우유중에 상당량 존재하는 myo-Inositol의 생성을 알아보기 위하여 3% SE-52를 충진시킨 gas-liquid chromatography에 의해 myo-Inositol의 정량을 행하고 이 myo-Inositol의 유래를 feeding 실험과 $(^{14}C)-glucose$와 (3H)-myo-Inositol을 쥐에 주사한 실험으로 알아 븐 결과 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 쥐우유를 G.L.C. 방법으로 분석하여 우유 100gm.당 61-91mg.의 myo-Inositol (free)을 얻었다. 2. Feeding 실험 결과 우유 myo-Inositol의 85%는 diet에서 흡수되었고 나머지는 mammary gland에서 합성된 것으로 나타났다. 3. $(^{14}C)-glucose$에서 $(^{14}C)-myo-Inositol$ 생성은 lactose의 생성과 비슷하게 한시간이내에 최고에 달하였다. 4. $(^3H)-myo-Inositol$을 lactating rat에 주사하여 실험한 결과 우유 myo-Inositol의 대부분은 혈액 myo-Inositol에서 유래되었다. $(^{14}C)-glucose$를 주사한 후 우유중에 나타난 myo-Inositol의 비방사능(比放射能)은 4시간 후에 혈액 glucose의 8%였다.
myo-Inositol의 이성질체인 D-chiro-inositol은 제 2형 당뇨병에 탁월한 효과를 나타내고 있다. D-chiro-inositol의 methylated 형태인 D-pinotol과 D-chiro-inositol은 식물체가 가뭄, 염, 저온과 같은 비 생물학적 스트레스에 노출되게 되면 삼투보호물질로써 합성되어 축적되어 진다. 대두에서는 myo-inositol O-methyltrasnferase에 의하여 ononitol이 합성되고 ononitol epimerase에 의하여 D-pinitol이 합성되고 최종적으로 demethylase에 의하여 D-chiro-inositol이 합성되어 진다. 그러나 쓴메밀에서는 myo-inositol이 직접적으로 D-chiro-inositol로 합성되어 진다는 보고가 있다. 본 실험에서는 쓴메밀에 비 생물학적 스트레스를 처리한 후 cyclitols의 변화를 측정하였다. 그 결과 쓴메밀에서는 myo-inositol epimerase에 의하여 myo-inositol이 D-chiro-inositol로 직접 전환된다는 사실을 확인하였다.
1. myo-inositol (aeeeee) 에서 scyllo- (eeeeee), epi-(aeaeee) 및 muco-inositol (aaaeee)에 도달(到達)시킬 수 있었다. 2. inositol의 과산화수소(過酸化水素) 산화(酸化)는 ax. 수산기(水酸基)가 산화(酸化)되어 microbial oxidation, 접촉산화(接觸酸化)에서와 대등(對等)한 inosose를 얻고, 이것은 산성(酸性)에서 $NaBH_4$로 환원(還元)하면 eq.-alcohol이 되며, 한편 접촉산원(接觸還元)하면 az. alcohol 이 된다. 3. inositol의 p-HBA ester인 사종(四種) 신화합물(新化合物) [III], [XII], [XVI], [XXI]을 합성(合成)하였다. 4. 이들 ester는 모두 항균작용(抗菌作用)이 있고 pH의 저하(低下)로 증대(增大)되는 경향(領向)이 있으며 muco-inositol ester는 가장 강력(强力)하고, 이는 입체구조(立體構造)와 관련(關聯)되는 것 같다.
본 연구는 미성숙돼지 난모세포의 체외 성숙에 있어서 myo-inositol의 영향을 알아보기 위하여 실시하였다. 미성숙 돼지 난모세포을 myo-inositol을 포함하는 또는 포함하지 않은 체외 성숙배지에서 44시간 체외 성숙을 유도하였을 때 성숙율은 myo-inositol을 첨가한 성숙배지에서 성숙시킨 실험구에 유의하게 높았다(P<0.05). Myo-inositol 에 의한 성숙율 향상에 있어서 난구세포의 영향을 알아보기 위하여 난구세포의 치밀도에 따라 분류하여 미성숙 난모세포을 myo-inositol을 포함하는 체외 성숙배지에서 배양하였을 때 난구세포가 치밀한 미성숙 난모세포에서가 더 높은 성숙율을 나타내었다(P<0.05). 그러나 난구세포가 치밀하지 않은 미성숙 난모세포도 myo-inositol을 포함하는 성숙배지에서 배양하면 성숙율은 대조구에 비하여 유의하게 높았다(P<0.05). 이러한 결과는 돼지 난모세포의 체외 성숙배지에 myo-inositol의 첨가는 체외 성숙율을 향상시킬 수 있음을 나타내고 있다.
