This study evaluated the effect of Candida norvegensis (C. norvegensis) viable yeast culture on in vitro ruminal fermentation of oat straw. Ruminal fluid was mixed with buffer solution (1:2) and anaerobically incubated with or without yeast at $39^{\circ}C$ for 0, 4, 8, 16, and 24 h. A fully randomized design was used. There was a decrease in lactic acid (quadratic, p = 0.01), pH, (quadratic, p = 0.02), and yeasts counts (linear, p<0.01) across fermentation times. However, in vitro dry matter disappearance (IVDMD) and ammonia-N increased across fermentation times (quadratic; p<0.01 and p<0.02, respectively). Addition of yeast cells caused a decrease in pH values compared over all fermentation times (p<0.01), and lactic acid decreased at 12 h (p = 0.05). Meanwhile, yeast counts increased (p = 0.01) at 12 h. C. norvegensis increased ammonia-N at 4, 8, 12, and 24 h (p<0.01), and IVDMD of oat straw increased at 8, 12, and 24 h (p<0.01) of fermentation. Yeast cells increased acetate (p<0.01), propionate (p<0.03), and butyrate (p<0.03) at 8 h, while valeriate and isovaleriate increased at 8, 12, and 24 h (p<0.01). The yeast did not affect cellulolytic bacteria (p = 0.05), but cellulolytic fungi increased at 4 and 8 h (p<0.01), whereas production of methane decreased (p<0.01) at 8 h. It is concluded that addition of C. norvegensis to in vitro oat straw fermentation increased ruminal fermentation parameters as well as microbial growth with reduction of methane production. Additionally, yeast inoculum also improved IVDMD.
About seven hundred bacterial strains were collected from Jeot-Kal, a Korean traditional fermented fishes, in various Korean districts. One of the strains designated JKK238 has its ability to antagonize in vitro the growth of a wide variety of plant pathogenic fungi responsible for diseases of economical importance. The JKK238 strain was isolated from Oh-Jeot, a kind of fermented shrimps, of Kangkyeung in Korea, and was identified as Bacillus subtilis based on its physiological characteristics, fatty acids compositions of cellular wall, and 16S rDNA sequence analysis. We isolated simply antimicrobial lipopeptides (AMLP) by $25\%$ ammonium sulfate precipitation of 3 days-old tryptic soy broth cultures of the JKK238 strain. Further analysis of AMLP revealed that B. subtilis JKK238 produces a wide variety of antifungal lipopeptide isomers from the iturin, fengycin and surfactin families simultaneously. Above results indicate that the JKK238 strain can be added to the limited number B. subtilis strains reported to co-produce the three kinds of lipopeptide families.
Brevibacillus brevis GZDF3 is a gram-positive, plant growth-promoting rhizosphere bacterium (PGPR) isolated from the rhizosphere soil of Pinellia ternata (an important herb in traditional Chinese medicine). The GZDF3 strain produces certain active compounds, such as siderophores, which are the final metabolite products of non-ribosomal peptide synthetase (NRPS) and independent non-ribosomal peptide synthetase (NIS) activity. With the present study, we attempted to investigate the siderophore production characteristics and conditions of Bacillus sp. GZDF3. The antibacterial activity of the siderophores on pathogenic fungi was also investigated. Optimal conditions for the synthesis of siderophores were determined by single factor method, using sucrose 15 g/l, asparagine 2 g/l, 32℃, and 48 h. The optimized sucrose asparagine medium significantly increased the production of siderophores, from 27.09% to 54.99%. Moreover, the effects of different kinds of metal ions on siderophore production were explored here. We found that Fe3+ and Cu2+ significantly inhibited the synthesis of siderophores. The preliminary separation and purification of siderophores by immobilized-metal affinity chromatography (IMAC) provides strong antibacterial activity against Candida albicans. The synergistic effect of siderophores and amphotericin B was also demonstrated. Our results have shown that the GZDF3 strain could produce a large amount of siderophores with strong antagonistic activity, which is helpful in the development of new biological control agents.
