• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제13권8호
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• pp.4037-4043
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• 2012

Despite progress in elucidating mechanisms associated with colorectal cancer and improvement of treatment methods, it remains a frequent cause of death worldwide. New and more effective therapies are therefore urgently needed. Recent studies have shown that immunogenicity of whole ovarian tumor cells and subsequent T cell response were potentiated by oxidation modification with hypochlorous acid (HOCl) in vitro and ex vivo. These results prompted us to investigate the protective antitumor response with an HOCl treated CT26 colorectal cancer cell vaccine in an in vivo mouse model. Administration of HOCl modified vaccine triggered robust antitumor immunity to autologous tumor cells in mice and prolonged survival period significantly. In addition, increased necrosis and apoptosis were found in tumor tissue from the oxidation group. Interestingly, ELISPOT assays showed that specific T cell responses were not elicited in response to the immunizing cellular antigen, in contrast to raising sera antibody titer and antibody binding activity shown by ELISA assay and flow cytometry. Further evaluation of the mechanisms underlying HOCl modified vaccine mediated humoral immunity highlighted the role of antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity. These results combined with previous studies suggest that HOCl oxidation modified whole cell vaccine has wide applicability as a cancer vaccine because it can target both T cell- and B cell-specific responses. It may thus represent a promising approach for the immunotherapy of colorectal cancer.

• 생명과학회지
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• 제22권6호
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• pp.760-771
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• 2012

해양 트리테르펜 글리코시드(marine triterpene glycosides)는 해삼(Holothurians)으로부터 분리된 천연물질로서 항 진균작용, 항암작용 및 용혈 작용 등 여러 가지 생물학적 활성들을 가지고 있다고 보고되었다. 또한 이전의 연구 결과 Thelenota anax로부터 분리한 stichoposide C (STC)는 산성 스핑고마이엘리나제와 중성 스핑고마이엘리나제의 활성화에 의한 세라마이드의 생성을 통하여 백혈병 세포주에서 세포사멸을 유도한다는 것을 알 수 있었다. 본 연구에서는 STC와 구조 유사체인 STD가 백혈병 세포에서 세포사멸을 유도하는지와 이에 대한 분자적 기전을 살펴보았다. STC와 STD는 K562 세포와 HL-60 세포에서 농도와 시간 의존적으로 세포 사멸을 일으키고 이러한 세포 사멸은 caspase-8의 활성화, 미토콘드리아 손상, caspase-9의 활성화, 그리고 caspase-3의 활성화에 의해 유도된다. 이러한 결과는 STC와 STD가 외인성 경로와 내인성 경로의 활성화를 통해 세포 사멸을 유도함을 시사한다. 그리고 STC는 산성 SMase와 중성 SMase를 활성화시키고 이 결과로 세라마이드를 생성시킨다. 산성과 중성 SMase의 특이적인 저해제를 이용하여 STC에 의한 세포 사멸이 부분적으로 억제됨을 알 수 있었다. 반면에, STD는 세라마이드 합성 효소의 활성화에 의해서 세라마이드를 생성시킨다. 세라마이드 합성 효소 저해제를 이용하여 STD에 의한 세포 사멸이 부분적으로 억제되는 것을 확인하였다. 더욱이 STC와 STD는 HL-60 세포의 이종 이식 종양 모델에서 종양의 성장을 현저하게 억제하였고 세라마이드의 생성도 증가시켰다. 이러한 결과는 STC와 STD가 aglycone에 부착된 당이 다르므로 서로 다른 경로를 통해 세포 사멸과 항암 활성을 유도한다는 것을 암시하였다. 따라서 이러한 결과는 이들의 작용은 aglycone에 부착된 당에 의해 영향을 받을 수 있고 이들은 향후 백혈병의 치료제로 사용될 수 있다는 것을 제시하였다.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제15권11호
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• pp.4519-4525
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• 2014

