Analysis of leaf exudates of Vicia faba using paper chromatography to identify individual amino acids and sugars qualitatively was investigated. The results revealed that the number of identified amino acids detected in the leaf exudates of the susceptible plants was more than those of resistant plants. The results also showed an increase in the number of amino acids exuded by infected leaves, but no marked difference in sugars of infected and non infected plants. Lithium chloride application led to decrease in amino acid and sugar contents. The number of amino acids and sugars was also decreased with leaf age. Botrytis fabae and the selected fungal species(Alternaria alternata, Fusarium oxysporum and Aspergillus niger) were used to show the effect of individual amino acid and sugar on their spore germination. It was observed that all amino acids stimulated the fungal spore germination except serine which inhibited its spore germination. In case of A. alternata, spore germination was stimulated by all amino acids except serine, alanine, glutamic acid, arginine and methionine which caused the inhibition. In case of F. oxysporum, aspartic and glutamic acids inhibited spore germination but the other amino acids stimulated its spore germination. Aspartic acid and phenyl alanine inhibited the spore germination of A. niger. All the identified sugars(galactose, glucose, fructose and rhamnose) stimulated spore germination of all tested fungi.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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1994.06a
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pp.50-61
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1994
Biological control of important fungal diseases such as Phytophthora blight of red pepper, gary mold rot of vegetables, and powdery mildew of many crops was attempted using an antagonistic bacterium, Bacillus sp. AC-1 in greenhouses and fields. The antagonistic bacterium isolated from the rhizosphere soils of healthy red pepper plant was very effective in the inhibition of mycelial growth of plant pathogenic fungi in vitro including Phytophthora capsici, Rhizoctonia solani, Pyricularia oryzae, Botrytis cinerea, Valsa mali, Fusarium oxysporum, Pythium ultimum, Alternari mali, Helminthosporium oryzae, and Colletotrichum gloeosporioides. Culture filtrate of antagonistic Bacillus sp. AC-1 applied to pot soils infested with Phytophthora capsici suppressed the disease occurrence better than metalaxyl application did until 37 days after treatment in greenhouse tests. Treatments of the bacterial suspension on red pepper plants also reduced the incidence of Phytophthora blight in greenhouse tests. In farmers' commercial production fields, however, the controlling efficacy of the antagonistic bacteria was variable depending on field locations. Gray mold rot of chinese chives and lettuce caused by Botrytis cinerea was also controlled effectively in field tests by the application of Bacillus sp. AC-1 with control values of 79.7% and 72.8%, respectively. Spraying of the bacterial suspension inhibited development of powdery mildew of many crops such as cucumber, tobacco, melon, and rose effectively in greenhouse and field tests. The control efficacy of the bacterial suspension was almost same as that of Fenarimol used as a chemical standard. Further experiments for developing a commercial product from the antagonistic bacteria and for elucidating antagonistic mechanism against plant pathogenic fungi are in progress.
Park, Sangchul;Shin, Yu-Kyong;Cho, MyoungLae;Kwon, Hyun Sook;Kwon, Yun Ju;Kim, Ki-Young
Journal of Apiculture
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v.34
no.2
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pp.125-129
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2019
Honey bees are important pollinators in agriculture, but are threatened by the pathogen Ascosphaera apis, which causes chalkbrood. Despite attempts to control this fungus using synthetic fungicides, none of them have been proven to be completely effective. Among 640 natural compounds that we tested, 4-hydroxyderricin (MIC=3.125, 6.25 mg/L after 24 h and 48 h growth, respectively) exhibited the strongest anti- Ascosphaera apis activity, followed by acetylshikonin (MIC=12.5 mg/L for 24 h and 48 h growth). 4-Hydroxyderricin showed selective growth inhibition of Ascosphaera apis and Rhizopus oryzae among tested fungus strains. Treatment 4-hydroxyderricin with miconazole revealed a synergistic effect (FICI=0.65±0.13 at 48 h incubation). These findings suggest that 4-hydroxyderricin, which has antifungal activity against Ascosphaera apis but few other fungal species, can effectively control infectious fungal diseases. Combined treatment of bees with 4-hydroxyderricin and miconazole could reduce cytotoxicity and improve the cost effectiveness of treatment.
Plant pathogens pose major threats on agriculture and horticulture, causing significant economic loss worldwide. Due to the continuous and excessive use of synthetic pesticides, emergence of pesticide resistant pathogens has become more frequent. Thus, there is a growing needs for environmentally-friendly and selective antimicrobial agents with a novel mode of action, which may be used in combination with conventional pesticides to delay development of pesticide resistance. In this study, we evaluated the potentials of lichen substances as novel biopesticides against eight bacterial and twelve fungal plant pathogens that have historically caused significant phytopathological problems in South Korea. Eight lichen substances of diverse chemical origins were extracted from axenic culture or dried specimen, and further purified for comparative analysis of their antimicrobial properties. Usnic acid and vulpinic acid exhibited strong antibacterial activities against Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis. In addition, usnic acid and vulpinic acid were highly effective in the growth inhibition of fungal pathogens, such as Diaporthe eres, D. actinidiae, and Sclerotinia sclerotiorum. Intriguingly, the growth of Rhizoctonia solani was specifically inhibited by lecanoric acid, indicating that lichen substances exhibit some degrees of selectivity to plant pathogens. These results suggested that lichen substance can be used as a selective biopesticide for controlling plant disease of agricultural and horticultural significance, minimizing possible emergence of pesticide resistant pathogens in fields.
