Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.33
no.6
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pp.617-624
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2007
Insulin-like growth factor(IGF) is the most abundant growth factor in bone matrix. Recent studies have shown that it can sensitize apoptotic cell death of osteoblasts. Thus, this study investigated whether IGF-II aggravates irradiation-induced cell death of osteoblasts. Cultured MC3T3 osteoblasts were irradiated and IGF-II was added at the concentration of 50 ng/ml immediately after the irradiation. Cell viability was measured by MTT assay. Changes in cell death and cell cycle were analyzed by flow cytometry. The expression of proapoptotic gene bax and antiapoptotic gene bcl-2 was quantified by real time RT-PCR and Western blot. A dose of 30 Gy caused G2/M arrest and increased cell death through both necrosis and apoptosis, while irradiation from 4 to 10 Gy little affected cell cycle and death. IGF-II treatment reduced cell viability without stimulating cell proliferation and changing cell cycle. Combined treatment of IGF-II with irradiation decreased cell viability and proliferation and increased cell death along with G2/M arrest. These effects were not different from those of irradiation only. At transcriptional and protein levels, IGF-II treatment did not affect bax and bcl-2 expression, whereas irradiation increased the expression ofbax without changes in bcl-2. IGF-II in combination with irradiation showed similar findings. These results suggest that IGF-II could modulate apoptotic cell death through mechanisms other than an imbalance between bax and bcl-2 gene expression, although its effect was overridden by irradiation.
It has been known that the novel diterphenoids, hericenone and erinacine isolated from the fruiting body and cultured mycelia of Hericium erinaceus showed potent stimulating activity of nerve growth factor (NGF)-synthesis. To investigate the biological activities of extracts from fruiting body, cultured mycelium and cell-free broth of H. erinaceus, the activity experiments of antioxidation and AChE inhibition were carried out. Sephadex G-10 gel filtration followed by HPLC on a ${\mu}Bondapak$$C_{18}$ column of EtOAc extract from cultured mycelium showed a biological activity.
In order to investigate the Immunomodulatory effects of ginseng, we have studied the effects of ginseng saponin on the proliferation and cytosine gene expression of human pheripheral blood mononuclear cell (PBMC). In the PBMC proliferation assay, total saponin exhibited proliferation inhibition on the PBMC or phytohemagglutinin(PHA)-stimulated PBMC in a dose-dependent fashion. Immunomodulatory effects of ginseng were further investigated using the cytokine gene expression as the indicators. In the reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) test, interleukin (IL)-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-6, IL-13, granulocyte macrophage-colony stimulating factor, tumor necrosis factor (TNF), migration inhibitory factor and transforming growth factor genes were expressed in the PHA-stimulated PBMC 48 hrs after cell culture. Among expressed cytokines, total saponin could increase the expression of IL-1 and TNF of PBMC without stimulation of PHA. All of ginsenosides, $Rb_1$, $Rb_2$, $Rg_1$, Rc, Re, incresed TNF gene expression. Especially, Rb2 (20 g/ml) showed most prominent effect on TNF gene expression and it also slightly increased IL-1 gene expression of PBMC.
Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) is a pleiotropic hematspoietic growth factor involved in the development of myeloid cells from bone marrow, and an activator of mature myeloid cells functioning in a variety of antimicrobial and inflammatory responses. Recently, recombinant GM-CSF is increasingly under clinical study for treatment of various diseases including cancer, infectious diseases and hematopoietic diseases as well as for an immune response modulator, In this study, we constructed a recombinant human GM-CSF (rhGM-CSF) expression plasmid with a pelB leader sequence and His. Tag under T7 promoter control. The expression construct was shown to produce a recombinant protein of 20 kDa in the 8M urea preparation, indicating the rhGM-CSF may be expressed as an insoluble inclusion form. The 20 kDa recombinant protein in 8M urea was transformed into the water-so1ub1e form by dialysis against PBS buffer (phosphate buffered saline). The soluble rhGM-CSF protein was shown to stimulate colony formation and cell proliferation in vitro, indicating that the rhGM-CSF could be refolded into its native form to show colony stimulating activity.
Background: This study was designed to investigate the role of the hepatocyte growth factor (HGF) with regards to differentiation of somatic stem cells originating from the human umbilical cord blood (UCB) into hepatic lineage cells in vitro culture system. Methods: Mononuclear cells from UCB were cultured with and without HGF based on the fibroblast growth factor (FGF)-1, FGF-2, and stem cell factor. The cultured cells were confirmed by immunofluorescent staining analysis with albumin (ALB), cytokeratin-19 (CK-19), and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) MoAb. ALB and CK-18 mRNA were also evaluated by reverse transcription-polymerase chain reaction. In order to observe changes in proliferating capacity with respect to the cultured period, CFSE with affinity to proliferating cells were tagged and later underwent flow cytometry. Results: In the HGF-treated group, cultured cells had a large oval shaped appearance with adherent, but easily detachable characteristics. In the HGF-non treated group, these cells were spindle-shaped with strong adherent characteristics. Expressions of ALB and CK-19 were evident in HGF-treated group compared to non-expression of those in to HGF-non treated group. Dual immunostaining analysis of the ALB producing cells showed presence of PCNA in their nuclei, and ALB and CK-18 mRNA were detected on the 21st day of cultured cells in the HGF-treated group. Conclusion: Our findings suggest that HGF has a pivotal role in differentiating somatic stem cells of human UCB into hepatic lineage cells in vitro.