본 연구는 혈당강하효과를 갖는 chiro-inositol을 다량 함유하고 있는 식품이나 식용물질을 탐색하여 선발하고, 선택된 식품이나 식용물질에서 chiro-inositol을 분리$ {\cdot}$정제하여 정제된 chiro-inositol로 동물실험을 실시하여 혈당강하효과를 증명하였다. 약 300여종의 식품 및 식용물질을 HPLC로 분석한 결과 식품으로 안전한 대두 부산물인 탈지대두와 두부 순물에서 chiro-inositol의 함량이 각각 6.75 mg/g, 20mg/kg로 조사되어 선택되었고, chiro-inositol의 순도가 $90\%$ 이상(w/w)인 chiro-inositol의 추출물을 이용하여 동물실험을 통한 혈당강하효과를 조사하였다. 그 결과, STZ로 유발된 고혈당 쥐에 경구 투여시, 약 $40\%$의 강한 혈당강하 효과를 나타내었으며 지속시간은 약 12시간이었고, 인슐린과 복합처리 했을 때 상승작용(synergy)을 나타내었으며, 저혈당증으로 전혀 발전되지 않았다.
Inositol은 세포의증식 및 정보전달과정에 관여하는 phosphatidylinositol (PI)의 구성성분으로서 중요한 세포내 기능을 수행한다. P1는 세포내에서 특이적 인산화효소에 의하여 Pl4-phosphate(PIP), Pl4,5-phosphate($PIP_2$)로 변환되며 PIP$_2$는 phospholipase C(PLC)에 의하여 세포내 second messengers인 1,2-diacylglycerol (DAG)와 inositol 1,4,5-triphosphate ($IP_3$)로 변환된다. 이렇게 생산된 DAG와 IP3는 각각 protein kinase C의 활성과 $Ca^{2++}$의 동원에 관여하여 다양한 세포내 신호전달에 관여하는 것으로 보고되고 있다. 또한 mouse에서 $IP_3$의 작용에 의한 $Ca^{2++}$의 상승은 난모세포의 성숙분열이 촉진되고 돼지 난포세포에 있어서도 PI대사가 일어나고 있는 것으로 보고되고 있다. 본 연구에서는 돼지 미성숙 난모세포의 성숙과 단위발생에 미치는 inositol의 영향을 확인하기 위하여 실시하였다. inositol의 농도가 난포란의 성숙에 미치는 영향을 검토하기 위하여 난포란을 각각 $150 \mu mole$, $250 \mu mole$, $350 \mu mole$, inositol을 포함하는 Whitten's 배양액에서 44시간 성숙시킨 결과 $93.57 \pm 4.21, 93.91 \pm 2.71, 92.96 \pm 3.58%$가 성숙되어 대조구의 $87.10 \pm 4.21$보다 유의적(P<0.05)으로 차이를 나타내었다. 난포란의 등급에 따른 inositol의 영향을 확인하기 위하여 형태적으로 난구세포가 치밀한 난포란과 난구세포가 치밀하지 않은 난포란을 $250 \mu mole$ inositol을 포함하는 Whitten's 배양액에서 성숙을 유도한 결과 난구세포가 치밀한 난포란과 난구세포가 치밀하지 않은 난포란에서 inositol을 첨가하였을 때 성숙율은 각각 $95.35 \pm 2.22와 63.55 \pm 8.12$로 inositol을 첨가하지 않은 대조구보다($89.21 \pm 3.69와 48.56 \pm 8.99$) 유의적인 차이를 보였다. 난구세포가 inositol에 의한 성숙에 미치는 영향을 확인하기 위하여 난구세포를 제거한 난포란을 inositol을 포함하는 배지에서 성숙을 유도한 결과 inositol을 첨가하지 않은 처리구보다 양호한 성숙율을 보였다.
