To investigate the factors influencing the artifical transformation in Escherichia coli, E. coli C600 was transformed by pBR322 DNA with tetracycline and ampicillin resistant gene purified by CsCl-Etbr equilibrium density gradient centrifugation from E.coli HB 101. The influencing factors in the transformation such as concentration of calcium chloride, time of ice incubation, temperature and time of heat shock, time of gene expression, effects of plasmid DNA concentration and adding time were examined in these experiments. The results obtained were as follows; 1. The highest transformation frequency was observed in the treatments of 100 mM $CaCl_2$ before heat shock and the treatment of $CaCl_2$ was essential step in the process of E. coli transformation. 2. The highest transformation frequency was observed in the treatment of heat shock at $42^{\circ}C$ for 4 min. or $37^{\circ}C$ for 6 min., but the prolonged heat shock resulted a decreased transformation frequency. 3. Treatments of ice incubation at $0^{\circ}C$ for 45 min. before heat stocks or at $0^{\circ}C$ for 30min. after heat shock resulted an increased transformation frequency. 4. There was a linear relationship between DNA concentration and transformation frequency at the concentration of $8{\times}10^3$ recipient cells. The highest transformation frequency reached in carte of 7 mcg of donor DNA, but above 1 mcg of DNA concentration, transformation frequency was not remarkably increased. Addition of donor DNA just after the treatment of $CaCl_2$ was the best. 5. The best condition of gene expression at $37^{\circ}C$ were 40min. for TC-resistant gene and 100min. for AP-resistant gene. TC-resistant gene was higher in the transformation frequency and faster in the gene expression time than AP-resistant gene. In these results, the best conditions for the transformation of E. coli C 600 with pBR322 DNA were: treatment with 100mM $CaCl_2$, ice incubation at $0^{\circ}C$ for 45 min, heat shock at $42^{\circ}C$ for 4 min., 30 min. of ice incubation and incubation at $37^{\circ}C$ for 100min. for gene expression in that order.
천잠의 연중 실내사육법을 확립하고자 천잠의 의잠절식, 수시부화 및 최청법을 조사하였다. 천잠의 일시소잠을 위하여 의잠을 절식 실험한 결과, $25^{\circ}C$ 와 $5^{\circ}C$ 에서 1일간 보호한 4령기잠기 생존율이 각각 83.3% 및 96.0% 로 의잠 절식기간의 보호온도가 낮을수록 생존율이 높았다. 연중 다회사육을 위해 수시부화실험을 한 결과, 천잠알을 2개월 냉장할 경우에는 $5^{\circ}C$가 좋았으나 6개월 이상 냉장하여 사용할 경우에는 $2.5^{\circ}C$또는 $0^{\circ}C$에 보호하는 것이 실용부화비율이 높은 것으로 나타났다. 또한 일시부화에 적합한 천잠알의 보호조건을 조사한 결과, 관행적 최청방법 ($25^{\circ}C$ 보호)으로는 5-6일 걸리는 천잠알의 부화가 $15^{\circ}C$ 예비최청과 암최청 방법의 도입으로 2일간에 80% 가 부화하는 좋은 성적을 얻을 수 있었다.
본 연구는 피브린의 무게를 측정하는 방법에 의하여 간단하고 단순하게 트롬빈활성을 측정하는 방법을 확립하기 위하여 수행되었다. 이 새로운 트롬빈측정 법은 트롬빈이 기질인 피브리노겐과 반응 후 생성된 피브린의 무게를 측정한다. 피브린의 생성은 사용한 트롬빈의 효소활성, 반응온도, 반응시간 및 원심분리의 시간에 의존하였다. 피브린의 생성은 37$^{\circ}C$에서 트롬빈활성이 1.0 unit/ml 이내, 4.0mg/ml의 피브리노겐 농도 및 반응시간이 5분 이내에는 직선적으로 증가하였다. 그리고 생성된 피브린은 3,000$\times$g에서 5분간 원심분리의 경우에 안정하였다. 이 새로운 피브린 측정 법은 트롬빈을 저해하는 천연물질을 탐색하는데 유행하게 사용될 것으로 기대된다.
