A total number of 668 apparently healthy fish were obtained from farm to study the effect of two heavy metals (Copper and Mercury) on histopathology of liver, kidney, spleen, gills and muscles also residues in muscles. The $LC_{50}$/96 hr. of Cu and Hg were estimated and fish exposed to 1/2 $LC_{50}$ for 7 days and for 1/10 $LC_{50}$ for 8 weeks from each product separately. Histopathological findings in acute and chronic mercuric chloride toxicity revealed degeneration and necrosis in the glomeruli, interstitium tissue and epithelium lining renal tubules. The tubular epithelium became necrotic at several places. Eosinophilic hyaline droplets is exist in the cytoplasm of the necrosed cells. Degenerative changes and hyperactivity in melanomachrophage center was seen in the spleen together with some necrotic areas. Necrosis and aggregation of melanomachrophage were seen in the hepatic cells, Hepatic cells showed vacuolar degeneration in the hepatic cells. Gills showed loss in the lamellae of the filaments associated with edema, inflammatory cells infiltration and haemorrhages in the arch. The sarcoplasm of the bundles of the skeletal muscle showed granular degeneration and focal inflammatory cells infiltration between the hyalinized bundles. Mercury residues obtained from these studies in the acute toxicity were 0.22 ppm/gm in the 2nd day, 0.411 ppm/gm in the $5^{th}$ day ended with 0.96 ppm/gm in the $7^{th}$ day. In chronic toxicity it was 1.1320, 1.7140, 2.3620 and 3.5640 ppm/gm respectively from the $2^{nd}$ to the $8^{th}$ week of exposure. In acute and chronic copper toxicity, there was degenerative changes in renal tubules. Melanophores aggregation in the wall of the blood vessels of the spleen and depletion of some of the melanophores in the melanomachrophage were seen together with necrosis in some areas. Congested Mvs (Micro vessels) and vacuolation of hepatocytes were observed. Some areas of hemorrhage and melanophores vacuolar degeneration in the liver were seen. There was mitosis in some areas with displesia of hepatopancreatic cells and eosinophilic granular cells aggregation. Zymogen granules disappeared and there were dyplastic hepatocytes. Congestion in the blood vessels of the gill filaments, associated with massive number of granular eosinophilic cells infiltration were seen in the base of the filaments. There were sever vacuolization and hyalinization in the skeletal muscle bundles. Detection of residues of copper sulfate revealed increase of the amount of copper measured in ppm/gm comparing to the normal control starting from 0.60 ppm/g in the $2^{nd}$ day, 0.67 ppm/g in the $5^{th}$ day and 0.67 ppm/g in the $7^{th}$ day. Result obtained in chronic copper sulfate toxicity revealed gradual increase of the amount of copper which ranged from 0.18 ppm/g at the $2^{nd}$ week to 0.21 ppm/g in the $8^{th}$ week of exposure.
Morphological changes of early larval stages of Lophius litulon (Jordan) are described based on 861 individuals collected at the intertidal zone at Haeundae, Busan, on the 20th of June, 1976. Particular emphasis is paid on the development of dorsal spinous rays, ventral fin rays, chromatophore patterns, alimentary canal, gills, branchiostegal rays and teeth. The premordial spinous fin ray of the first dorsal fin appears at the newly hatched larva of around 2.70mm in total length, the second spinous ray at around 5.82mm, and the third spinous ray at around 6.45 nm. Premordial fin rays which develope as a semicircle to cudgel form of the ventral fin appear posterior to the pectoral fin at the larva of around 2.70mm in total length. When the larvae grow up to 6.35mm in total length, the length of the ventral fin is more or less half of the total length of the body. In the early stages$(2.70\~3.75mm)$ melanophores are scattered irregularly on the tail . In the later stages(4.25mm) melanophores are aggregated to form three black spots on medio-lateral part of the tail. The newly hatched larvae have the premordial alimentary canal with mouth and intestine. With decreasing yolk mass the intestine appears more distinctly with curvature, and mouth seems to open. Gills appear at the larvae of 6.35mm in total length; branchiostegal rays appear at the larvae of 6.45mm. Teeth appear at the larvae of 6.25mm.
