This study was carried out to compare lactic acid bacteria count of liquid type yogurts with various experimental conditions during shelf-life period. The conditions were media(BCP and Elliker agar), incubation conditions(aerobic and anaerobic), dilution waters(saline and phosphate buffer) and dilution methods(10 and 100 times). All of the samples were incubated at $37^{\circ}C$ for 72 hrs. In the case of counting L. acidophilus as a yogurt starter culture, there were differences on dilution waters and incubation conditions, but were no difference on media and dilution methods. In the case of counting L jugurti and mixed strain with L. acidophilus and L. casei, there were differences on media, incubation conditions and dilution waters, but was no difference on dilution methods. For L. casei in the yogurt, media and dilution methods were shown slightly different viable cell count but incubation conditions were not shown difference. In the case of counting L. bulgaricus, there were differences on media, incubation conditions and dilution methods, but was no difference on dilution waters. Therefore, the measurment of lactic acid bacteria count may be effective if preferred experimental conditions are selected for different types of strain.
The purpose of this study was to investigate the inhibitory effect of antibacterial substances produced by probiotic lactic acid bacteria (LAB) against biogenic amines-producing bacteria and the influence of culture conditions on the antibacterial activity of bacteriocin and organic acid. The bacteriocin solutions of Lactobacillus plantarum FIL20 (64 AU/ml) and Lactobacillus paracasei FIL31 (128 AU/ml) showed strong antibacterial activity against Serratia marcescens CIH09 and Aeromonas hydrophilia RIH28, respectively. And the lactic acid contents in the cell-free culture supernatants (CFCS) obtained from FIL20 and FIL31 strains were $107.3{\pm}2.7mM$ and $129.5{\pm}4.6mM$, respectively. Therefore, the bacteriocin solution (200 AU/ml) and the CFCS ($200{\mu}l/ml$) produced by L. plantarum FIL20 and L. paracasei FIL31 significantly (P < 0.05) decreased the bacterial numbers and histamine and tyramine production ability of S. marcescens CIH09 and A. hydrophilia RIH28. The amounts of histamine and tyramine produced by the CIH09 strain under conditions of low initial pH (5.0) and incubation temperature ($15^{\circ}C$) was significantly reduced by treatment with bacteriocin solution and CFCS obtained from L. plantarum FIL20. In addition, the bacterial counts and biogenic amines contents of CIH09 strain were significantly decreased (P < 0.05) when sodium chloride (5%) or potassium nitrite (200 mg/g) were mixed with the antibacterial substances of L. plantarum FIL20. Consequently, the bacteriocin and organic acid solution of L. plantarum FIL20 and L. paracasei FIL31 can be used as a biological preservation to effectively control the production of biogenic amines by the application of hurdle technology.
We measured physiological functionalities, including antihypertensive angiotensin I-converting enzyme inhibitory activity and immun-stimulating ${\beta}$-glucan content for sixty kinds of Makgeolli that is commercially available from the market. As a result, we selected R-12 commercial raw Makgeolli, with a high content of immuno-stimulating ${\beta}$-glucan, and R-14 commercial raw Makgeolli, exhibiting high antihypertensive activity. Due to the similarities in their overall physicochemical properties and raw materials used for fermentation, we compared the microbial flora in order to investigate the reason for the differences in their functionalities. Nested PCR and denaturing gradient gel electrophoresis for yeasts and bacteria were performed for analysis of microbial diversity of two different kinds of Makgeolli (i.e., R-12, R-14), which showed immuno-stimulating ${\beta}$-glucan content and exhibited a very high level of antihypertensive activity, respectively. Analysis of the 18S rDNA amplicon revealed a major presence of the yeast strain Pichia burtonii in every Makgeolli sample. Analysis of the 16S rDNA amplicon revealed a predominance of lactic acid bacteria, and the most frequent lactic acid bacteria were Lactobacillus ingluviei, L. fermentum, and L. harbinensis, and Lactobacillus sp. Among these, L. harbinensis was detected only in R-12 and L. ingluviei was found only in R-14. Different functionalities from the individual commercially available Makgeolli may be attributed to actions of different microbial flora during fermentation.
Antibiotic-resistant Staphylococcus aureus is beginning to pose a social issue. Thus, there is an urgent need for the development of effective anti-staphylococcal agents to eradicate antibiotic-resistant S. aureus in food systems and to treat the pathogen in clinical areas. To address this need, lactic acid bacteria (LAB) from kimchi were screened for the production of anti-staphylococcal bacteriocin. From this screening, a bacteriocin generated by the MK3 strain, which was identified by 16S rRNA gene sequence analysis as Enterococcus faecium, demonstrated antimicrobial activity against an S. aureus strain, and was designated enterocin MK3. Enterocin MK3 also demonstrated activity against other gram-positive bacteria, including several LAB and Listeria monocytogenes, but not gram-negative Escherichia coli. The molecular mass of enterocin MK3 was estimated as approximately 6.5 kDa on an SDS-PAGE (sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis) gel.
