As generic health functional food items have been expanded, this research project has been conducted to prepare a scientific and systematic standardized analytical method of relevant food item and examine the suitability of the method for health/functional foods on sale. Total polyphenol was necessary for development and verification of standardized analytical method. The method exhibited high linearity in the tannic acid calibration curve ($r^2$ > 0.999) over concentrations of $5-50{\mu}g/mL$. The limits of detection and quantitation for tannic acid were $5{\mu}g/mL$ and $15{\mu}g/mL$, respectively, while tannic acid recovery was 102.3-112.4% with standard deviations of 0.8-3.2%. To verify the accuracy of the analytical method, the labeled amounts of purchased health functional foods were monitored. The recovery for tannic acid was 105.6% of the labeled amounts. Thus, the new method was suitable for all cases.
Based on the Korean Health Functional Food Act, health functional foods are dietary supplements containing nutrients or other substances that have nutritional or physiological effects. Since generic health functional food items have been expanded, this project was performed to develop a standardized analytical method of examining such sale items. The method exhibited high linearity in the quercetin calibration curve ($R^2$ > 0.999) over concentrations of $0-40{\mu}g/mL$. The limits of detection and quantitation for quercetin were $0.12{\mu}g/mL$ and $0.36{\mu}g/mL$, respectively, while quercetin recovery was 97.1-105.4 % with standard deviations of 1.15-3.11 %. To verify the accuracy of the analytical methods, the labeled amounts of purchased health functional foods were monitored. The recovery rate for multiple quercetin concentrations ranged from 82.5-105.1 % of the labeled amounts. Thus, the new method was suitable for all cases.
Anionic peroxidases (POD) were isolated from Korean radish (Raphanus sativus L.) root by using fractionation with $(NH_4)_2SO_4$ and CM-cellulose ion exchange chromatography and used as the colorimetric enzyme for glucose determination. The chromogen used in this work was o-tolidine or 4-aminoantipyrine/diethylaniline (4AA/DEA) and the colored products were measured at 630 nm. Korean radish anionic POD showed much better colorimetric reaction of glucose determination with 4AA/DEA than with o-tolidine. The r values of calibration curve for glucose determination by o-tolidine and 4AA/DEA were 0.9983 and 0.9963, respectively. In order to compare the reactivity for substrate oxidation by Korean radish POD and horseradish POD, the Km values against o-dianisidine and guaiacol were measured. Korean radish POD had about 40 fold higher affinity for o-dianisidine and 2 fold higher affinity for guaiacol as revealed by Km values. These results showed that Korean radish POD could be developed as the colorimetric diagnosis reagent for glucose determination with high sensitivity.
A rapid, sensitive and selective hydrophilic interaction liquid chromatography-tandem mass spectrometric(HILIC-MS/MS) method for the determination of tiapride in human plasma was developed. Tiapride and internal standard, metoclopramide were extracted from human plasma with dichloromethane at basic pH and analyzed on an Atlantis HILIC silica column with the mobile phase of acetonitrile-ammonium formate (190 mM, pH 3.0) (94:6, v/v). The ana-Iytes were detected using an electrospray ionization tandem mass spectrometry in the multi-ple-reaction-monitoring mode. The standard curve was linear (r=0.999) over the concentration range of 1.00-200 ng/mL. The coefficient of variation and relative error for intra- and inter-assay at three QC levels were 6.4∼8.8% and -2.0∼3.6%, respectively. The recoveries of tiapride ranged from 96.3 to 97.4%, with that of metoclopramide (internal standard) being 94.2%. The lower limit of quantification for tiapride was 1.00 ng/mL using 1 00 $\mu$L of plasma sample.
An experiment was conducted to establish a large scale production method of anti-serum against chicken IgM and to profile the developmental changes of serum IgM levels during the feeding period(from hatching to 7 weeks of age) in broiler chicks. Blood samples were taken from Hubbard chicken at the age of hatching, three days of age, and weekly thereafter till to 7 weeks of age. The pure IgM was isolated from ammonium sulfate treated chicken serum by both sephadex G-200 and sepharose CL-6B chromatography. The breaking-through peak containing IgM appeared from the fraction 26 to 28. These fractions consisted mainly of IgM when tested by anti-chicken IgM(Nordic, Netherlands). Immunized with the heavy chain of this purified IgM, the rabbit immune sera(anti-chicken IgM) were formed a reaction only with the purified chicken IgM. The quantitative assay of serum IgM were carried by RID method. The optimal time for diffusion was 14 hours and the coefficient of determination($R^{2}$) for regression equation of standard curve was 0.992. It was observed that IgM concentrations were the highest at hatching(3.23 mg /mL), after that decreased gradually. From 2 to 5 weeks of age the levels unchanged(2.0 ~ 2.3mg /mL), and gradually decreased to 7 weeks of age(1.3 mg /mL).
Lee, Sang Hoon;Jeong, Yun Sook;Song, Jin;Hwang, Kyung-A;Cho, Soo Muk;Hwang, In Guk
The Korean Journal of Food And Nutrition
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v.31
no.3
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pp.408-415
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2018
This study aimed to investigate the changes in the ${\gamma}$-aminobutyric acid (GABA) content of bitter melon (Momordica charantia L.) cultivated from different regions, with different harvest times and at various maturation stages. Methods for observing the changes in GABA content were validated by determining the specificity, linearity, limit of detection (LOD), limit of quantification (LOQ), and precision and accuracy using the HPLC-FLD system. Results showed high linearity in the calibration curve with a coefficient of correlation ($R^2$) of 0.9999. The LOD and LOQ values for GABA were 0.29 and $0.87{\mu}g/mL$, respectively. The relative standard deviations for intra- and inter-day precision of GABA were less than 5%. The recovery rate of GABA was in the range of 98.77% to 100.50%. The average content of GABA was 0.93 mg/g and Cheongju showed highest GABA content of 1.88 mg/g. As the time of harvest increased from May to September, the GABA content decreased from 1.56 to 0.86 mg/g. Also, maturation of the bitter melon fruit was associated with a decreased in GABA content.
