Yang, Hui;Lee, Junglim;Seo, Ji Hyun;Oh, Kwang Hoon;Cho, Young Ho;Yoo, Yung Choon
한국축산식품학회지
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제36권1호
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pp.14-18
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2016
Oral administration of soluble antigen can induce peripheral tolerance to the antigen. This study was conducted to evaluate whether gamma-irradiated ovalbumin (OVA) can induce oral tolerance. To investigate this, we administrated intact or irradiated OVA to mice, induced allergic response using intact OVA and alum, then compared humoral and cellular immune responses. Mice treated with gammairradiated OVA had less OVA-specific IgE compared with those who were administered intact OVA. There was no difference in levels of OVA-specific IgG+A+M, IgG1, and IgG2a. Splenocytes of mice administered irradiated OVA showed similar OVA-specific T cell proliferation and secretion of IFN-γ and IL-4. However, there was an increase in IL-2 and a decrease of IL-6 secretion in mice treated with irradiated OVA. These results indicate that gamma-irradiated OVA have similar effects to intact OVA on antigen tolerance.
Allergic diseases have increased rapidly over the past decades, affecting an estimated 20~30% of the population in developed countries. In this study, we investigated whether or not a typical costal sand dune plant Carex pumila (CPE) suppresses the activation of mast cells and IgE-mediated allergic response in vitro and in vivo. As the results, the extract of Carex pumila inhibited antigen-stimulated degranulation in RBL-2H3 cells and Bone marrow-derived mast cells (BMMCs), and IgE-mediated passive cutaneous anaphylaxis (PCA) in mice. CPE also suppressed the production of pro-inflammatory cytokines, TNF-${\alpha}$ and IL-4, in antigen-stimulated mast cells. As its mechanism of action, CPE inhibited the activation of Syk in $Fc{\varepsilon}RI$-mediated signalling pathway, and that of LAT, a downstream adaptor molecule of Syk, in a dose-dependent manner. CPE also suppressed the activation of mitogen-activated protein (MAP) kinases, p38, ERK1/2, JNK, and Akt. Altogether, CPE inhibited mast cell activation and IgE-mediated allergic response by antigen through suppressing the activation of Syk. These results suggest that CPE may be useful for the treatment of allergic diseases.
It has been reported that 50~70% of child asthma, bronchial asthma in adult, and allergic rhinitis are caused by house dust mite. The antigen extracted from house dust mite has been used for effective treatment against allergic diseases and for clinical test. This house dust mite antigen has been entirely imported from abroad. However, the composition and content of all the antigen imported vary from a brand to other brand. Thus, we need to standardize the composition and content of the antigen by developing it domestically. We proceeded pre-clinically general pharmacological test and toxicological test that are required for the eventual human use by utilizing the house dust mite cultured in Korea. In order to obtain information on general pharmacological tests such as its toxic signs in tissues or organs which are mainly affected, we examined the effect of house dust mite on the tensions of the isolated tissues and heart rates of cardiac muscle by recording with force displacement transducer of polygragh (Glass Model 7). We determined lethality of antigen extracted from house dust mite in mice and guinea pigs. We examined acute and subacute toxicity by administrating house dust mite extract of 500, 100, 20 times of the expected clinical dose. In male and female mice and guinea pigs, given a sigle intraperitoneal dose of antigen, $LD_{50}$ values were over 5.0 $\textrm{m}{\ell}$/kg, respectively. In animals administrated with house dust mite, there were no significant change of clinical symptom, body weight, food consumption, water consumption, eye examinations, urinalysis, blood biochemistry, and histopathological examinations in any animals tested. We found no toxic effect of this house dust mite. These results show that the house dust mite cultured by us could be used in the development of medicine against allergic diseases caused by the antigen of house dust mite.
This research was conducted to develop a quick and sensitive method of detecting carbamate residues using the immobilization of antibody-antigen interactions with surface plasmon resonance (SPR). We have used commercialized surface plasmon resonance equipment (Biacore 3000). The antibody used for the immunoassay was specific for glutathione-s-transferase (GST) and the antigens included several carbamate pesticides (carbofuran, carbaryl, and benfuracarb). When antigens were applied to the protein GST, the detection limit was 2 ng/mL of carbamate pesticide. The fabricated protein GST maintained its activity for over 200 measurements. Thus we determined that the SPR biosensors could detect the specific reversible binding of a reactant in solution to a binding partner immobilized on the surface of the sensor and allow real-time detection and monitoring.