Oleanolic acid (OA) is a nutritional component widely distributed in various vegetables. Although it has been well recognized for decades that OA exerts certain anti-tumor activity by inducing mitochondria-dependent apoptosis, it is still unclear that what molecular signaling is responsible for this effect. In this study, we employed cancer cell lines, A549, BXPC-3, PANC-1 and U2OS to elucidate the molecular mechanisms underlying OA anti-tumor activity. We found that activation of MAPK pathways, including p-38 MAPK, JNK and ERK, was triggered by OA in both a dose and time-dependent fashion in all the tested cancer cells. Activation was accompanied by cleavage of caspases and PARP as well as cytochrome C release. SB203580 (p38 MAPK inhibitor), but not SP600125 (JNK inhibitor) and U0126 (ERK inhibitor), rescued the pro-apoptotic effect of OA on A549 and BXPC-3 cells. OA induced p38 MAPK activation promoted mitochondrial translocation of Bax and Bim, and inhibited Bcl-2 function by enhancing their phosphorylation. OA can induce reactive oxygen species (ROS)-dependent ASK1 activation, and this event was indispensable for p38 MAPK-dependent apoptosis in cancer cells. In vivo, p38 MAPK knockdown A549 tumors proved resistant to the growth-inhibitory effect of OA. Collectively, we elucidated that activation of ROS/ASK1/p38 MAPK pathways is responsible for the apoptosis stimulated by OA in cancer cells. Our finding can contribute to a better understanding of molecular mechanisms underlying the antitumor activity of nutritional components.

• 한국식품영양과학회지
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• 제38권2호
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• pp.142-145
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• 2009

산천어 70% 에탄올 추출물(MSE)이 암세포 성장억제와 Balb/c 마우스에서의 종양 성장 억제에 미치는 영향을 알아보았다. 인간 자궁암(HeLa), 간암(HepG2), 유방암(MCF-7), 위암(AGS), 폐암(A549) 세포 그리고 인간신장 정상세포 (293)에 MSE을 처리했을 때 세포생존율이 감소하였고 이들 감소율을 MTT assay로 알아보았다. MSE는 정상세포 293에서보다 인간 암세포주인 MCF-7, A549, HepG2, AGS 그리고 HeLa세포에서 현저하게 더 높은 세포독성이 나타났다. 시료 최고농도인 1 mg/mL를 인간 폐암세포(A549), 유방암세포(MCF-7), 간암세포(HepG2) 및 위암세포(AGS)에 처리한 결과 각각 9.2%, 12.7%, 14.6% 및 16.9%의 세포 생존율을 나타내었다. 더하여 복수암 세포(sarcoma-180)를 이용한 실험동물(Balb/c mice)에서의 고형암 성장 억제 효과를 알아보았으며, 각각 25 mg/kg body weight와 250 mg/kg body weight의 MSE를 투여하였을 때 종양 성장 억제율은 각각 44.7%와 55.7%였다. 따라서 우리는 MSE가 암 예방을 위해 인간에게 유익한 기능성 소재일 것이라는 것을 제안하였다.

• 생명과학회지
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• 제24권12호
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• pp.1345-1355
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• 2014

약초 추출물을 이용한 혈관신생 억제는 많은 고형종양을 치료하기 위한 효과적인 방안으로 인식되어 왔다. 현재까지 가장 효과적으로 종양을 억제하는 방법은 VEGF-유도성 혈관형성 경로를 목표로 하는 것이다. 본 연구에서는 처음으로 복분자 온수추출물의 혈관형성 억제효과를 in vitro와 ex vivo 실험을 통해서 확인하였다. 복분자 온수추출물은 VEGF-유도성 혈관신생을 억제할 뿐만 아니라 ERK와 p38의 인산화, MMP의 활성화를 억제하였다. 또한, 복분자 온수추출물은 VEGF에 의해서 유도된 VEGFR2 인산화를 억제하였다. 이 결과들은 복분자 온수추출물이 VEGFR2의 인산화를 저해함으로써 혈관신생을 억제하고 이것은 혈관신생과 관련된 질병을 치료하는데 좋은 소재가 될 수 있을 것으로 사료된다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제44권4호
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• pp.516-523
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• 2015