Pediococcus acidilactici strain M produced a bacteriocin which was proteinaceous, heat stable, and exhibited antimicrobial activity against lactic acid bacteria, variety of food spoilage and pathogenic bacteria. The antimicrobial activity was not caused by $H_2$$O_2$ and organic acid, and was remained between pHs of 4.0 to 9. Molecular weight of crude bacteriocin was approximately 2, 500. Phenotypic assignment after plasmid cruing experiment demonstrated that a 53.7 kilobase (kb) plasmid, designated as pSUC53, was responsible for the sucrose fermentation phenotype ($Suc^+$) and a 11.1 kb plasmid, designated as pBAC11, was associated with bacteriocin production phenotype ($Bac^+$). Neither of the two plasmids were linked to antibiotic resistance.
Kim, Sang-Kyo;Lee, Sang-Jun;Baek, Young-Jin;Park, Yun-Hee
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.22
no.3
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pp.259-265
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1994
A bacteriocin-producing lactic acid bacteria was isolated from contaminated milk products, which was identified by using the API50 CH kit as Lactococcus lactis subsp. lactis with reliability of 98%. Fatty and analysia of the cell membrane showed that this strain contained same fatty acids profiles as type strain, Lactococcus lactis subsp. lactis ATCC 19435. The bacteriocin of Lactococcus sp. HY 449 showed relatively wide range of inhibition spectrum against gram positive and some gram negative bacteria such as Escherichia coli and maintained the inhibitory activity between pH2.0 and pH9.0 The thermostability of this bacteriocin was higher in acidic solution than in distilled water and was stable at 60$\circ $C for 1 hour.
Lactic acid bacteria with amylolytic and acid producing activities can ferment starch directly to lactic acid thereby producing a monomer for the production of biodegradable poly lactic acid (PLA). In this study, the strain producing L-lactic acid from soluble starch was isolated from Nuruk. The isolated strain was identified as Enterococcus sp. through its morphological, cultural, biochemical characteristics as well as the 16S rDNA sequence analysis, and named Enterococcus sp. JA-27. Enterococcus sp. JA-27 produced exclusively L-lactic acid from soluble starch as a carbon source. The optimal conditions for the maximum production of L-lactic acid from Enterococcus sp. JA-27 were 30 C, pH 8, 1.5 % soluble starch as a substrate and 3.5 % tryptone as a nitrogen source, 0.1 % $K_2$$HPO_4$, 0.04 % $MgSO_4$. $7H_2$O, 0.014 % $MnSO_4$$.$4$H_2O$, 0.004% $FeSO_4$$.$$7H_2$O. Batch and fed batch culture were carried out and the former was more effective. L-Lactic acid production in the optimum medium was significantly increased in a 7 L jar fermenter, where the maximum L-lactic acid concentration was 3 g/L. For the purification of lactic acid in fermented broth, two stage ionexchange column chromatographies were employed and finally identified by HPLC.
From the extensive screening for small cryptic plasmid among about 23 lactic acid bacteria (LAB), 2.4 kb of cryptic plasmid was isolated from Lactobacillus farciminis strain KCTC 3681 and named as pLF24. The plasmid pLF24 was a circular molecule of 2,396 base-pairs in length with a G+C content of 38%. Two protein-coding sequences could be predicted. ORF1 and ORF2 showed homologies to plasmids of gram-positive bacteria. The replication protein coded by ORF2 and the plus origin, were similar to replication regions of other gram-positive bacteria as shown in plasmids such as pLH2, pLS141-1 and pLC2. The nucleotide sequence of pLF24 was deposited into Genbank data base with an accession number of EU429343. The newly isolated plasmid can be used for construction of shuttle vector in Lactobacillus bacteria.
A bioluminescent Lactobacillus plantarum (pLuc2) strain was constructed. The luminescent signal started to increase during the early exponential phase and reached its maximum in the mid-exponential phase in a batch culture of the strain. The signal detection sensitivity of the strain was the highest in PBS (phosphate buffered saline), followed by milk and MRS broth, indicating that the sensitivity was influenced by the matrix effect. The strain was used in millet seed fermentation which has a complex matrix and native lactic acid bacteria (LAB). The luminescent signal was gradually increased until 9 h during fermentation and abolished at 24 h, indicating that the strain could be specifically tracked in the complex matrix and microflora. Therefore, the bioluminescent labeling system can be used for monitoring LAB in food and dairy sciences and industries.
The probiotic characteristics of a total of 137 lactic acid bacterial strains isolated from soybean paste were investigated. Among those tested, the D37 strain was selected as a probiotic bacteria due to its acid and bile tolerance, and its strong anti-cancer and antibacterial activities. The D37 strain showed highly stable viability at acidic pH for 2 hr, and was very stable in 10% bovine bile. The viability of human colon cancer HT-29 cells was inhibited more than 60% at a $200\;{\mu}/mL$ concentration of D37 cell-free culture supernatant, and the degree of inhibition was concentration-dependent. The D37 strain showed a wide range of antibacterial activities against food-borne pathogenic bacteria such as Escherichia coli O157, Listeria spp., Vibrio spp., Salmonella spp., and Staphylococcus aureus. According to phenotypic characteristics and the utilization of various sugars, the D37 strain was identified as Lactobacillus cellobiosus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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