The ability of bovine intact red blood cells to scavenge superoxide and hydrogen peroxide by superoxide dismutase, catalase and glutathione peroxidase was investigated. Intact red cells(up to 0.4%) suspensions did not inhibit ferricytochrome c reduction by superoxide in the superoxide generating system. On the other hand, intact red cell(0.4%) suspensions almost completely inhibit ferrocytochrome c oxidation by hydrogen peroxide. The ability of intact red cells to scavenge hydrogen peroxide was mainly attributed to either membrane bound catalase or glutathione peroxidase. The scavenge of hydrogen peroxide by 0.1~0.2% intact red cells showed a trend of dependence on mainly glutathione peroxidase. However, at blood cell concentration higher than 0.3%, the process depended upon peroxidase-independent scavengers like catalase. Enhancement of ferrocytochrome c oxidation by red cells treated with aminotriazole proved that the protection against hydrogen peroxide was due to catalase, while the protection in the presence of glutathione indicated scavenging effect of glutathione peroxidase against hydrogen peroxide.
타액에 존재하는 여러 항균물질은 상호작용을 통하여 부가적이거나 상승작용을 나타내고 때로는 저해작용을 나타내는 것으로 알려져 있다. 본 연구는 in vitro 상에서 lysozyme과 peroxidase 사이의 상호작용을 효소활성 측면에서 조사하고자 시행되었다. Lysozyme과 peroxidase의 상호작용은 hen egg-white lysozyme(HEWL)과 bovine lactoperoxidase(bLP)를 혼합하는 방법으로 조사되었고, peroxidase system이 lysozyme에 미치는 영향은 potassium thiocyanate와 hydrogen peroxide를 추가적으로 첨가하는 방법으로 조사되었다. Lysozyme 활성은 Micrococcus lysodeikticus 기질용액의 혼탁도 변화를 측정하는 방법으로 측정되었고, peroxidase 활성은 NbsSCN 법으로 측정되었다. Wilcoxon signed rank 법을 이용하여 lysozyme과 peroxidase 효소활성 변화를 대조군과 비교하였다. 생리적 농도범위에서 bLP는 HEWL의 효소활성을 증가시켰으며(P < 0.05), 그 효과는 bLP의 농도증가에 따라 영향을 받았다. 하지만 HEWL는 bLP의 효소활성에 영향을 주지 못하였다. Thiocyanate는 HEWL의 효소활성에 영향을 주지 못하였고, potassium thiocyanate와 hydrogen peroxide를 추가한 peroxidase system도 HEWL 효소활성의 추가적인 상승을 유도하지는 못하였으며, hydrogen peroxide의 농도변화도 영향을 미치지 못하였다. 본 연구의 결과는 타액 항균 물질을 포함하고 있는 구강건강용품이나 구강에서 lysozyme과 peroxidase의 상호작용을 이해하는데 필요한 중요한 정보를 제공해준다.
Melanin was decolorized by lignin peroxidase from Phanerochaete chrysosporium. This decolorization reaction showed a Michaelis-Mentens type relationship between the decolorization rate and concentration of two substrates: melanin and hydrogen peroxide. Kinetic constants of the decolorization reaction were 0.1 OD$\sub$475//min ($V_{max}$) and 99.7 mg/L ($K_{m}$) for melanin and 0.08 OD$\sub$475//min ($V_{max}$) and 504.9 ${\mu}$M ($K_{m}$) for hydrogen peroxide, respectively. Depletion of hydrogen peroxide interrupted the decolorization reaction, indicating the essential requirement of hydrogen peroxide. Pulsewise feeding of hydrogen peroxide continued the decolorizing reaction catalyzed by lignin peroxidase. These results indicate that enzymatic decolorization of melanin has applications in the development of new cosmetic whitening agents.
Peroxidase as one of the organic enzyme catalyst is useful for the oxidation treatment of various aromatic compounds such as phenols. The peroxidase content of Oenanthe javanica was 24.85 unit/g-fw in leaf, 5.74 unit/g-fw in stem, and 34.69 unit/g-fw in root respectively. The crude peroxidase extracted from Oenanthe javanka can be kept under low temperature (-70$\circ$C) condition for 6 months with the maximum 1% activity reduction. The optimum conditions of removal for 100 ppm phenol was pH 6, hydrogen peroxide 3.5 mM, peroxidase activity 8 unit/ml, temperature 20$\circ$C respectively. In the wide range of concentration from 50 ppm to 750 ppm phenol reveals average 54% removal rate under the same peroxidase activity (8 unit/ml) and different amount of hydrogen peroxide proportional to phenol concentration. Especially at the concentration of 100 ppm the maximum phenol removal rate was 72%.