도라지 추출물과 그것의 분획물들(헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올 및 물)의 발암물질 N-nitrosodimethylamine(NDMA)과 유전독성에 대항하는 안전성, 항돌연변이 및 항암 효과를 연구하였다. 도라지 추출물과 그것의 분획물들의 유전독성학적 안전성 평가를 위한 복귀돌연변이 시험은 S. Typhimurium TA98과 TA100의 복귀변이 집락수를 조사하는 Ames test로 수행하였다. 도라지 추출물과 그것의 분획물들은 복귀변이 집락수를 유의적으로 변화시키지 않았고, N-methyl-N'-nitro-N-nitroso-guanidine과 4-nitroquinoline 1-oxide에 의해 유발된 돌연변이에 대해 농도 의존적으로 돌연변이 억제 효과가 있었다. 도라지 추출물과 그것의 분획물들 중에 에틸아세테이트 분획물이 가장 높은 항돌연변이 효과를 나타내었다. 도라지 70% 에탄올 추출물 및 분획물들은 인간 자궁경부암세포(HeLa), 인간 간암세포(HepG2), 인간 유방암세포(MCF-7) 및 인간 폐암세포(A549) 성장 억제 효과를 나타내었고, 인간 신장정상세포(293)는 암세포보다 억제 효과가 낮았다. 더하여 in vivo에서 도라지 70% 에탄올 추출물 및 분획물의 항암 효과를 검토하기 위하여 Balb/c 마우스에 sarcoma-180 종양세포로 고형암을 유발시키면서 도라지 추출물과 그것의 분획물들의 고형암 성장 억제 효과를 알아본 결과 농도 의존적으로 고형암 성장 억제 효과를 나타냈고 도라지 에틸아세테이트 분획물이 가장 높은 억제 효과를 보였다. 그리고 도라지 에틸아세테이트 분획물은 NDMA 생성을 억제하였다. 따라서 도라지 에틸아세테이트 분획물은 항돌연변이 및 항암 효과가 있었고 현재 실험 조건에서 안전한 새로운 항암 소재 후보라는 것을 알 수 있었다.

• 한국응용약물학회:학술대회논문집
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• 한국응용약물학회 1995년도 춘계학술대회
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• pp.62-62
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• 1995

한국산 천연자원중 한방이나 민간요법에서 항종양제로 빈번히 사용되어온 생약들 중에서 103종을 선정하여 이들 성분들을 추출하고 시험관내에서 항종양성이 우수하고 정상세포에 손상을 적게 주는 생약 6종을 선별하여 암세포주에 대한 독성능 (in vitro)과 항종양성 면역감시기구(in vivo)및 LD$_{50}$등을 측정하여 항종양제로의 신약개발을 목적으로 수행하였다. 방법: 선별된 6종의 생약유효성분을 METHANOL로 추출하여 조추출물을 얻었으며 이물질들을 순차적으로 각각의 유기용매로 추출, column chromatography법으로 분획하였으며 분획분에 대한 암세포독성능은 MTT colorimetric 검정법을 이용하여 IC$_{50}$값을 구하였다. 면역감시기구 측정방범으로는 Balb/c mouae암,수 각 10수씩에 P388암세포주를 접종한군과 접종하지 않은 실험군에 생약추출분획물 8.6mg/0.2ml씩 20일간 매일 경구 투여시키고 대조군에는 생리식염수 0.2ml씩을 매일 경구 투여시켜 NK cell의 활성 MIF Recombinant IL-2로 유도시킨 NK cell활성능, chemotaxis등을 측정하였다. 생체내 항종양능 시험은 tumor panel system에 따라 mouse leukemia cell을 사용하여 측정하였다. 각분획성분의 투여용량은 실험동물에서 독성실험결과로 LD$_{50}$량을 구해 항암효과 평가시에 Maximum dose로 하였고 최고용량을 기준으로 일정한 공비를 적응하여 3단계의 투여량을 설정하였다. (중략)

• Archives of Pharmacal Research
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• 제28권5호
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• pp.626-635
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• 2005

