In this work, colorants extraction process from gromwell was studied for making powder form of colorants by solving the high viscosity problem of gromwell extracts. In order to do that, sugar extracted together with colorants must be pre-extracted. For sugar decomposition, gromwell roots were pretreated with various enzyme solutions. The total sugar content of pre-extract with enzyme solution was measured. Accordingly, the effects of enzyme type and pretreatment condition on sugar decomposition were investigated to find appropriate enzyme(amylase, hemicellulase, pectinase) and enzyme activity (100~1000unit), pre-extracted time(3~24hr). Color characteristics and dye uptake of dyed fabrics were evaluated. Gromwell colorants were assessed for their potential antimicrobial activities, which possibly expand their end use as functional pigments. The efficiency of removing sugar was increased in the order of hemicellulase, pectinase, amylase, $H_2O$. Gromwell colorants powder yield was in the range of 4.4% to 9.8% depending on pretreatment enzyme. Gromwell colorants produced RP color on the silk and wool fabrics with good dye uptake. Antimicrobial activity of gromwell colorants will greatly increase its potentiality for applying as functional natural colorants in the future.
Kim, Young-Dae;Choi, Jae-Seok;Lee, Ju;Son, Yong-Soo;Hong, Yong-Ki
Journal of Life Science
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v.13
no.4
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pp.516-521
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2003
Optimal conditions of protoplast isolation from the seaweed Prophyra pseudolinearis have been described. The P. pseudolinearis is one of indigenous and dominant Porphyra species in the East Sea region. Protoplasts have been released by enzymatic treatment of 2% agarase and 2% hemicellulase in 25mM MES buffer, pH 6.0 containing 0.5 M sorbitol. The protoplasts could be fused with neutral red-stained protoplasts of P. okamurae by the addition of polyethylene glycol 8000 solution.
A method isolating Populus euramericana cv. I-214 mesophyll protoplasts was developed to facilitate application of genetic engineering techniques to this species. The suitable medium for shoot multiplication in vitro was MS basal medium with $0.1mg/{\ell}$ BAP. The effects of several factors influencing protoplast isolation could be evaluated quickly by using leaf in vitro and known volumes of maceration and washing media. The best yields of mesophyll protoplasts were obtained using leaves in vitro in 2.0% Cellulase R-10, 0.8% Macerozyme R-10, 1.2% Hemicellulase, 2.0% Driselase, 0.05% Pectolyase Y-23, and O.6M Mannitol in addition to DTT and MES buffer adjusted to pH 5.6. Over $2.4{\times}10^6$ protoplasts per gram of leaf were produced using these conditions. For protoplast purification, the most favorable sucrose concentration of floating solution was 0.6M after washing them with CPW solution. This method of screening factors affecting protoplast isolation could be applicable to other species.
The ground persimmon puree was treated with two kinds of commercial polysaccharide hydrolyzing enzymes (Viscozyme and Celluclast) in order to study their effects on the extraction yield, viscosity, color, titratable acidity and sugars. Hydrolysis with Viscozyme which has enzymatic activity of arabinase, cellulase, xylanase, hemicellulase and ${\beta}-glucanase$ significantly increased the extraction yield, L-value and reducing sugar and decreased in viscosity by treatment for 10 min at $50^{\circ}C$. The extraction yield of the juice was increased from 42.7% to 80% by Viscozyme while the Celluclast to 73.3%. On the other hand, the sensory properties of persimmon-like flavor, scarlet and orange color were greatly improved for the juice hydrolyzed with Viscozyme for 60 min.
Soft-rot bacterial pathogen, Erwinia sp., was isolated from chinese cabbage tissue showing soft-rot symptom. This bacterial strain caused soft-rot to chinese cabbage and potato, and identified as Erwinia chrysanthemi PY35(Ech PY35). Ech PY35 have extracellular CMCase, pectinase, pectate lyase, and protease activity, but not hemicellulase activity. The results of the microscopy showed that chinese cabbage tissue and potato tissue were macerated by infection of Ech PY35. In analysis of the CMCases activity in the total protein of Ech PY35, three CMCases were detected as intracellular protein while two CMCases were as extracellular protein by CMC-SDS-PAGE direct stain method.