Prebiotics are defined as "Nondigestible food ingredients that beneficially affect the host by selectively stimulating the growth and activity of bacteria in the intestine" and as defined improve host health. This study was carried out to investigate the effects of bifidobacteria (Bifidobacterium lactis BB12 and Bifidobacterium longum BB536) growth enhancer (BE0623) supplement as a prebiotic. The addition of BE0623, a growth promoting material for bifidobacteria, significantly increased bifidobacteria viable cells counts in fermented milk by about 45 to 75 times compared to the non-added control group. In addition, microscopic observation showed a significant effect on proliferation of bifidobacteria in fermented milk with added BE0623. The viable cell counts in bifidobacteria also increased roughly 102-fold compared to the control group (non-added BE0623) and was higher than that of commercial growth promoters. Each fraction obtained though the purification of BE0623 influenced the increase of bifidobacteria growth. Culturing bifidobacteria with a combination of fractions of BE0623 had a synergistic effect compared to culturing bifidobacteria with each fraction individually. When any of the fractions were not added, the effect of the growth enhancer on bifidobacteria was reduced. These results indicate that all fractions contain substances that promote the growth of bifidobacteria. Therefore, BE0623 is considered to be available as a growth promoting material for bifidobacterium.
Erinacine which is produced from Hericium erinaceus mycelia is known as stimulating activity of nerve growth factor(NGF) synthesis. Thus. this work was concentrated on the maximum production of Hericium erinaceus mycelia. Media compositions were studied as the chemical conditions that affected cell growth. The modified media was ditermined from the results, including glucose 20g/L and yeast extract 10g/L.
Erinacine which is produced from Hericium erinaceus mycelia is known to have a stimulating activity of nerve growth factor(NGF) synthesis. Thus, this work was concentrated on the maximum production of Hericium erinaceus mycelia. In order to maximize cell growth, the cultivation was performed with varying the agitation rate and applying the additional medium. As the results, the mycelium concentration was 24.2g/L.
Production of human granulocyte-macrophage colony stimulating factor (hGM-CSF) by Nicotiana tabacum cell suspension culture was studied in Murashige and Skoog (MS) medium with sucrose as a carbon source, ammonium nitrate and potassium nitrate as nitrogen sources, potassium dihydrogen phosphate and sodium dihydrogen phosphate hydrate as phosphate sources, respectively. Optimum concentrations for carbon, nitrogen, phosphate was determined to enhance the production of hGM-CSF. Cell growth was better at high initial sucrose concentration (60 g/L), high initial nitrogen concentration (121.04 mM). Maximum cell density (18.28 g/L) was obtained at 60 g/L of sucrose after 14 days. Cell growth was not so good at low initial sucrose concentration 00 g/L), but the highest hGM-CSF production was obtained at the latter half of exponential phase. hGM-CSF production increased about 3 fold at initial phosphate concentration of 4.96 nM
This experiment was carried out to investigate the growth response of 3 grasses to seed coating with chitosan solution and the attempt was made to estimate adequate seed coating concentrations of chitosan solution in each grass for the growth to be stimulated. Three species used in this experiment were orchardgrass, tall fescue and reed canarygrass. Six different seed coating concentrations of chitosan solution were applied as 0%(control), 0.01%, 0.05%, 0.1% and 1.0%, respectively. the results were obtained as follows; 1. Dry weight of tiller(WT), leaf area(LA), dry weight of leaf(LW), dry weight of stem(SW), dry weight of shoot(SHW), biological yield(BY) and C/F ratio were significantly different between species. 2. Number of tillers per plant(NT), dry weight of tiller(WT), dry weight of leaf(LW), dry weight of root(RW), dry weight of shoot(SHW), biological yield(BY) and T/R ration were significantly different between seed coating concentrations of chitosan solution. 3. The adequate seed coating concentrations of chitosan solution for the growth stimulating effect were different between species. The highest values of yield components and dry weight of plant parts were obtained at 1% in orchardgrass and tall fescue, and 0.05% in reed canarygrass, respectively. 4. Growth stimulating effect of seed coating in each species were different. The highest values were obtained in leaf area(LA), dry weight of leaf(LW), dry weight of root(RW), dry weight of shoot(SHW) and dry weight of biological yield(BY) in orchardgrass. The values of dry weight of stem(SW) and C/F ration were highest in reed canarygrass. 5. An increase in number of tillers per plant(NT), dry weight of leaf(LW), dry weight of stem(SW) and dry weight of root(RW) according to seed coating was attributed to the increase in dry weight of shoot(SHW). Among the aboved increasing factors, the dry weight of leaf(LW) was a main factor for the increase in dry weight of shoot(SHW). 6. An increase in dry weight of leaf(LW), dry weight of stem(SW) and dry weight of root(RW) according to seed coating was attributed to the increase in biological yield(BY). Both the dry weight of leaf(LW) and dry weight of root(RW) were main factors for the increase in biological yield(BY).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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