Liposome as a carrier of topotecan (TPT), a promising anticancer drug, has been reported in attempt to improve the stability and antitumor activity of TPT. However, the biodistr ibution pattern of TPT liposome in vivo and PEG-modified liposome containing TPT have not been studied systemically. In this paper, the in vitro stability and in vivo biodistribution behavior of several liposomes containing TPT with different lipid compositions and PEG-modification were studied. Compared with the 'fluid' liposome (S-Lip) composed of soybean phosphatidylcholine (SPC), the 'solid' liposome (H-Lip) composed of hydrogenated soybean phosphatidylcholine HSPC decreased the leaking efficiency of TPT from liposome and enhanced the stability of liposome in fetal bovine serum (FBS) or human blood plasma (HBP). The results of biodistribution studies in S$_{180}$ tumor-bearing mice showed that liposomal encapsulation increased the concentrations of total TPT and the ratio of lactone form in plasma. Compared with free TPT, S-Lip and H-Lip resulted in 5- and 19- fold increase in the area under the curve (AUC$_{0\rightarrow\propto}$), respectively. PEG- modified H-Lip (H-PEG) showed 3.7-fold increase in AUC$_{0\rightarrow\propto}$ compared with H-Lip, but there was no significant increase in t$_{1/2}$ and AUC$_{0\rightarrow\propto}$ for PEG-modified S-Lip (S-PEG) compared with S-Lip. Moreover, the liposomal encapsulation changed the biodistribution behavior, and H-Lip and H-PEG dramatically increased the accumulation of TPT in tumor, and the relative tumor uptake ratios were 3.4 and 4.3 compared with free drug, respectively. There was also a marked increase in the distribution of TPT in lung when the drug was encapsulated into H-Lip and H-PEG. Moreover, H-PEG decreased the accumulation of TPT in bore marrow compared with unmodified H-Lip. All these results indicated that the membrane fluidity of liposome has an important effect on in vitro stability and in vivo biodistribution pattern of liposomes containing TPT, and PEG-modified 'solid' liposome may be an efficient carrier of TPT.

• 생명과학회지
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• 제29권10호
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• pp.1062-1070
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• 2019

마늘(Allium sativum)의 주요 생리활성 성분들은 다양한 종류의 암에 대해 항암효과가 보고되고 있다. 본 연구에서는 활성추적분리방법(activity-guided purification)을 이용하여 마늘의 항암성분을 발굴하고자 하였다. 마늘 에탄올 추출물을 칼럼크로마토그래피로 얻은 각각의 분획물에 대해서 AGS세포의 증식 억제율을 검증하여 가장 효과가 좋은 분획물로부터 물질을 순수분리하여 구조를 동정한 결과 N-benzyl-N-methyldecan-1-amine (NBNMA)로 밝혀졌다. NBNMA의 암생장 억제효능을 검증하기 위해서 CT-26, AGS, HepG2, HCT-116, MCF7, B16F10 및 Sarcoma-180 세포에 대한 in vitro 효과와 CT-26 결장암 세포를 마우스에 이식한 다음 in vivo 효과를 조사하였다. NBNMA는 Bcl-2의 down-regulation과 Bad의 up-regulation을 유도하여 CT-26 세포의 세포사멸 촉진시켰다. 또한, NBNMA는 세포사멸의 외적 및 내적 경로에서 caspases 억제자인 caspase 3과 caspase 9의 활성을 약간 증가시켰다. CT-26세포를 이식한 쥐에 $19.13{\mu}M/kg$의 NBNMA를 21일 동안 경구투여한 결과 암종의 크기가 43% 감소하였다. NBNMA는 in vitro 및 in vivo에서 항암 효과를 나타내었는데, 이러한 결과는 마늘로부터 순수분리한 NBNMA가 대장암치료를 위한 항암제 후보물질로서 활용 가능성이 있을 것으로 기대된다.

• IMMUNE NETWORK
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• 제10권4호
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• pp.135-143
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• 2010

Background: Cordyceps militarys water extract (CME) has been reported to exert antitumor and immunomodulatory activities in vivo and in vitro. However, the therapeutic mechanism has not yet been elucidated. In this study, we examined the effects of CME on the antigen presenting function of antigen presenting cells (APCs). Methods: Dendritic cells (DCs) were cultured in the presence of CME, and then allowed to phagocytose microspheres containing ovalbumin (OVA). After washing and fixing the efficacy of OVA, peptide presentation by DCs were evaluated using CD8 and CD4 T cells. Also, we confirmed the protein levels of proinflammatory cytokines through western blot analysis. Results: CME enhanced both MHC class I and class II-restricted presentation of OVA in DCs. In addition, the expression of both MHC class I and II molecules was enhanced, but there was no changes in the phagocytic activity of exogenous OVA. Furthermore, CME induced the protein levels of iNOS, COX-2, proinflammatory cytokines, and nuclear p65 in a concentration-dependent manner, as determined by western blot. Conclusion: These results provide an understanding of the mechanism of the immuno-enhancing activity of CME on the induction of MHC-restricted antigen presentation in relation to their actions on APCs.