Yu, Jun Myoung;Wang, Dongping;Pierson, Leland S. III;Pierson, Elizabeth A.
The Plant Pathology Journal
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v.34
no.1
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pp.44-58
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2018
Pseudomonas chlororaphis 30-84 is a biological control agent selected for its ability to suppress diseases caused by fungal pathogens. P. chlororaphis 30-84 produces three phenazines: phenazine-1-carboxylic acid (PCA), 2-hydroxy-phenazine-1-carboxylic acid (2OHPCA) and a small amount of 2-hydroxy-phenazine (2OHPHZ), and these are required for fungal pathogen inhibition and wheat rhizosphere competence. The two, 2-hydroxy derivatives are produced from PCA via the activity of a phenazine-modifying enzyme encoded by phzO. In addition to the seven biosynthetic genes responsible for the production of PCA, many other Pseudomonas strains possess one or more modifying genes, which encode enzymes that act independently or together to convert PCA into other phenazine derivatives. In order to understand the fitness effects of producing different phenazines, we constructed isogenic derivatives of P. chlororaphis 30-84 that differed only in the type of phenazines produced. Altering the type of phenazines produced by P. chlororaphis 30-84 enhanced the spectrum of fungal pathogens inhibited and altered the degree of take-all disease suppression. These strains also differed in their ability to promote extracellular DNA release, which may contribute to the observed differences in the amount of biofilm produced. All derivatives were equally important for survival over repeated plant/harvest cycles, indicating that the type of phenazines produced is less important for persistence in the wheat rhizosphere than whether or not cells produce phenazines. These findings provide a better understanding of the effects of different phenazines on functions important for biological control activity with implications for applications that rely on introduced or native phenazine producing populations.
Endophytes ascertain a symbiotic relationship with plants as promoters of growth, defense mechanism etc. This study is a first report to screen the endophytic population in Waltheria indica, a tropical medicinal plant. 5 bacterial and 3 fungal strains in leaves, 3 bacterial and 1 yeast species in stems were differentiated morphologically and identified by biochemical and molecular methods. The phylogenetic tree of the isolated endophytes was constructed using MEGA X. Silver nanoparticles were biosynthesized from a rare endophytic bacterium Cupriavidus metallidurans isolated from the leaf of W. indica. The formation of silver nanoparticles was confirmed by UV-Visible spectrophotometer that evidenced a strong absorption band at 408.5 nm of UV-Visible range with crystalline nature and average particle size of 16.4 nm by Particle size analyzer. The Fourier Transform Infra-Red spectrum displayed the presence of various functional groups that stabilized the nanoparticles. X-ray diffraction peaks were conferred to face centered cubic structure. Transmission Electron Microscope and Scanning Electron Microscope revealed the spherical-shaped, polycrystalline nature with the presence of elemental silver analyzed by Energy Dispersive of X-Ray spectrum. Selected area electron diffraction also confirmed the orientation of AgNPs at 111, 200, 220, 311 planes similar to X-ray diffraction analysis. The synthesized nanoparticles are evaluated for antimicrobial activity against 7 bacterial and 3 fungal pathogens. A good zone of inhibition was observed against pathogenic bacteria than fungal pathogens. Thus the study could hold a key aspect in drug discovery research and other pharmacological conducts of human clinical conditions.
Chattopadhyay, S.;Institute, Traning;Majil, M.D.;Pratheesshkumar;Das, K.K.;Saratchandra, B.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.5
no.2
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pp.183-188
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2002
Anti-fungal potential of 5 plant extracts viz., Eucalyptus citriodora, Allium sativum, Cassia sophera, Chromolaena odorata and Datura metel on the growth of mulberry brown leaf spot pathogen Myrothecium roridum were examined. Except fur the aqueous extract of Allium bulb, ethanolic leaf extract of all other plants more efficiently reduced the colony growth of the fungus on potato-dextrose-agar, Of which, Allium and Eucalyptus extracts were more effective. Initiation of radial growth of M. roridum on solid media was deferred maximum 6 days by ethanolic Eucalyptus extract and 4 days by aqueous Allium extract at $0.4 mg.ml^{-1}$. In the liquid media amended with Eucalyptus extract ($0.4 mg.ml^{-1}$) complete inhibition of sporulation was noticed upto 8 days, and initial inhibition of mycelial bio-mass generation was considerably diminished with time and reduction was 1.3 fold 14 days after application. While, complete inhibition of mycelial growth for 6-14 days was recorded with $\geq$0.1 mg.ml$^{-1}$ commercial eucalyptus oil. However, rejuvenation of growth appeared when fungus was re-inoculated in fresh media. Post-inoculate application of different doses Of Eucalyptus and Allium extracts significantly (p < 0.05) reduced the disease severity in pot-ted mulberry. However, persistence of the effect up to 28 days was apparent at $\geq$ 1.0 mg.ml$^{-1}$ and effectively was on par with carbendazim (1 mg.ml$^{-1}$ ). Almost equal control ability of 1.0 mg.ml$^{-1}$ Eucalyptus extracts can be achieved by ca. 10 times lowered dose of commercial eucalyptus oil. It seems, the toxic principle of E. citrodora to M. roridum is fungistatic in nature and may have essential oil based origin.
