A study was conducted to investigate cryoprotectant effect of commercially produced oligosaccharides (IMO: isomalto-oligosaccharides, FO: fructo-oligosaccharides and GO: galacto-oligosaccharides) on beef protein and to compare their effectiveness to sucrose or a mixture of sucrose and sorbitol on freezing. The optimal addition level of cryoprotectants was determined by measuring $Ca^{2+}$-ATPase activity of sample treated with different concentration (0 to 12%) after freeze-thaw cycle. Since the stabilization effect was not dramatically increased above 8% sugar concentrations, the 8% was determined as an usage level. During frozen storage (at -18$^{\circ}C$ for 12 week), commercially produced oligosaccharides showed lower cryoprotection ability than sucrose but higher than sucrose+sorbitol as measured by protein solubilities and $Ca^{2+}$-ATPase activities.
After overproduction of a recombinant $\beta$-galactosidase of Bifidobacterium infantis in Pichia pastoris, a synthesis of galacto-oligosaccharides (GOS) from 36% lactose using the enzyme (170.74 U/mg) was investigated. The transgalactosylation ratio reached up to 25.2% with 83.1% conversion of initial lactose and the maximum yield of GOS was 40.6%. The GOS syrup was composed of a 13.43% galacto-oligosaccharides, 5.06% lactose, and 8.76% monosaccharides. The prebiotic effect of GOS on the growth of bifidobacteria and lactobacilli strains was investigated in vitro. The maximum growth rate of Bifidobacterium breve and Lactobacillus acidophillus in GOS syrup (5%, v/v) media were 0.49 and 0.96/hr that are higher than those in 1%(w/v) galactose and 1%(w/v) lactose containing media. However, there was no significant difference between the specific growth rates of L. acidophillus in 1%(w/v) glucose and 5%(v/v) GOS syrup. Our data showed that GOS definitely promoted the growth of B. breve ATCC $15700^T$ and L. acidophilus ATCC 33323.
YANG, JI-WON;HYUN-JAE SHIN;SANG-PIL YEOM;BYUNG-DAE YUN;MIN-HONG KIM
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제4권4호
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pp.343-348
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1994
Enterobacter sp. producing -$\beta$-galactosidase with high transgalactosylation activity was isolated from dairy wastewater. The isolate had common biochemical features to E. aerogenes and E. cloacae. Enzyme production increased as the cell mass increased with optimum enzyme activity of 0.21 Unit/mg-protein (o-nitro-phenyl-$\beta$ -D-galactoside (ONPG) as substrate) until 8 hr of culture. Whole cells permeabilized by toluene were used to produce galacto-oligosaccharide. Optimum toluene concentration, temperature and pH for -$\beta$-galactosidase activity of permeabilized whole cells were 10% (v/v), $50^{\circ}C$ and 6.0, respectively. A maximum of 38% (w/w) of galacto-oligosaccharide was obtained with lactose concentration of 20% (w/w) at $40^\{\circ}C$ and pH 6.0.
Santoso, B.;Kume, S.;Nonaka, K.;Kimura, K.;Mizukoshi, H.;Gamo, Y.;Takahashi, J.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제16권4호
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pp.534-540
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2003
This study was conducted to investigate the effect of supplementation of galacto-oligosaccharides (GOS) on methane emission, nutrient digestibility, energy utilization and blood metabolites by Holstein cows fed silages. In two sequential digestion and respiratory trials, two non-lactating Holstein cows were arranged to a balanced incomplete block design. Experimental diets consisted of two silage types; orchardgrass (Dactylis glomerata L.) based silage (OS), mixed silage (orchardgrass based silage and alfalfa (Medicago sativa L.) silage) (MS), while two GOS levels were without supplementation (0) and 2% of dry matter intake supplementation (2). Four combination diets were OS-0, OS-2, MS-0 and MS-2. Significant effects of silage types and GOS supplementation levels were not observed for DM and OM intake. Whereas the digestibility of OM, NDF and ADF was significantly (p<0.05) higher in cows fed OS with and without GOS compared cows fed MS diets. As percentage of GE intake, fecal energy loss for OS diets was significantly (p<0.05) declined than for MS diets. In contrast, cows fed MS diets had lower (p<0.05) urine energy loss as a proportion of GE intake compared to OS diets. Energy loss as CH4 and heat production was numerically increased when cows fed both OS and MS with GOS supplementation. Compared to OS, CH4 emission in cows fed MS was numerically decreased by 10.8 %. Methane conversion ratio (energy loss as CH4 per unit of GE intake) for OS-0, OS-2, MS-0 and MS-2 were 7.1, 7.2, 6.8 and 7.0, respectively. Plasma of glucose and urea-N concentration were significantly (p<0.05) elevated from 1 h to 6 h after feeding, otherwise total protein in plasma was declined (p<0.01) at 6 after feeding.
