The frequencies of gamma-ray-induced micronuclei (MN) in cytokinesis-blocked (CB) lymphocytes at several doses were measured in three donors of three species (human, rabbit, dog). Measurements performed after irradiation showed a dose-related increases in MN frequency in each of the donors studied. When analysed by linear-quadratic model the line of best fit was : human : $y=0.1184D+0.01867D^2+0.01$, rabbit : $y=0.0387D+0.00528D^2+0.01$ (y = number of MN/CB cells and D = irradiation dose in Gy). The relative sensitivity of rabbit lymphocytes compared with human lymphocytes was estimated by best fitting linear-quadratic model based on the radiation-induced MN data over the range from 0 Gy to 4 Gy. In the case of MN frequency with 0.2, the relative sensitivities of rabbit lymphocytes was 0.39. These data indicate that the induction of MN in rabbit CB cells following irradiation was much less sensitive to the MN induction effects of gamma-irradiation than those from human. The MN assay with dog lymphocytes was very difficult and time-consumed because the dog PHA-stimulated lymphocytes yielded cultures with very low level of CB cells formation in the condition of this experiment. Our in vitro radiobiological study confirmed that the cytogenetic response obtained in blood from rabbit can be utilized for application in environmental studies.
This study was performed to investigate the applicability of 9 chromosome aberration and sister chromatid exchange analysis for the assessment of cytotoxicity and cytogenetic effects of cadmium. Induction of chromosome aberration and sister chromatid exchange in CHO-K1 cells and human peripheral lymphocytes by 2 hour-treatment of CdCl$_{2}$ with various concentrations was observed in relation to their frequencies and types of aberration. The frequency of chromosome aberration in CHO cells treated with CdCl$+{2}$ at G$_{1}$ was increased with dose-dependent manner. When human peripheral lymphocytes were treated with cadmium at G0 and harvested at 72 hours there after, the response was dose-dependent and all the aberrations were also chromatid types. There was no significant increase in frequencies of sister chromatid exchange in both CHO cells and human lymphocytes treated with different concentrations of cadmium. It was suggested that SCE analysis was not a good assessment method for cadmium toxicity.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.18
no.1
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pp.59-65
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1983
To investigate the effects of placental serum to in vitro culture of the normal human lymphocytes the peripheral blood lymphocytes were isolated by ficoll-hypaque separation method in 20 healthy human adults. The blast transformation respone of lymphocytes to mitogens were observed by stimulation with PHA($25{\mu}g/ml$) and Con A($25{\mu}g/ml$) using RPMI 1640 media containing 20% placental serum(PS), tetal calf serum(FCS), or humans AB serum(AB). And one-way mixed lymphocyte culture test was performed between these unrelated person compounded into stimulators and responders to investigate the effect of placental serum. The following results were obtained. 1. In 20 experimental cases, these were no significant diffenence between FCS, AB, and PS in untreated control cultures. 2. In PHA-treated cultures, whereas the blast transformation rate of the FCS groups and AB groups were $40.8{\pm}4.3%$ and $44.6{\pm}4.3%$ respectively, that of PS groups were $21.7{\pm}3.4%$, Similar results were obtained in Con A-meated cultures. Therefore, placental serum inhibited the mitogenic response of lymphocytes significantly. 3. In MLC tests, stimulation index of the FCS groups and AB groups were $18.5{\pm}3.5$ and $20.1{\pm}3.3$ respectively. But placental serum inhibited MLC response of lymphocytes significantly($7.4{\pm}1.9$).