To select efficient entomopathogenic fungal strains of Lecanicillium for the biocontrol of aphid, Myzus persicae, conidial suspension ($1{\times}10\;conidia/ml$) was sprayed onto a detached Chinese cabbage leaf in a petri dish with a dampened filter paper that had 20 nymphs of aphid. Lecancillium strain 4078 and 6543 were the best strains for the biocontrol of aphid at high temperature of $30^{\circ}C$ and low relative humidity (RH) of 85%, respectively. The cumulative mortality of strain 4078 at $30^{\circ}C$ after 3 days was 100% and that of strain 6543 was 90% at 85% RH after 5 days. Strain 4078 also exhibited almost 100% germination ratio of conidia and high rate of mycelial growth at the broad temperature-range of $15{\sim}25^{\circ}C$. The strain 4078 and 6543 were all identified as Lecanicillium species based on the DNA sequences (accession no.: EF026004 and EF026005, respectively) of the ITS regions of the fungi. Excellent production of aerial conidia of strain 6543 was accomplished by using steamed polished rice as the solid culture medium.
The development of microbial inoculant was conducted using a by-product of oriental herbal medicine. The constituent of the by-product, which was high in organic matter, was 11.3% of crude protein, 5.1% of crude lipid, 49.7% of NDF (neutral detergent fiber), and 33.8% of ADF (acid detergent fiber). Microorganisms isolated from the by-product of oriental herbal medicine were 35 species. Among them, 6 bacterial species, 4 fungal species, 2 actnomycetes species, and 1 yeast species were effective in the utilization of the by-products. The 13 strains screened were tested for the plant growth-promoting effect in soybean seedling. BL-333 strain was found to increase the soybean yield by about 23% as compared with control. The strain BL-333 was identified as Paenibacillus marcerans. P. marcerans BL-333 showed high anti-fungal activities against virulent fungi, especially Fusarium sp. and Collectotrichum sp. Yields of plants which were inoculated with microbial inoculant prepared with P. marcerans BL-333 and by-product of oriental herbal medicine were found to be higher than control by $3{\sim}24%$. The yield was especially promoted in lettuce, radish, chinese cabbage and cucumber plants.
Since 1990, destructive yellow rots on Ganoderma lucidum caused by a soilborne fungus have been occurred in major cultivation areas of Korea. Incidences of the disease were 61% in Chulwon and 94% in Kanghwa area where the mushroom has been cultivated for 10 years, whereas the disease has not been found yet in new cultivation areas such as Moonkyung and Hongsung. when severely infected, inner tissues of bed-logs showed severe yellow and fruiting bodies of the mushroom was not produced. Infected tissues of bed-logs were readily distinguished from those of healthy ones by a distinctive brown border line. When the disease progressed, mycelia of Ganoderma lucidum were totally destroyed, and abundant ascocarps of the pathogen were formed inside the tissues of bed-logs showing yellowish green. The fungus derived from a single ascospore strongly lysed mycelia of Ganoderma lucidum growing on bottle media, and non-volatile components secreted by the pathogen were also highly inhibitory to mycelial growth of the mushroom fungus. The pathogen was identified as Arthrographis cuboidea based on its distinctive cultural and morphological characters. The fungus produced arthroconidia and unbrached conidiophores. The width of fungal conidia was distinctively wide as compared with the length. Colonies of the fungi were pale yellow to yellowish green on agar media. As a causal pathogen of yellow rot of Ganoderma lucidum., this fungus has not been reported yet in Korea.