CiP를 이용한 유기합성은 주로 유기용매와 완충용액을 섞어서 반응을 한다. 하지만 단순히 유기용매 상에서 효소의 활성도를 측정한 것이 아니라, 과산화수소가 있을 경우에 효소의 활성도를 측정한 결과는 예상과는 다르게 순수한 완충용액에서 보다 유기용매를 포함하고 있는 것이 더 높게 나타났다. 또한 유기용매의 비율을 증가가 될수록 효소의 활성도가 더 높게 나타났으며, 특히 2-propanol이 33%가 포함이 된 경우에는 순수한 완충용액보다 효소의 활성도가 크게 증가가 되는 것을 관찰을 할 수가 있었다. 이러한 효소의 활성도가 유기용매가 포함이 된 조건에서 높게 나는 이유는 유기용매가 CiP에 의해 생성된 반응성이 높은 라디칼을 포집을 하여서, CiP의 활성 부위인 heme의 파괴를 막는 것에 크게 기여하는 것으로 판단이 되었다.
In this study, we report the one-pot synthesis of reduced graphene oxide (rGO) containing platinum nanoparticles with catalytic activity to break down hydrogen peroxide as a peroxidase-mimicking catalyst. A single reducing agent was used to reduce graphene oxide and a platinum precursor at a moderately low temperature of 70℃. The rGO was homogeneously decorated with platinum nanoparticles. The catalytic activity of Pt-rGO was investigated for the oxidation of 3,3',5,5'- tetramethylbenzidine (TMB), a peroxidase substrate, in the presence of hydrogen peroxide. The Pt-rGO coupled with glucose oxidase was also able to detect glucose at millimolar concentrations (up to 1 mM). Our results show that the Pt-rGO composite is a promising catalyst for the detection of hydrogen peroxide. This method was also applied for the detection of glucose.
바이오센서를 상업적으로 양산하고자 할 때 제작비의 경제성이 고려되어야 한다. 과산화수소를 정량하기 위한 효소전극 제작 시 필수적으로 사용되는, 서양고추냉이로부터 추출된 과산화효소는 대단히 고가이므로 탄소반죽법에 의한 전극제작의 제한 요인이 된다. 이 문제를 우회하고자 본 실험실에서는 생활주변에서 쉽게 얻을 수 있는 재료로 대체하기 위하여 아카시아 잎을 효소원으로 사용하여 과산화수소 센서를 제작하고 그것의 전기화학적 특성을 살펴보았다. 일정전압전류법으로 얻어진 10개 이상의 전기화학적 파라미터와 실험적 결과들은 효소전극이 정량적으로 그 기능을 발휘하고 있음을 보여주었다. 이런 사실들은 시판 과산화효소가 아카시아 잎으로 대체될 수 있음을 보여주는 것이다.
In horseradish peroxidase-catalyzing polymerization of phenol under the water/dioxane solvent system, the optimal concentration of hydrogen peroxide was found to be 10 mmol/I. Feeding of hydrogen peroxide at its optimal concentration improved the polymerization performance by reducing reaction time and increasing molecular weights. Monomer conversions and the molecular weights of the enzymatically produced polymer were in the ranges of 83.1~94.2$%$ and 58000~68000, respectively.
호모게나이저로 파쇄한 쑥 조직을 탄소반죽에 혼입시켜 과산화수소 감응 바이오센서를 제작하고 그것의 전기화학적 특성을 전압전류법으로 살펴보았다. Hanes-Woolf 도시의 좋은 직선성은 기질분해가 쑥 과산화효소에 의하여 촉매화되고 있음을 보여 주었으며, 작은 값의 대칭인자(${\alpha}$, 0.28)는 전극전위의 변화가 반응속도변화에 미치는 영향이 대단히 민감한 것을 말하여 주었다. 이런 실험적 사실들은 과산화수소의 분해가 쑥전극 표면에 있는 과산화효소의 촉매력에 의하여 정성적, 정량적으로 분해되고 있음을 보여 주는 것으로 서양 고추냉이로부터 추출된 고가의 시판 과산화효소를 쑥 조직으로 대치할 수 있음을 확신하게 하는 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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