ingredient to prevent oxidation by sun light and air until 7days. Oxidation test with 1.0% and 1.5% of dextrin palmitate was not different under conditions of sun light and air and was not dependent on contents. Vitamin E acetate under conditions of sun light and air, there were no significant effect in preventing oxidation.
본 연구는 갯버들 추출물의 항산화 활성 및 미백활성을 평가하기 위해 수행하였다. 갯버들 줄기의 용매별 추출물의 총 폴리페놀 함량은 142.60-151.95 mg GAE/g, 총 플라보노이드 함량은 83.43-2.60 mg CE/g으로 확인되었다. 갯버들 줄기의 용매별 추출물의 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) 라디칼 소거활성을 평가한 결과 30% 메탄올 추출물이 가장 높은 항산화 활성($IC_{50}$; $19.68{\mu}g/mL$)을 나타내었다. Tyrosinase 억제활성은 4종류의 용매 추출물 모두 유사하게 평가되었으며, 30% 에탄올 추출물 $200{\mu}g/mL$ 농도가 가장 높은 억제활성(35.18%)을 나타내었다. 갯버들 추출물 중 메탄올 추출물은 B16F10 세포주의 생존율에 영향을 미치지 않은 농도에서 유의적으로 멜라닌 생합성을 저해하는 것으로 확인되었다. 결과적으로 갯버들 추출물은 항산화 및 미백활성을 가지는 효과적인 화장품 성분으로 사용 가능할 것으로 사료된다.
Park, Jun-Seong;Park, Hye-Yoon;Rho, Ho-Sik;Ahn, Soo-Mi;Kim, Duck-Hee;Chang, Ih-Seop
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제18권1호
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pp.110-117
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2008
Three kinds of prenylated flavonols, icariside I, icariside II, and icaritin, were isolated from an icariin hydrolysate and their effects on melanogenesis evaluated based on mushroom tyrosinase inhibition and quantifying the melanin contents in melanocytes. Although none of the compounds had an effect on tyrosinase activity, icariside II and icaritin both effectively inhibited the melanin contents with an $IC_{50}$ of 10.53 and $11.13{\mu}M$, respectively. Whereas icariside II was obtained from a reaction with ${\beta}$-glucosidase and cellulase, the icariin was not completely converted into icariside II. Thus, for the high-purity production of icariside II, the reaction was optimized using the response surface methodology, where an enzyme concentration of 5.0mg/ml, pH 7, $37.5^{\circ}C$, and 8 h reaction time were selected as the central conditions for the central composite design (CCD) for the enzymatic hydrolysis of icariin into icariside II using cellulase. Empirical models were developed to describe the relationships between the operating factors and the response (icariside II yield). A statistical analysis indicated that all four factors had a significant effect (p<0.01) on the icariside II production. The coefficient of determination $(R^2)$ was good for the model (0.9853), and the optimum production conditions for icariside II was an enzyme concentration of 7.5mg/ml, pH 5, $50^{\circ}C$, and 12 h reaction time. A good agreement between the predicted and experimental data under the designed optimal conditions confirmed the usefulness of the model. A laboratory pilot scale was also successful.