In recent years, the knowledge about bifidobacteria has considerably evolved thanks to recent progress in molecular biology. The analysis of the whole genome sequences of 48 taxa of bifidobacteria offers new perspectives for their classification, especially to set up limit between two species. Indeed, several species are presenting a high homology and should be reclassified. On the other hand, some subspecies are presenting a low homology and should therefore be reclassified into different species. In addition, a better knowledge of the genome of bifidobacteria allows a better understanding of the mechanisms involved in complex carbohydrate metabolism. The genome of some species of bifidobacteria from human but also from animal origin demonstrates high presence in genes involved in the metabolism of complex oligosaccharides. Those species should be further tested to confirm their potential to metabolize complex oligosaccharides in vitro and in vivo.
Partially purified ${\alpha}$-galactosidase from Bacillus sp. LX-1 was non-covalently immobilized on a reversibly soluble-insoluble polymer, Eudragit L-100, and an immobilization efficiency of 0.93 was obtained. The optimum pH of the free and immobilized enzyme was 6.5 to 7.0 and 7.0, respectively, while there was no change in optimum temperature between the free and immobilized ${\alpha}$-galactosidase. The immobilized ${\alpha}$-galactosidase was reutilized six times without significant loss in activity. The immobilized enzyme showed good storage stability at $37^{\circ}C$, retaining about 50% of its initial activity even after 18 d at this temperature, while the free enzyme was completely inactivated. The immobilization of ${\alpha}$-galactosidase from Bacillus sp. LX-1 on Eudragit L-100 may be a promising strategy for removal of ${\alpha}$-galacto-oligosaccharides such as raffinose and stachyose from soybean meal and other legume in feed industry.
Galacto-oligosaccharides(GOS)는 프로바이오틱스 미생물의 성장을 증진시켜 인류 건강에 유익한 작용을 갖게 하는 프리바이오틱스이며 식품 산업에서 다양한 활용성을 갖는다. GOS는 보통 β-galactosidase에 의해 촉매 반응이 일어난 lactose로부터 생성된다. 한편, 세포 표면 발현은 살아있는 세포 표면의 펩타이드와 단백질을 세포의 기능성 성분에 융합시켜 발현시키는 것이다. 표층 발현 세포는 다양한 잠재적 이용가치를 갖는다. N 말단 부근에 위치하는 것으로 생각되는 Flo1p 응집 functional domain은 세포의 flocs로의 가역적인 응집을 유발하면서 α-mannan carbohydrates와 같은 세포벽 성분과 비공유결합을 한다. 한외여과한 유청을 농축, 분무건조한 유청막투과액(Whey Permeate, WP)을 이용하여 β-galactosidase 재조합 Pichia pastoris (P. pastoris) 로 표층 발현 처리 (surface engineering)하는 GOS의 합성법은 폐기물을 활용하는 새로운 효율적인 방법이라 할 수 있다.