Cha, Jae-Ho;Matsuoka, Satoshi;Chan, Helen;Yukawa, Hideaki;Inui, Masayuki;Doi, Roy H.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.17
no.11
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pp.1782-1788
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2007
Cellulosomes in Clostridium cellulovorans are assembled by the interaction between the repeated cohesin domains of a scaffolding protein (CbpA) and the dockerin domain of enzyme components. In this study, we determined the synergistic effects on cellulosic and hemicellulosic substrates by three different recombinant mini-cellulosomes containing either endoglucanase EngB or endoxylanase XynA bound to mini-CbpA with one cohesin domain (mini-CbpAl), two cohesins (mini-CbpA12), or four cohesins (mini-CbpAl234). The assembly of EngB or XynA with mini-CbpA increased the activity against carboxymethyl cellulose, acid-swollen cellulose, Avicel, xylan, and com fiber 1.1-1.8-fold compared with that for the corresponding enzyme alone. A most distinct improvement was shown with com fiber, a natural substrate containing xylan, arabinan, and cellulose. However, there was little difference in activity between the three different mini-cellulosomes when the cellulosomal enzyme concentration was held constant regardless of the copy number of cohesins in the cellulosome. A synergistic effect was observed when the enzyme concentration was increased to be proportional to the number of cohesins in the mini-cellulosome. The highest degree of synergy was observed with mini-CbpAl234 (1.8-fold) and then mini-CbpAl2 (1.3-fold), and the lowest synergy was observed with mini-CbpAl (1.2-fold) when Avicel was used as the substrate. As the copy number of cohesin was increased, there was more synergy. These results indicate that the clustering effect (physical enzyme proximity) of the enzyme within the mini-cellulosome is one of the important factors for efficient degradation of plant cell walls.
Low yield of a thermostable pectinesterase(TSPE) from citrus fruits has made its detailed study extremely tedious and difficult; therefore, maximizing TSPE extraction is desirable. It is assumed that TSPE is bound to the cell components via ionic linkage and covalent bonds. Therefore, in this study, variations in extraction time, pH, NaCl concentration and commercial enzyme preparations were used to increase the yield of TSPE from Valencia orange. The largest recovery of TSPE, obtained by heating extracted pectinesterase(PE) at $70^{\circ}C\;for\;5{\sim}10$ minute, was achieved using actate buffer(pH 4.14) with 1 M NaCl and 0.2% $Cytolase^{TM}$ 104(a mixture of cellulase, hemicellulase and pectinase; Genecor, Inc). The two aquous phase partitioning with 5.0% Triton X-114 could be used as a tool for separation of thermolabile pectinesterase(TLPE) and TSPE from crude PE. Also, water extraction and $0{\sim}0.3$ ammonium sulfate fractionation could be used for removing non-pectinesterase protein.
Soft-rot bacterial pathogen, Erwinia sp., was isolated from chinese cabbage tissue showing soft-rot symptom. This bacterial strain caused soft-rot to chinese cabbage and potato, and it was identified as Erwinia carotovora subsp. carotovora LY34 (E. c. subsp. carotovora LY34). Erwinia carotovora subsp. carotovora LY34 did not have hemicellulase but extracellular cellulase, pectinase, polygalacturonase, protease activity. The results of the microscopy showed that chinese cabbage tissue and potato tissue were macerated by infection of E. c. subsp. carotovora LY34. In analysis of the cellulases activity of the isolated cellulose-degradation enzymes from E. c. subsp. carotovora LY34 total protein, three cellulase activity bands were detected by non-denaturation gel electrophoresis method and five cellulase activity bands were detected by CMC-SDS-PAGE direct stain method.
In this study, the production of total reducing sugar from macro green-algae Enteromorpha intestinalis by enzymatic hydrolysis was investigated. As a result of enzymatic hydrolysis using 13 kind commercial enzymes, the highest yield of 8.75% was obtained from Viscozyme L, which is multi-enzyme complex such as cellulase, arabanase, beta-glucanase, hemicellulase and xylanase. As a control, only 0.33% and 0.27% yield were obtained from 1% sulfuric acid and 0.05 M citrate buffer (pH 4.8), respectively. In the case of enzyme mixture, the mixture of $Viscozyme^{(R)}$ L and $Cellic^{(R)}$ CTec2 (1:1) was presented the highest yield of 10.67%. Finally, the 14.99% yield was obtained at 36 hr under the condition of 10% biomass and 30% enzyme mixture.
Journal of Korea Technical Association of The Pulp and Paper Industry
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v.30
no.3
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pp.22-28
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1998
The blended enzymes were applied for OCC recycling system to use the selective activities of various enzymes. Cellulase and hemicellulase were very effective in terms of the strength of recycled paper The effect of the addition of amylase on the drainage improvement indicates that the starch, which was used as an adhesive of corrugated container, deteriorates the drainage property in OCC recycling system. From the result of Scheffe's analysis, the combination of cellulase and amylase (50/50, w/w) were the most effective in improving the drainage properties with increased strength.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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