셀로비오스(cellobiose)는 식물 등에 널리 분포하는 셀롤로오스의 분해 과정에서 생성되는 이당류이다. 환원당인 셀로비오스는 2 개의 β-1,4 결합으로 결합한 구조를 가지며, 식물 등에 존재하는 천연물로서, 건강식품이나 식품의 감미료, 화장품 원료, 의약품 원료로서 활용되어지고 있다. 본 연구에서는 다양하게 유용될 셀로비오스를 기능성 화장품인 미백 화장품 소재로서의 가능성을 확인하고자, 자가포식 활성화 및 멜라닌 생성저해 효능을 검토하였다. 인간 유래 멜라닌 생성 세포로 알려진 MNT-1 세포에서 셀로비오스의 농도에 따른 독성 실험을 진행한 결과 20 mg/mL이하에서 세포독성이 없음을 확인하였고, 공초점 현미경을 통해 셀룰비오스 처리에 따른 자가포식 표지자인 microtubule-associated protein 1 light chain 3 (LC3) puncta의 증가가 확인되었다. 또한 LC3의 형태가 LC3-I에서 LC3-∏로 변환됨을 확인하였으며, 농도와 시간에 따라 LC3-II양이 증가하는 것을 확인하였다. 셀로비오스를 동일 세포에서 20 mg/mL 농도로 7 일간 처리하여 멜라닌 생성량을 분석한 결과, 50% 이상 멜라닌 생성 감소를 확인하였다. 추가적으로, 멜라닌 생성 관련 단백질TYR 및 TYRP1의 발현량을 western blot법을 이용하여 분석한 결과, 농도의존적으로 발현이 저해되어 멜라닌 생성이 감소함을 확인하였다. 이러한 연구 내용을 기반을 토대로 셀로비오스를 함유한 화장품 크림제형을 확보하여 4 주 동안 제형의 변화를 확인 해본 결과 성상이 고온에서 액채형태로 변화하였지만 pH는 변화하지 않았음을 확인하였다. 결론적으로, 자가포식 활성화 및 멜라닌 생성 억제 과정에 셀로비오스가 관여함을 확인하였으며, 이를 통해 미백 화장품 소재로서의 활용 가능성을 제안하고자 한다.
분갈(Pueraria thomsonii Benth)은 전통적으로 중국 의학에서 발열, 급성 이질, 설사, 당뇨병 및 심혈관 질환 치료를 위한 약재로 사용되어 왔다. 이러한 분갈의 꽃인 분갈화의 피부 효능은 아직까지 밝혀진 바 없어, 본 연구에서는 멜라닌세포인 B16F1 세포주와 섬유아세포인 HS68 세포주를 이용하여 분갈화의 피부효능을 검증하고자 하였다. 분갈화의 에탄올 추출물이 멜라닌세포의 멜라닌 합성을 농도 의존적으로 감소시킴을 확인하고, 분갈화 추출물의 효능 성분을 추적하고자 high performance liquid chromatography (HPLC)를 이용하여 분석하였다. 그 결과, 분갈화에 함유된 이소플라본류 화합물인 tectorigenin, tectoridin, tectorigenin 7-O-xylosylglucoside 3종 성분을 확인하였다. 3종 성분 모두 독성을 보이지 않는 농도에서 멜라닌세포의 멜라닌 생합성을 농도 의존적으로 감소시켰으며, 이러한 멜라닌 생합성 감소는 tyrosinase와 microphthalmia-associated transcription factor (MITF) 유전자 발현을 감소시키는 것에 기인함을 확인하였다. 멜라닌 합성저해의 또 다른 기전을 확인하기 위하여, 섬유아세포에서 유래되는 멜라닌 합성억제 인자인 DKK-1의 발현에 대한 영향을 측정한 결과, 분갈화 추출물, tectoridin, tectorigenin 7-O-xylosylglucoside는 DKK-1의 발현을 농도 의존적으로 감소시킨 반면, tectorigenin은 DKK-1의 발현을 농도 의존적으로 증가시키는 것을 확인하였다. 이상의 연구 결과를 바탕으로, 분갈화 성분 중 tectorigenin은 멜라닌세포에서의 멜라닌 합성 억제와 섬유아세포에서의 멜라닌 생성 억제 인자 분비를 촉진하는 효과적인 미백 개선제로 활용할 수 있을 것으로 판단된다.