Mwenya, B.;Zhou, X.;Santoso, B.;Sar, C.;Gamo, Y.;Kobayashi, T.;Takahashi, J.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제17권3호
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pp.349-354
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2004
The effects of probiotic-vitacogen and galacto-oligosaccharides (GOS) supplementation on methanogesis, energy and nitrogen utilization in replacement dairy cows were evaluated. A basal diet comprising orchardgrass hay, lucerne hay cube and concentrate (2:2:1, DM basis) were fed with or without supplements to four cows at $80g\;DM/kgBW^{0.75}$per day in a $4{\times}4$ Latin square arrangement. The four treatments were; 1) basal diet, 2) basal diet plus 100 g probiotic-vitacogen, 3) basal diet plus 50 g GOS, 4) basal diet plus 50 g GOS and 100 g probiotic-vitacogen. Nutrient apparent digestibility was not altered by the effect of supplementation. Nitrogen intake was significantly (p<0.001) higher for the two vitacogen-supplemented diets compared to control and GOS supplemented diets. However, vitacogen supplemented diets had numerically higher fecal and urinary nitrogen losses, thereby, having lower nitrogen retention compared to control and GOS supplemented diets. Gross energy intake was also significantly (p<0.05) higher for vitacogen-supplemented diets compared to control and GOS diets, however, due to higher losses in feces, urine, methane and heat, GOS supplemented diet had numerically higher energy retention. There was an 11% reduction in methane emission (liters/day) in GOS supplemented diet compared to control diet. However, the combination of GOS with vitacogen resulted in an increased methane emission. When expressed per unit of animal production (g/kg live-weight gain), methane production tended to be lower in vitacogensupplemented diets compared to control and GOS diets. The supplementation of replacement dairy cows with GOS reduced methane emission (liters/day), while, vitacogen supplementation reduced methane emission per unit animal production. The two feed supplements may contribute to the abatement of methane as a greenhouse gas.
본 연구는 시판 올리고당들 중 이소말토올리고당, 프락토올리고당, 및 갈락토올리고당들을 8% 첨가하여 수리미를 제조한 후 3개월간 냉동저장하여 수리미에 냉동변성방지제로의 이용가능성을 살펴보았다. 준비된 수리미로 겔을 만든 후, 이들의 물성, 수분 보유능, 미세구조, 그리고 겔의 색깔을 측정하였으며 현재 상업적으로 이용되는 냉동변성방지제들(설탕, 설탕+솔비톨 혼합물)과 겔 특성을 비교하였다. TPA test에서 시판 올리고당들 중 프락토올리고당의 경우 가장 높은 hardness와 fracturability를 보였고, 다른 올리고당들은 기존의 냉동변성방지제들과 유사한 특성을 나타내었다. 또한 수분 보유능, 미세구조 그리고 겔의 색깔에 있어서도 시판 올리고당들은 기존의 냉동변성방지제들과 유사한 결과를 나타내어 시판 올리고당들의 수리미 냉동변성방지제로의 이용가능성을 확인할 수 있었다.
S. uvarum KFCC 32021의 발효여액은 10% 농도에서 L. acidophilus KFCC 12731의 산생성 및 생육을 촉진하였으나 촉진작용은 10$0^{\circ}C$에서 10분간의 열처리에 의해 실활되었다. 또한 이 여액은 두유의 sucrose, raffinose 및 stachyose 등의 과당류를 분해하여 단당류의 함량을 증가시켰다. L. acidophilus KFCC 12731의 24시간 단독배양에서 두유의 단당류는 전량 소비되었으나 과당류는 거의 선량 잔존하였다. S. uvarum KFCC 32021의 단독배양에서는 단당류, sucrose 및 vaffinose는 완전 소비되었고, stachyose는 일부 잔존되고 manninotriose가 축적되었다. 혼합발효에서의 당소비유형은 S. uvarum의 단독배양에서와 유사하였다. 이상의 결과로 혼합배양에서 S. uvarum KFCC 32021은 두유의 과당류를 L. acidophilus KFCC 12731이 이용할 수 있는 단당류로 분해시켜 줌으로써 발효액의 산생성을 촉진시키는 것으로 보인다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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