We studied the influence of culture conditions on the acid tolerance of Lactobacillus casei YIT 9018 in artificial gastric juice with respect to relative amount of membrane bound ATPase and their biochemical characteristics. With raising incubation temperature from 30.5$\circ$C to 40.5$\circ$C and lengthening incubation time from exponential phase to late stationary phase, the acid tolerance of L. casei YIT 9018 was increased. As acid tolerance enhanced, C$_{18:1}$ content of membrane fatty acid was reduced and C$_{19:0 cyclo}$ was enriched but the others were not changed greatly. At high ATPase activity, proton permeability was relatively low but this phenomenon did not correspond to acid tolerance. In conclusion, it was considered that changes of C$_{18:1}$ and C$_{19:0 cyclo}$ were closely related to the acid tolerance of L. casei YIT 9018.
This study investigated the production of antioxidant from Actinomyces culture supernatant. For the research of the natural marine antioxidant, several bacteria were isolated from the coast of Je-ju in Korea. An actinomycetes strains, S-1 was identified to a genus level 16S ribosomal DNA sequence and fatty acid analysis. From these results and other characteristics described in the Bergey's Manual, this strain was identificated as a Nocardiopsis dassonvillei. Strain S-1 showed high activity of 1,1-diphenyl-2-prcrylhydrazyl radical scavenging. The hydroxyl radical scavenging ability of Nocardiopsis sp. S-1 supernatant was 53%. Nutritional and cultural conditions for the production of antioxidant by this organism under shake-flask conditions have optimized. Similary initial medium pH 7.6, incubation temperature of $25^{\cicr}C$, sodium chloride concentration 2.5 and incubation time of 8 day were found to be optimal.
생마늘을 온도별로 숙성시켰을 때 일어나는 물질의 생성과 변화에 대하여 조사한 결과, 고온숙성 마늘(흑마늘)의 열수 추출물에서 5-hydroxymethyl-2-furaldehyde(HMF)가 생성됨을 확인하였으며, HMF의 생성은 $75^{\circ}C$에서는 7일 이후부터 급격히 증가하기 시작하였으며 35일차에는 13.09 mg/g dry weight까지 계속 증가하는 경향이었다. 그러나 $60^{\circ}C$에서는 HMF의 생성은 거의 억제되었으며, 28일차부터 생성되긴 하였으나 35일차에도 0.35 mg/g dry weight로 그 양은 $75^{\circ}C$ 조건에 비하여 매우 적었다. HMF의 생성은 당 화합물 중 과당(fructose)이 탈수되어 생성된다. 마늘 중 유리당의 생성량을 조사해 본 결과 $75^{\circ}C$에서 숙성된 마늘에서는 7일 차부터 과당이 39.7%/dw 정도 생성되기 시작하여 14일차에 49.6%/dw 정도 생성되었으나, 이후 과당 함량이 감소되는 것을 볼 수 있는데 이는 생성된 과당이 HMF로 변환된 것으로 추정된다. 그리고 $60^{\circ}C$에서는 21일차까지 과당의 생성량이 6.6%/dw 정도였으나 이후 28일 경에는 급속히 증가하여 35일경에는 44.6% 정도 생성되었다. 이로써 마늘에서 HMF의 생성은 마늘 중의 탄수화물이 고온($75^{\circ}C$)에서 과당으로 변환된 후 탈수반응을 거쳐 생성됨을 알 수 있었다.
Dissolution and precipitation behaviors of complex carbonitrides in austenite of a V-Nb microalloyed steel were quantitatively examined through electrical resistivity measurement and transmission electron microscopy. The electrical resistivity increased with solution treatment temperature up to $1240^{\circ}C$ and then was saturated at $225n{\Omega}m$ for a holding time of 10 min. The electrical resistivity method was also used to quantitatively measure the isothermal precipitation kinetics of the complex carbonitrides in austenite. Nb-rich precipitates were observed in austenite at the early stages of precipitation, but Nb was replaced by V up to the equilibrium amount within the precipitates with further holding time. The time-temperature-precipitation diagram showed a C-type curve; nose temperature and its incubation time were $900^{\circ}C$ and 100 s, respectively.