본 연구는 화장품 소재로서 편백나무(Chamaecyparis obtusa)의 부위별 이용 가능성을 알아보기 위하여 잎·가지(Leaf), 수피(Bark), 목재(Wood), 뿌리(Root)로 분리하여 99.9 % 에탄올에 추출한 시료로 항산화, 미백효능을 확인하였다. 이를 위해 다음과 같은 연구를 진행하였다. 항산화 평가는 11-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) 라디칼 소거능, 2 2′-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-sulfonic acid) diammonium salt (ABTS+) 라디칼 소거능으로 확인하였다. 미백 효과를 평가하기 위해서 mushroom tyrosinase 저해 활성 평가, MTT assay를 통한 편백나무 추출물의 세포독성평가를 진행하였으며 cellular tyrosinase 저해율 측정과 melanin 생합성량을 확인하였다. 항산화 활성 결과 편백나무 부위 중 수피(Bark) 추출물이 가장 효능이 우수하였으며 B16F10 melanoma cell내 편백나무 수피(Bark)는 tyrosinase 활성 억제 및 멜라닌 생합성 억제 효과를 나타내었다. 따라서 편백나무 수피 에탄올 추출물의 안전하고 우수한 미백 기능성 화장품의 천연물질 소재로서의 개발 가능성을 확인하였다.
장수진흙버섯 자실체에서 메탄올을 이용해 추출한 물질의 폴리페놀 함량을 측정한 결과 4.2 mg/g으로 확인되었다. 장수진흙버섯 추출물의 B16/F10 melanoma와 NIH3T3 세포주에 대한 독성시험에서 이들 공시세포는 $200{\mu}g/mL$ 농도에서 50% 이상 생존하여 세포독성은 없는 것으로 확인되었다. DPPH 전자공여능 시험에서 장수진흙버섯 추출물의 항산화 효과는 농도 의존적으로 나타났으며 양성대조군인 BHT에 비해 우수하였다. 장수진흙버섯 추출물을 B16/F10 melanoma 세포에 150 mg/mL 처리하여 세포내 티로시나아제의 저해능을 조사한 결과, 양성대조군인 arbutin은 31.2%의 저해능을 보인 반면, 같은 농도의 장수진흙버섯 추출물 처리군의 저해능은 46.0%로 나타나 장수진흙버섯 추출물의 티로시나아제의 저해능이 양성대조군 보다 높았다. 또한 장수진흙버섯 메탄올 추출물을 B16/F10 melanoma 세포에 처리하여 멜라닌 생성량을 조사한 결과 $100{\mu}g/mL$ 농도 처리군의 멜라닌 생성량은 대조군의 31.3%로 같은 농도의 arbutin을 처리한 군의 43.9%에 비해 효과가 높았으며, 투여한 추출물의 농도가 증가함에 따라 멜라닌의 생성량은 농도 의존적으로 감소하였다. 또한 장수진흙버섯 메탄올 추출물을 분광광도계를 이용하여 자외선 영역에서의 흡수 스펙트럼을 조사한 결과 270-370 nm의 자외선 파장에서 흡광도가 높아 자외선 차단효과가 우수하였다. 따라서 장수진흙버섯의 메탄올 추출물은 피부미백이나 자외선차단 기능성 화장품으로 개발의 가능성이 높다고 사료되었다.
본 연구에서는 아가위 열매(Crataegi fructus)를 70% 에탄올로 추출하여 추출물의 항산화능과 미백 효과에 대해 알아봄으로써 기능성 미백 화장품의 천연 소재로서의 가능성을 알아보았다. 아가위 열매 에탄올 추출물의 총 폴리페놀 함량은 61.31 mg/g, 플라보노이드 함량은 25.42 mg/g으로 나타났으며, 전자공여능은 $1,000{\mu}g/mL$에서 85.80%, ABTS 라디칼 소거능은 17.3%, 환원력은 0.31로 나타났다. Melanoma 세포에 대한 아가위 열매 에탄올 추출물의 최대 허용농도는 $100{\mu}g/mL$으로 확인되어 세포독성이 미약함을 확인하였다. 멜라닌 생성 저해능은 $50{\mu}g/mL$에서 8.5%, 세포 내 tyrosinase 활성 저해능은 $1,000{\mu}g/mL$에서 46.83 %를 나타내었다. 아가위 열매 추출물은 약재와 식용 및 약용식물로 이용되는 여러 천연물보다 다량의 페놀화합물 및 각종 생리활성 성분을 함유하였으며 항산화 활성 및 미백 효과를 나타내었으며 추후 용매별 분획물을 사용하여 항산화 및 미백 효능을 나타내는 지표성분의 확인의 연구가 진행된다면 연구 결과를 바탕으로 기능성 제품의 첨가제나 천연 항산화 소재 및 기능성 미백 화장품 소재로서 활용 가능하리라 생각된다.