Chemical derivative synthesis of ricinine, an active compound of Ricinus communis which showed high mortality against brown planthopper (Nilaparvata lugens), was performed to improve its pesticidal activity and the toxicity of 12 synthetic derivatives against major insect pests and phytopathogenic fungi were examined. Carbamate derivatives of ricinine could be synthesized from the precursor of ricinine, chloronorricinine and norricinine, whereas the derivatives were not synthesized from chlororicinic acid and ricinic acid having ketone group of pyridine ring. In organophosphates, reaction with oxon type of phosphate gave better yield than thiono type. Among the organophosphate derivatives of ricinine, thiono type of derivative structure gave $96.3%{\sim}100%$ mortality of the brown planthopper and the two-spotted spider mite (Tetranychus urticae) at 500 ${\mu}g/ml$ level. On the other hand, carbamate derivatives did not show insecticidal activity. In the fungicidal activity of ricinine derivatives, the derivative having amino radical at the 2 position of ricinine gave 85 to 100% of mycelium growth inhibition effect against ten major plant pathogens at the 200 ${\mu}g/ml$ level. In particular, the control value of the derivative on the rice blast (Pyricularia grisea) and barley powdery mildew (Erysiphe graminis) at the 250 ${\mu}g/ml$ level in vivo under greenhouse conditions was 92% and 96%, respectively.
This study was carried out to determine the effect of swine liquid manure on the rice growth and yield in 2006. Field experiment was conducted under variable application rates; 100%, 120%, 150%, 180% N level of slurry based on 11 kg N 10a recommended amount of nitrogen. The experimental sites were located at Cheorwon in Gangwondo area. The results were summerized as follows; In the plot treated with swine liquid manure of 150% and 180% N levels, the plant height and tillers were higher, and the color of leaf was darker than that of 100% N level of swine liquid manure. Rice yield in the plot applied with 120% N slurry level was increased at 11%, but those of 150%, 180% N-level application plots were reduced 10, 19% compared to 100% N level, respectively. Rice quality of the 100 and 120% application plots of swine liquid manure was significantly better than those of 150 and 180% levels of application plots. Total nitrogen content in rice plant after harvesting was increased with increasing levels of swine liquid manure. The content of K in the soil was accumulated in plot treated with 150%, 180% slurry compared to control plot. The heavy metal contents in soils were not increased treated with swine liquid manure. The density of bacteria was low in the application plot of 180%N of liquid swine manure. The bacteria/fungi ratio was highest in 120% N level of liquid manure treatment.
An antagonistic strain, Burkholderia MP-1, showed antimicrobial activity against various filamentous plant pathogenic fungi, yeasts and food borne bacteria (Gram-positive and Gram-negative). The nucleotide sequence of the 16S rRNA gene (1491 pb) of strain MP-1 exhibited close similarity (99-100%) with other Burkholderia 16S rRNA genes. Isolation of the antibiotic substances from culture broth was fractionated by ethyl acetate (EtOAc) solvent and EtOAc-soluble acidic fraction. The antibiotic substances were purified through a silica gel, Sephadex LH-20, ODS column chromatography, and high performance liquid chromatography, respectively. Four active substances were identified as phenylacetic acid, hydrocinnamic acid, 4-hydroxyphenylacetic acid and 4-hydroxyphenylacetate methyl ester by gas chromatographic-mass spectrum analysis. The minimum inhibition of concentration (MIC) of each active compound inhibited the growth of the microorganisms tested at 250 to $2500{\mu}g\;ml^{-1}$. The antimicrobial activity of crude acidic fraction at 1 mg of dry weight per 6 mm paper disc was more effective than authentic standard mixture (four active substances were mixed with the same ratio as acidic fraction) over a wide range of bacterial test.
The changes of microflora and chemical characteristics during fermentation process of cotton waste for oyster mushroom cultivation were investigated with 5 l bench-scale reactors placed in an incubator at different temperatures ($40,\;50\;and\;60^{\circ}C$). Cotton waste was wetted to 70% moisture, and air flow rates to the substrate were 50, 100 and 300 cc/min. In processing of composting, the mesophilic bacterial population decreased sharply but thermophilic bacterial population increased. In case of fungi, both mesophilic and thermophilic population decreased. The daily $CO_2$ evolution showed little difference in all treatments, while $NH_3$ dropped sharply after 3 days. The desirable composting temperature and air flow based on the mycelial growth of oyster mushroom were $50^{\circ}C$ and 100 cc/min, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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