본 연구는 육용종계 종란의 보관조건에 따른 입란전 보관 기간이 부화율에 미치는 영향을 구명하고자 실시하였다. 산란 후 입란전 종란보관기간을 달리한 7개 처리, 즉 1일 보관 (T1)에서부터 7일 보관(T7)으로 시험을 실시하였다. 각 처리당3개의 반복을 두어 반복당40개의 종란을 공시하였다. 본 연구는 종계의 주령이 40주령인 여름과 50주령인 가을에 실시하였다. 저장온도에 따른 입란전 종란의 저장기간동안 발육후 18일째의 입란대비 감량률, 수정률, 부화율 및 발육중배자 사망률을 조사하였다. 시험결과 종계의 주령이 40주령인 여름철에는 보관기간이 길어짐에 따라 부화율이 급격하게 하락하여 3일 이상 보관시에는 1~2일 보관보다 낮아 통계적 유의차가 인정되었다(P<.05). 종계의 주령이 50주령인 가을철에는 보관기간에 따른 부화율의 차이는 인정되지 않았다(P<.05). 결론적으로 외기 환경온도가 높을 때(여름철, 25 $25^{\circ}C$이상) 3일 이상의 종란보관은 부화율에 큰 영향을 미치며, 1주일 이상 보관시 부화율 저하를 방지하기 위해서는 13~$19^{\circ}C$의 온도에 보관하는 것이 바람직함을 입증하였다.
The aim of this research was to enhance the flavor of visceral extracts from skipjack tuna. Flavor precursors and the optimum condition for the Maillard reaction were determined. The flavor extract was prepared from the tuna viscera using Endo/Exo Protease controlled in 3 factors; temperature, enzyme amounts and incubation time. The optimal condition for producing tuna viscera protein hydrolysate (TVPH) was 60℃, 0.5% enzyme (w/w) and 4-hour incubation time. TVPH were further processed to tuna viscera flavor enhancer (TVFE) with Maillard reaction. The Maillard reactions of TVFE were conducted with or without supplements such as xylose, yeast extract and methionine. The Maillard volatile components were analyzed with gas chromatography-mass spectrometry. Sixteen volatiles such as 2-methylpropanal, methylpyrazine, 2,5-dimethylpyrazine, dimethyl disulfide and 2-acetylthaizone were newly formed via Maillard reaction and the similarity of volatile contents from TVPH and TVFE were virtualized using Pearson's correlation integrated with heat-map and principal component analysis. To virtualize aromagram of TVPH and TVFE, odor activity value and odor impact spectrum (OIS) techniques were applied. According to OIS results, 3-methylbutanal, 2-methylbutanal, 1-octen-3-ol 2,5-dimethylpyrazine, methional and dimethyl trisulfide were the potent odorants contributed to the meaty, creamy, and toasted aroma in TVFE.
Lipozyme RM IM 효소적 촉매를 사용한 glycerolysis에 의한 옥수수유로부터 $1,3-DAG(Y_1),\;1,2-DAG(Y_2)$, 총 $DAG(Y_3),\;MAG (Y_4)$, 및 총 DAG + MAG 의 합성 양$(Y_5)$의 생성 최적화를 반응 표면분석을 이용하여 모니터링 하였으며 반응온도$(35-75^{\circ}C,\;X_1)$, 반응시간$(1-11시간,\;X_2)$ 및 hexane 의 혼합 양$(0-2mL,\;X_3)$을 변수로 한 중심합성계획으로 최적화 실험하였다. 1,3-DAG는 반응온도$(44.92^{\circ}C)$, 반응시간(10.24시간) 및 hexane 첨가량(1.16mL) 조건에서 20.43 area%로 최대값을 나타내었으며 1,2-DAG는 $56.32^{\circ}C$, 6.95시간 및 1.04mL 조건에서 26.78 area% 로 최대값을 예측할 수 있었다. 총 DAC는 $53.82^{\circ}C$, 8.03시간 및 1.08mL 실험 조건에서 45.09 area% 최대값을 보였다. 또한 MAG 생산 최적조건은 $64.14^{\circ}C$, 7.00시간 및 0.13mL에서 최대값 9.57 area%로 예측되었으며 총 DAG+MAG 생산 최적조건은 $54.07^{\circ}C$, 7.98시간, 1.02mL이었으며 이때 예측된 값은 53.54 area%이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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