Sensitising cancer cells and at the same time desensitizing normal cells is a double task in cancer management. Agents which can combat the debilitating side effects of cancer therapeutics and simultaneously synergize with anticancer agents in specifically targeting cancer cells are needed. Selenium, a proven anticarcinogen, gains due importance in terms of its efficacy to combat the side effects of cancer therapy. This study is a comparative analysis of the chemoprotective effects of selenium compounds, methyl selenol (generated from organic selenomethionine (5mmol/L ; METase 40U/L)) and sodium selenite (inorganic form)($30{\mu}M$) in peripheral blood human lymphocytes exposed to cisplatin and mitomycin. Biochemical alterations occurring in many cells during apoptosis include loss of plasma membrane phospholipid asymmetry, DNA fragmentation, and activation of caspase-3. The present study demonstrated that the selenium metabolite and selenite are efficient in protecting lymphocytes undergoing DNA damage and exerted their activity by reducing caspase 3 expression. Interestingly organic methylselenol (MeSe) was found to offer more protective effects compared to inorganic selenite (SeL), by reducing the induction of apoptosis by the cytotoxic agents. This suggests that MeSe and to a lesser extent selenite might have potential for assessment in clinical trials and could be considered as strong candidates in pharmacogenomics or in the nutriprotective arena.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.26
no.6
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pp.1194-1199
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1997
The effect of hot taste preference on selected immune responses was investigated in human peripheral immunocompetent cells. Human lymphocytes and natural killer(NK) cells were prepared at a concentration of 2$\times$$10^{6}$ cells/ml in RPMI-1640 containing 10% fetal bovine serum. Lymphocytes proliferation was determined with the [$^{3}H$]-thymidine pulse for 18hrs after concanavalin A, phytohemagglutinin, Salmonella typhimurium mitogen, or media alone. NK cell activity was measured by cytolysis of $^51Cr$-labeled target cells K562. Serum antibodies levels such as IgM, IgG, IgA were also measured by ELISA method. There was no difference of serum IgM level among the groups, but IgG and IgA levels were greater in the group with hot taste preference than those of the group without hot taste preference. In lymphocytes of the group with hot taste preference there was a greater mitogen-induced lymphocyte proliferative responses compared to the group without hot taste preference. In addition, NK cell activity in group with hot taste preference was lower than that of the group without hot taste preference. These results suggest that the eating habit of spicy food containing hot components may affect immune status by modulating selective immunocompetent cells function.
Firstly, we compared the two staining techniques, Giemsa and Acridine orange, to determine micronuclei on samples of cultures of five healthy human peripheral blood lymphocytes after ${\gamma}-irradiation\;(^{137}Cs)$ in dose ranges of 0 to 800cGy. It was found that the Acridine orange staining method gives more reliable results than the usual Giemsa staining method in micronucleus tests. Moreover, the frequency of micronuclei in cytokinesis-blocked human B-lymphocytes was studied after in vitro irradiation in dose ranges of 0 to 50cGy. After setting and separating the B-lymphocytes, the frequency of radiation-induced micronuclei were observed as the end-point markers for the low-dose radiation dosimetry after staining with Giemsa and Acridine orange dyes. The micronuclei frequency in B-lymphocytes was significantly elevated from 10 to 30cGy ${\gamma}-irradiation$. The determination of micronuclei in B-lymphocytes after staining with Acridine orange was higher than that of Giemsa. The frequency of micronuclei in B-lymphocytes was observed to be at least two times higher than those of T-lymphocytes Giemsa in dose increasing. Therefore, the determination of low-dose radiation-induced micronuclei in B-lymphocytes after staining with Acridine orange is likely to have the greatest potential in the estimation of low dose radiation exposure.
Ji Hwa Hong;Sang Hoon Kim;Hyun Gyung Kim;Jun Ho Jang;Ryeo Gang Son;Seung Pil Pack;Young-Ho Park;Philyong Kang;Kang-Jin Jeong;Ji-Su Kim;Hanbyeul Choi;Sun-Uk Kim;Yong Woo Jung
IMMUNE NETWORK
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v.21
no.3
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pp.24.1-24.13
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2021
Due to the inconsistent fluctuation of blood supply for transfusion, much attention has been paid to the development of artificial blood using other animals. Although mini-pigs are candidate animals, contamination of mini-pig T cells in artificial blood may cause a major safety concern. Therefore, it is important to analyze the cross-reactivity of IL-7, the major survival factor for T lymphocytes, between human, mouse, and mini-pig. Thus, we compared the protein sequences of IL-7 and found that porcine IL-7 was evolutionarily different from human IL-7. We also observed that when porcine T cells were cultured with either human or mouse IL-7, these cells did not increase the survival or proliferation compared to negative controls. These results suggest that porcine T cells do not recognize human or mouse IL-7 as their survival factor.