This study was carried out to elucidate the preventive mechanism of molybdenum on lead-induced neuropathy, An animal model of lead neuropathy was induced by feeding diet containing lead to Sprague-Dawley rat for three weeks. Four weeks aged Sprague-Dawley rats were divided into four groups : normal control group, 10ppm-lead treated group, 1mg/kg-molybdenum treated group, 10ppm-lead and 1mg/kg-molybdenum treated group. The parameters on neuropathy were examined by measuring concentration of myo-inositol and myo-inosito uptake in sciatic nerve. In the lead-treated rats, myo-inositol concentration and myo-inositol uptake rate were reduced by from 54% to 33% respectively. This deficit results from that myo-inositol uptake system which is carrier mediated and sodium-potassium dependent was inhibited by the lead treatment. However, the molybdenum administration significantly eliminated the impairment and maintained myo-inositol concentration to about 82% of normal level. These results suggest that lead-induced neurotoxicity was significantly reduced by administration of molybdenum and the mechanism might be partly normalization of myo-inositol uptake system in sciatic nerve.
In our previous studies, we reported that lead intoxicated nerve cell by inhibition of the Na$^{+}$-K$^{+}$ ATPase activity and reduction of myo-inositol in nerve cell. As the second series of experiments, in order to understand toxic mechanism of lead for nerve cell, the characteristics of myo-inositol transport system and the effect of lead on its system have been studied in the sciatic nerves of control and lead-treated rats. A lead intoxicated animal model was induced by feeding diet containing lead to Sprague-Dawley rat for two weeks. Four weeks aged Sprague-Dawley rats were divided into three group : normal control group, 10ppm-lead treated group, 100ppm-lead treated group. All rats were sacrified at the end of two weeks. The rate o myo-inositol transport by sciatic nerve isolated from lead-treated rat was significantly decreased compared with that of control rat. This deficit results from that myo-inositol transport system which is carrier mediated and sodium-potassium dependent was inhibited by the lead treatment (both 10ppm and 100ppm) due to increase of the Km value without affecting Vmax value for myo-inositol carrier. These observations suggest that the toxic mechanism of lead on nerve myo-inositol transport system might be a change of affinity without change of maximum transport velocity for carrier.
본 연구는 넙치 치어에 있어서 수용성 비타민인 myo-inositol의 사료 내 적정 요구량을 평가하고, 결핍 시 어류에 미치게 되는 생리적 영향을 조사하고자 수행 되었다. 실험에 사용된 어류는 평균무게가 1.22 g인 넙치 초기치어를 사용하였으며, 총 15개의 35 L 원형수조에 각 수조당 48 마리씩(3반복구) 무작위 배치하였다. 반 정제 사료원을 기초로한 총 5개의 실험사료는 52%의 조단백질과 18.3 MJ/kg diet의 에너지함량을 갖도록 조성되었고 myo-inositol 함량을 각각 0, 0, 400, 800, 1600 mg/kg diet으로 기초사료에 첨가하였다(M0, M0+, M400, M800, M1600). 실험사료 중 M0+ 사료는 항생제인 tetracycline hydrochloride 및 (SIGMA, USA)를 실험사료에 0.4%로 첨가함으로써, myo-inositol이 넙치의 장내 미생물들에 의하여 합성되는지를 알아보기 위해 설계되었다. 26주간의 사료공급 실험결과, 사료 내 myo-inositol 첨가에 의한 어류의 성장률 결과들에서 유의적인 차이가 나타났으며, myo-inositol 결핍사료를 섭취한 실험어류에서 성장지연과 같은 결핍증상을 보였다. Hematocrit과 Hemoglobin을 측정한 혈액분석과 간 지방함량 분석에서는 실험구 사이에서 차이가 나타나지 않았으나, 전어체 지방분석 결과에서는 단지 M0와 M400 사이에서 유의적인 차이를 나타내었다. 초기 넙치 치어의 myo-inositol 요구량은 성장률을 기초로 한 broken-line regression model (Robbins, 1986)에서 반 정제사료를 기초로 하였을 때 800 mg/kg로 결정되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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