Peroxiredoxins (Prxs) are a ubiquitous family of antioxidant enzymes that participate in a variety of biological processes, including $H_2O_2$-mediated signal transduction, molecular chaperoning, and mitochondrial function. In this study, we isolated and characterized a Prx 2 cDNA from abalone (Haliotis discus hannai). The abalone Prx 2 cDNA encoded a 199-amino acid polypeptide that belongs to a class of typical 2-Cys Prxs that contain peroxidatic and resolving cysteines. The deduced abalone Prx 2 protein showed strong homology (64-99%) with Prx 2 proteins from other species, including mollusk, fish, amphibians, and mammals, and it was most closely related to disk abalone (H. discus discus) Prx 2. Abalone Prx 2 mRNA was ubiquitously detected in tested tissues, and its expression was comparatively high in the mantle, gills, liver, foot, and digestive duct. The expression level of abalone Prx 2 mRNA was 106.7-fold, 51.9-fold, and 437.8-fold higher, respectively, in the gills, digestive duct, and liver than in the muscles. The expression level of abalone Prx 2 mRNA in the liver peaked at 6 hr postinfection with Vibrio parahemolyticus and decreased at 12 hr postinfection. The expression level of abalone Prx 2 mRNA in hemocytes was drastically increased at 1 hr postinfection with V. parahemolyticus. These results suggest that abalone Prx 2 is conserved through evolution and that it may play a role similar to that of its mammalian counterpart.
This experiment was carried out in order to elucidate the effect of NaCl(0.85%) acclimation on congestion symptoms in central venous sinuses(CVS) of gill filaments and on the alteration of blood constituents in cultured eels for 1, 2, 3, 4, 5, 6 and 7days after handling stress. After giving a handling stress on eels, the frequency of gill congestion was about 90%. It gradually decreased to 40% on the 3rd day, then increased to 60% on the 7th day in NaCl(0.85%) acclimation. The values of haematocrit(Ht), methemoglobin(Met-Hb), glucose (GLU), calcium($Ca^{++}$), lactic dehydrogenase(LDH), glutamic pyruvic transaminase (GPT) and glutamic oxaloacetic transaminase(GOT) were lower than those of the control, whereas magnesium($Mg^{++}$) and haemoglobin(Hb) were higher than the control. However total protein(Tp) and albumin (ALB) levels similar to the control. When the fish after giving a handling stress were cultured in NaCl-free water as a control, the frequency of gill congestion and the value of blood components showed a similar pattern to that obtained from the NaCl acclimated experiments. However, in the early period(1-3day) after handling stress, NaCl acclimating slightly helped the natural tendancy of recovery. These results suggest that the frequency of gill congestion is not always reduced over the whole period of NaCl acclimation. However, the acclimation to NaCl solution may be a somewhat useful therapy for the gill congestion in stressed eels.
During a study to document more fully the parasitic ciliates of Korean freshwater fishes, we found numerous small ciliates in the gills and skin of crucian carp, Carassius carassius. Cursory examination indicated that the ciliate were very similar with Chilodonella sp. In this study, we described the morphometrics of this ciliate in detail and compared with other species of Chilodonella in the world. Numerous small ciliates were observed in the body surface, fins and gills of infected fish and excessive mucus production were seen in those fish. Sometimes ulcer was observed in the body of moribund fish. From the scrutinized observation of the parasite, it was identified as Chilodonella hexasticha. The parasite was dorsoventrally flattened body, without a notch in the posterior margin, and it measured 30-$45{\mu}m$ long and 15-$30{\mu}m$ wide. In number of kineties, the right band ciliature was 3-5 and the left band ciliature was 3-5. The right ventral ciliary band shaped arch and was longer than the left, straight band. It had a single oval macronucleus, 8-$15{\mu}m$ in diameter, a single micronucleus, 2-$4{\mu}m$ in diameter. The cytopharynx was reinforced by 10-16 conspicuous nematodesmata, which shaped like a tube and curved at its inner end. Two contractile vacuoles, one anteriorly at right and the second posteriorly at left were observed in wet mounts. This parasite reproduced by a simple division at $22{\pm}1^{\circ}C$.
Fifteen diseased rockfish (Sebastes schlegeli) were collected from 4 net-cage farms in Huksan island. Some round transparent nodules were observed on gill filaments in fish. Bacteriological and histopathological examinations on the diseased fish were performed. Any pathogenic bacteria could not be isolated from the internal tissues and histopathological alterations were not found in any of the tissues except the gills. Rock fish were infected with epitheliocystis, Microcotyle sebastes and unknown aetiology on the gills. Cysts of epitheliocystis measuring 44.1-68.9 $\mu{m}$ in diameter were mainly found in the distal portion of the gill filaments and sometimes in the middle portion. But host responses were moderate in spite of formation of the epithelial cysts. Some Microcotyle sebastes captured the secondary filaments with clamps on the opisthohaptor. Attachment of the parasites provoked epithelial proliferation and resulted in gill lamellar fusion.Cysts of unknown origins measuring 26-425 $\mu{m}$ in diameter were found in the cartilage of gill filaments. These cysts contained eosinophilic materials and proliferation of cartilage cells was confirmed around the cysts. But there was no significant pathological changes associated with the presence of the cysts except enlargement of the gill filament with the cysts.