The alkaline comet assay has been used with increasing popularity to investigate the level of DNA damage in biomonitoring studies within the last decade in Western countries. The purpose of this study was to evaluate the usefulness of the alkaline comet assay as a biomarker of oxidative DNA damage for monitoring in the Korean population, and also to evaluate the effect of nutritional status and lifestyle factors on H2O2 induced oxidative DNA damage measured by the alkaline comet assay in human lymphocytes. The study population consisted of 61 healthy Korean male volunteers, aged 20-28. Epidemiological background data including dietary habits, smoking habits and anthropometrical measurements were collected through personal interviews. After blood collection, the comet assay in peripheral lymphocytes and plasma lipids analysis was carried out and the results analyzed. Tail moment (TM) and tail length (TL) of the comet assay were use\ulcorner to measure DNA damage in the lymphocytes of the subjects. Statistically significant (p < 0.05) positive correlations were observed between DNA damage (TM or TL) and smoking habits expressed as cigarettes smoked per day and pack years (r = 0.311 and 0.382 for TM, r = 0.294 and 0.350 for TL, respectively). There were also significant positive correlations between DNA damage parameter and waist-hip ratio. Higher plasma triglyceride levels were associated with increased damage to DNA. There were no correlations between the consumption frequencies of vegetables and DNA damage to the subjects. However, consumption frequencies of fruit and fruit juice intake were inversely associated with the TM and TL. The results indicate that die comet assay is a simple, rapid and sensitive method for detecting lymphocyte DNA damage induced by cigarette smoking. Consumption of fruit or fruit juices could potentiall modify the damaged DNA in the human peripheral lymphocytes of young Korean men.
Objectives: Dendritic cell (DC)-based tumor immunotherapy needs an immunogenic tumor associated antigen (TAA) and an effective approach for its presentation to lymphocytes. In this study we explored whether transduction of DCs with lentiviruses (LVs) expressing the human interleukin-12 gene could stimulate antigen-specific cytotoxic T cells (CTLs) against human lung cancer cells in vitro. Methods: Peripheral blood monocyte-derived DCs were transduced with a lentiviral vector encoding human IL-12 gene (LV-12). The anticipated target of the human IL-12 gene was detected by RT-PCR. The concentration of IL-12 in the culture supernatant of DCs was measured by ELISA.Transduction efficiencies and CD83 phenotypes of DCs were assessed by flow cytometry. DCs were pulsed with tumor antigen of lung cancer cells (DC+Ag) and transduced with LV-12 (DC-LV-12+Ag). Stimulation of T lymphocyte proliferation by DCs and activation of cytotoxic T-lymphocytes (CTL) stimulated by LV-12 transduced DCs pulsed with tumor antigen against A549 lung cancer cells were assessed with methyl thiazolyltetrazolium (MTT). Results: A recombinant lentivirus expressing the IL-12 gene was successfully constructed. DC transduced with LV-12 produced higher levels of IL-12 and expressed higher levels of CD83 than non-transduced. The DC modified by interleukin -12 gene and pulsed with tumor antigen demonstrated good stimulation of lymphocyte proliferation, induction of antigen-specific cytotoxic T lymphocytes and antitumor effects. Conclusions: Dendritic cells transduced with a lentivirus-mediated interleukin-12 gene have an enhanced ability to kill lung cancer cells through promoting T lymphocyte proliferation and cytotoxicity.
Proceedings of the Korean Society of Toxicology Conference
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2001.10a
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pp.178-178
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2001
The interaction of extremely low frequency magnetic field (ELF-MF) on the frequency of micronuclei (MN) induced by benzo(a)pyrene (BP) in human lymphocytes was examined. A 60 Hz ELF-MF of 0.8 mT field strength was applied for 24 hours either alone or with the tumour initiator, BP. The frequency of MN induced by BP increased in a dose-dependent manner.(omitted)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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