Shin, Jong-Hwan;Han, Joon-Hee;Lee, Ju Kyong;Kim, Kyoung Su
The Plant Pathology Journal
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v.30
no.4
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pp.397-406
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2014
Maize is a socioeconomically important crop in many countries. Recently, a high incidence of stalk rot disease has been reported in several maize fields in Gangwon province. In this report, we show that maize stalk rot is associated with the fungal pathogens Fusarium subglutinans and F. temperatum. Since no fungicides are available to control these pathogens on maize plants, we selected six fungicides (tebuconazole, difenoconazole, fluquinconazole, azoxystrobin, prochloraz and kresoxim-methyl) and examined their effectiveness against the two pathogens. The in vitro antifungal effects of the six fungicides on mycelial growth and colony formation were investigated. Based on the inhibition of mycelial growth, the most toxic fungicide was tebuconazole with 50% effective concentrations ($EC_{50}$) of < $0.1{\mu}g/ml$ and $EC_{90}$ values of $0.9{\mu}g/ml$ for both pathogens, while the least toxic fungicide was azoxystrobin with $EC_{50}$ values of 0.7 and $0.5{\mu}g/ml$ for F. subglutinans and F. temperatum, respectively, and $EC_{90}$ values of > $3,000{\mu}g/ml$ for both pathogens. Based on the inhibition of colony formation by the two pathogens, kresoxim-methyl was the most toxic fungicide with complete inhibition of colony formation at concentrations of 0.1 and $0.01{\mu}g/ml$ for F. subglutinans and F. temperatum, respectively, whereas azoxystrobin was the least toxic fungicide with complete inhibition of colony formation at concentrations > $3,000{\mu}g/ml$ for both pathogens.
In this study, in an attempt to search for functional cosmetic ingredients from higher fungal, we have produced exopolysaccharides (GF-l, approximately carbohydrate 75%, protein 25%) and polysaccharide (GF-2) of mycelium extract, by submerged culture of Grifolafrondosa. For applications in anti-aging cosmetic field, we investigated the diverse biological activities. Antioxidant activity and inhibition of Matrixmetalloproteinases (MMPs) were investigated enzymatic assays by measuring the superoxide scavenging activity using xanthine-xanthine oxidase system and the proteolytic activity of MMPs using EnzChek Collagenase/Gelatinase kits, respectively. GF-l polysacchairde showed inhibition of superoxide radical by 90% at a concentration of 0.2% (w/v) and inhibition of collagenase by 45% at 0.2% (w/v). GF-2 polysaccharide of mycelium extract also exhibited good antioxidant activity. However, MMPs inhibition activity was relatively lower level compared to GF-l polysaccharides. The treatment of human dermal fibroblast (HDF) with GF-l and GF-2 polysaccharides increased the proliferation of fibroblast by approximately 23-25% at a concentration of 0.5% (w/v), also showed collagen synthesis increase in HDF by about 50% at 0.5% (w/v) compared to that of untreated control. We also report the moisturizing effects of polysaccharides in cosmetic products (O/W emulation) and its own ingredient, in vitro and in vivo. The GF-1 polysaccharide showed higher moisturizing ability than sodium hyaluronate, which is the most commonly used moisturizers ingredient. These results suggest the GF-l polysaccharide, protein-bound polysaccharide, may be used as an ingredient for new moisturizing and anti-aging cosmeceuticals.
Two Schiff base ligands $L_1\;and\;L_2$ were obtained by the condensation of glycylglycine respectively with imidazole-2-carboxaldehyde and indole-3-carboxaldehyde and their complexes with Zn(II) were prepared and characterized by microanalytical, conductivity measurement, IR, UV-Vis., XRD and SEM. The molar conductance measurement indicates that the Zn(II) complexes are 1:1 electrolytes. The IR data demonstrate the tetradentate binding of $L_1$ and tridentate binding of $L_2$. The XRD data show that Zn(II) complexes with $L_1\;and\;L_2$ have the crystallite sizes of 53 and 61 nm respectively. The surface morphology of the complexes was studied using SEM. The in vitro biological screening effects of the investigated compounds were tested against the bacterial species Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Klebsiella pneumaniae, Proteus vulgaris and Pseudomonas aeruginosa and fungal species Aspergillus niger, Rhizopus stolonifer, Aspergillus flavus, Rhizoctonia bataicola and Candida albicans by the disc diffusion method. A comparative study of inhibition values of the Schiff base ligands and their complexes indicates that the complexes exhibit higher antimicrobial activity than the free ligands. Zinc ions are proven to be essential for the growth-inhibitor effect. The extent of inhibition appeared to be strongly dependent on the initial cell density and on the growth medium.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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