The primary objective of this study was to assess the in vitro melanogenesis inhibitory effects of methanolic extracts of the edible and medicinal lichens, Umbilicaria (Gyrophora) esculenta and Usnea longissima. The quantities of the total phenolic compounds of methanolic extract of the two lichen extracts were determined to be 1.46% and 2.62%, respectively. In order to evaluate the antioxidative effects of the extracts, we also measured electron donating abilities (EDA) and lipid peroxidation rates. The EDA values measured by the reduction of 1.1'-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) were 72.8% and 80.7% for the extracts, with $SC_{50}$ (median scavenging concentration) values of $1.29{\pm}0.05\;mg/ml$ and $1.03{\pm}0.06\;mg/ml$, respectively. The rates of inhibition of lipid peroxidation using linoleic acid were 92.1% and 97.3% for the extracts, with $IC_{50}$ (median inhibitory concentration) values of $0.57{\pm}0.05\;mg/ml$ and $0.53{\pm}0.06\;mg/ml$, respectively. The inhibitory rates of the extracts against tyrosinase were 67.4% and 84.8%, respectively. The extracts were shown to reduce melanin formation in human melanoma cells. Melanin contents in the samples treated with 0.01% and 0.1% U. esculenta were 47.1% and 31.2%, respectively, and those treated with 0.01% and 0.1% Usnea longissima were 51.1% and 34.9%, respectively, whereas a value of 54.0% was registered when ascorbic acid was utilized as a positive control. In addition to direct tyrosinase inhibition, it was determined that the lichen extracts affected the activity of tyrosinase via the inhibition of tyrosinase glycosylation. As a result, the methanolic extracts of U. esculenta and Usnea longissima evidenced melanogenesis inhibitory effects, which occurred via multiple routes.
This study describes the anti-inflammatory, anti-oxidant, and melanogenesis inhibition activities of methanol extract and various organic solvent fractions of Arecae Pericarpium. We examined the inhibition of lipopolysaccharide (LPS)-induced nitric oxide (NO) production in RAW 264.7 cells, 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazine (DPPH) scavenging activity, mushroom tyrosinase inhibition activity and melanin contents. The study showed that, among all tested fractions, methylene chloride fraction showed the strongest inhibition of LPS-induced NO production in RAW 264.7 cells ($IC_{50}$ value $8.89{\mu}g/mL$) and DPPH radical scavenging activity ($EC_{50}$ value $21.39{\mu}g/mL$). Methylene chloride and ethyl acetate fractions similarly inhibited mushroom tyrosinase activity. Methanol extract exhibited strongest reduction of melanin content in B16F10 melanoma cells. Based on the bioactivity assay results, methylene chloride and ethyl acetate fractions were further separated. Eight phenolic compounds were isolated, which are dimeric syringol (1), catechol (2), 4-hydroxybenzaldehyde (3), vanillin (4), 4-hydroxyacetophenone (5), apocynin (6), protocatechuic acid (7) and 4-hydroxybenzoic acid (8). Among the isolated compounds tested, catechol showed the strongest inhibition of LPS-induced NO production in RAW 264.7 cells. Catechol also showed the concentration-dependent NF-${\kappa}B$ inhibition activity. Arecae Pericarpium might have potentials to be developed as anti-inflammatory agent or dermatological product for skin-whitening agent.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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