Seo, Chang-Seob;Kim, Jung-Hoon;Lim, Soon-Hee;Shin, Hyeun-Kyoo
Herbal Formula Science
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v.19
no.1
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pp.183-194
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2011
Objectives : To estimate the shelf-life by long-term storage test of Pyungwi-san. Methods : Experiments were conducted to evaluate the stability such as the selected physicochemical, heavy metal, microbilogical experiment under an acceleration test and long-term storage test of Pyungwi-san in different storage under room temperature, refrigeration and freezing. Futhermore, HPLC analysis was performed for the determinations of glycyrrhizin in the Pyungwi-san on an Inertsil ODS-3 column(250 mm ${\times}$ 4.6 mm, 5 um) using solvent 35% acetonitrile include 0.05% phosphoric acid at 254 nm. The flow rate was 1.0 mL/min. Results : The significant change was not showed in pH, heavy metal, microbiological, identification test and quantitative analysis based on acceleration test and long-term storage test. Retention time of glycyrrhizin in HPLC chromatogram was about 16.065 min and calibration curve showed good linearity($R^2$ = 0.9999). The contents of glycyrrhizin in acceleration test and long-term storage test were 0.068~0.076 mg/mL and 0.066~0.077 mg/mL, respectively. Shelf-lifes of room temperature, refrigeration and freezing by long-term storage test were predicted 41, 24 and 34 months, respectively. Conclusions : The suggested shelf-life would be helpful on the storage and distribution of herbal medicine.
This paper describes first development and validation of pentafluorophenylprophyl ligand-based liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry (PFPLC-MS/MS) method to determine metformin, a highly polar compound, in human plasma. Metformin and Phenformin (internal standard) were extracted from human plasma 50 ${\mu}L$ with a single-step protein precipitation. The chromatographic separation was performed using a linear gradient elution of mobile phase involving 5.0 mM ammonium formate solution with 0.1% formic acid (A) and acetonitrile (B) over 3.0 min of run time on a Phenomenex Luna PFP column. The detection was performed using a triple-quadrupole tandem mass spectrometer (Waters Quattro micro) with electrospray ionization in the mode of positive ionization and multiple-reaction monitoring (MRM). The developed method was validated with 5.0 ng/mL of lower limit of quantification (LLOQ). The calibration curve was linear over 5-3000 ng/mL of the concentration range ($R^2$ > 0.99). The specificity, selectivity, carry-over effect, precision, accuracy and stability of the method met the acceptance criteria. The method developed in this study had had rapidness, simplicity and ruggedness. The reliable method was successfully applied to high throughput analysis of real samples for a practical purpose of a pharmacokinetic study.
This paper describes an in-depth analysis on flexural strength of a girder-deck system experiencing a strand debonding damage with various strengthening systems, based on finite element software ABAQUS. A detailed finite element analysis (FEA) model was developed and verified against the relevant experimental data performed by other researchers. The proposed analytical model showed a good agreement with experimental data. Based on the verified FE model, over a hundred girder-deck systems were investigated with the consideration of following variables: 1) debonding level, 2) span-to-depth ratio (L/d), 3) strengthening type, 4) strengthening material thickness. Based on the data above, a new detailed analytical model was developed and proposed for estimating residual flexural strength of the strand-debonding damaged girder-deck system with strengthening systems. It was demonstrated that both finite element model and analysis model could be used to predict flexural behaviors for debonding damaged prestressed girder-deck systems. Since the strands are debonding from surrounding concrete over a certain zone over the length of the beam, the increase of strain in strands can be linked with a ratio ψ, which is Lp/c. The analytical model was proposed and developed regarding the ratio ψ. By conducting procedure of calculating ψ, the ψ value varies from 9.3 to 70.1. Multiple nonlinear regression analysis was performed in Software IBM SPSS Statistics 27.0.1 to derive equation of ψ. ψ equation was curved to be an exponential function, and the independent variable (X) is a linear function in terms of three variables of debonding level (λ), span length (L), and amount of strengthening material (As). The coefficient of determinate (R2) for curve fitting in nonlinear regression analysis is 0.8768. The developed analytical model was compared to the ultimate capacities computed by FEA model.
A method for the determination of trace amount of caffeine in urine and various drink samples using hollow fiber-liquid phase microextraction (HF-LPME) and capillary gas chromatograph/nitrogen phosphorus detector (GC/NPD) has been established. HF-LPME method has been optimized with respect to several experimental parameters including the effects of the hollow fiber length, extraction solvent, stirring mode, pH and salt concentration for the determination of caffeine from aqueous samples. The correlation coefficient of calibration curve for caffeine was 0.9994. The average recovery was 102%(n=3). The established method is feasible for the determination of trace amounts of caffeine in several aqueous sample. The limit of detection (LOD) and the limit of quantitation (LOQ) have been found to be 2.5 and 10 ng/mL, respectively. The established HF-LPME method for the analysis of caffeine from aqueous sample can be used for the determination of biological, food and environmental samples.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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