In the present study, the effects of muddy water were compared and examined on the fish inhabiting Imha reservoir, E. erythropterus, H. labeo and Z. platypus in Cypriniformes, S. asotus in Siluriformes and S. scherzeri in Perciformes. In the gills of fish in muddy water, the secondary lamellae of fish in Cypriniformes showed more irregular gaps and more winding than those in Siluriformes and Perciformes. Also, the edema and detachment of epithelial cells was more detected in the gills in Cypriniformes, but clubbing was frequently detected in Perciformes and Siluriformes. Also, we found that muddy debris and minute particles attached to lamellae were frequently detected in Perciformes and Cypriniformes. The glomerulus in the kidney was much more constricted in Z. platypus in Cypriniformes. As a result, it is proposed that fish in Cypriniformes are more affected by muddy water. In the changes of blood components, which might be affected by muddy water, the concentrations of TP, ALB, TG, CHOL and A/G ratio, were high in Cypriniformes, and inorganic matters were abundant in Siluriformes. In addition, AST activity was relatively higher than ALT and both activities were higher in Cypriniformes than in Siluriformes. Taken together, the change in blood plasma may be caused by the reduction in voracity in the wake of muddy water, which results in tissue damage.
Isotocin (IT), a nonapeptide homolog of oxytocin in mammals, has been suggested to be involved in physiological processes including social behaviors, stress responses, and osmoregulation in teleost fish. To study its structure and function, the gene encoding the IT precursor was cloned from the genomic DNA and brain cDNA of the cinnamon clownfish, Amphiprion melanopus. The IT precursor gene consists of three exons separated by two introns, and encodes an open reading frame of 156 amino acid (aa) residues, comprising a putative signal peptide of 19 aa, a mature IT protein of 9 aa, a proteolytic processing site of 3 aa, and 125 aa of neurophysin. Tissue-specific analysis of the IT precursor transcript indicated its expression in the brain and gonads of A. melanopus. To examine its osmoregulatory effects, the salinity of the seawater (34 ppt) used for rearing A. melanopus was lowered to 15 ppt. Histological analysis of the gills indicated the apparent disappearance of an apical crypt on the surface of the gill lamella of A. melanopus, as pavement cells covered the surface upon acclimation to the lower salinity. The level of Na+/K+-ATPase activity in the gills was increased during the initial stage of acclimation, followed by a decrease to its normal level, suggesting its involvement in osmoregulation and homeostasis. The only slight increase in the level of IT precursor transcript in the A. melanopus brain upon low-salinity acclimation suggested that IT played a minor role, if any, in the process of osmoregulation.
Two distinct CD3 homologue genes, $CD3\gamma/\delta\;and\;CD\varepsilon$, were isolated from a olive flounder leukocyte cDNA library and a BAC library. $CD3\gamma/\delta$ consisted of 961 bp encoding 178 amino acid residues, and $CD3\varepsilon$ consisted of 1006 bp encoding 164 amino acid residues. When compared with other known CD3 peptide sequences, the most conserved region of the two olive flounder CD3 chain peptides are the cytoplasmic domain and the least conserved are the extracellular domain. A phylogenetic analysis based on the deduced amino acid sequence grouped the two olive flounder CD3 sequences with $CD3\varepsilon$ and $CD3\gamma/\delta$, respectively. The olive flounder CD3 cluster (consisting of $CD3\varepsilon\;and\;CD3\gamma/\delta$) spans only 10.4 kb. The $CD3\varepsilon\;and\;CD3\gamma/\delta$ genes are oppositely transcribed only 3.8 kb apart. Both olive flounder CD3 genes have five exons. The two olive flounder CD3 genes were predominantly expressed in PBLs, kidney, spleen, and gills.
The potential role of environmental factors on extractable lipofuscin accumulation rate in the blue crab was studied by examining the effect of temperature on laboratory reared blue crabs and the effect of trace metals from samples collected at impacted sites (Baltimore Harbor) and a relatively pristine site (outdoor ponds at Horn Point Laboratory, Cambridge, MD, USA). Lipofuscin levels did not significantly related with sampling sites or heavy metal concentrations in the crab tissue. Heavy metal body burden was highly variable among sampling sites and tissue types but significantly higher for both impacted areas (Curtis Creek and Inner Harbor) in comparison to the reference site. Among tissue types, gills showed the highest metal concentrations with the exception of Hg, which was highest in muscle tissue. For two groups of crabs that were held at either ambient (4 to 1$0^{\circ}C$) or heated seawater (19$^{\circ}C$) for two months, normalized-lipofuscin levels were significantly different (P-0.001). Results suggest that temperature may affect lipofuscin accumulation (=0.25ng-lipofuscin/mg-protein/temperature-degree day). Therefore, temperature should be considered for accurate age calibration of crab populations using lipofuscin.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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