먼저 OVA항원에 대해 특이적으로 증식반응을 나타내는 T세포주를 수립하였고, 수림된 세포주는 세포 표면 단백질이 CD4$^{+}$CD8$^{-}$이며 IL-2와 IFN-${\gamma}$를 분비하는 Type I에 속하는 보조 T세포(Thl)인 것을 확인하였다. 보중익기탕의 total 분획은 OVA항원에 대해 특이적으로 반응하는 Thl세포의 증식반응을 증가시키는 효과를 나타내지 않았으며 고농도에서 오히려 증식반응을 억제하였다. 그러나, 보중익기탕의 polysaccharide 분획은 전반적 인 농도에서 T세포의 증식반응을 유의하게 증가시키는 효과가 있는 것으로 나타났다. 보중익기탕의 polysaccharide 분획을 첨가하였을 때 T세포의 IL-2 분비량은 대조군보다 약간 적었지만, IFN-${\gamma}$ 분비량은 대조군보다 증가하였다. 그리고, 분비된 IL-2와 결합하는 T세포의 IL-3 수용체 발현양도 증가하는 것으로 나타났다. 또한, 항원제시세포의 MHC class II의 발현양도 증가시켰다. 이상의 결과로 보중익기탕의 polysaccharide분획은 T세포의 IL-2수용체 발현양을 증가시키고, 항원제시세포의 MHC classs II의 발현양을 증가시켜서 T세포의 증식반응을 증가시키는것으로 생각된다 그리고 보중익기탕이 생체 면역반응에 미치는 보다 정확한 효과를 평가하기 위해서는 직접 살아있는 실험동물에 투여하는 in vivo 실험이 필요하다.
Among the inhalant and foods which caused allergy, which is increasing nowaday, this research has a purpose of studying allergy-causing materials (allergen) which most frequently cause allergy. In order to conduct this research, we selected 100 hundred patients (M : F = 65 : 35) from in Kwangju Christian Hospital, who were tested through allergy multiple antigen simultaneous test (MAST) immunoblot assay (RIDA$^{(R)}$ X-Screen; r-Biopharm Co., Darmstadt, Germany). According to the test, the total IgE positive rate (above Class 2) from the inhalant is 58.3%, and that from food is 35%, respectively. This research showed that the first most allergen was the tick (Derm. farinae/Derm. pteronyssinus), the second most was housedust, and the third was the hair of pets such as cats and dogs; 65%, 35%, 26.3% in inhalant panel, and 52.5%, 40%, 50% in food panel, respectively. Thease allergens newly added to inhalant and food panels were not contributable to the detection of specifical allergen. We needs further improvement to be used as primary screening or quantitative test for allergy.
Kang, Hyunkyung;Roh, Hang Sik;Song, Hyemin;Lee, Kwangmoon;Chung, Seung-Tae;Ban, Sang-ja;Mo, In Pil;An, Beum-Soo;Ahn, Chi-Young
Toxicological Research
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제32권4호
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pp.269-274
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2016
The potency of influenza vaccine is determined based on its hemagglutinin (HA) content. In general, single radial immunodiffusion (SRID) assay has been utilized as the standard method to measure HA content. However, preparation of reagents for SRID such as antigen and antibody takes approximately 2~3 months, which causes delays in the development of influenza vaccine. Therefore, quantification of HA content by other alternative methods is required. In this study, we measured HA contents of H1N1 antigen and H1N1 influenza vaccine by reverse phase-high performance liquid chromatography (RP-HPLC) methods. The presence of HA1 and HA2 was investigated by silver staining and Western blot assay. In addition, accuracy and repeatability of HA measurement by RP-HPLC were evaluated. Comparison of HA concentration by SRID and RP-HPLC revealed a precise correlation between the two methods. Our results suggest that RP-HPLC assay can replace SRID in the event of a pandemic flu outbreak for rapid vaccine development.
Kim, Namsoo;Oh, Sun Mi;Kim, Chong-Tai;Cho, Yong Jin
산업식품공학
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제14권1호
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pp.21-26
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2010
C-Reactive protein (CRP), which is an 118 kDa pentameric protein, was secreted by the liver is an important biomarker for coronary disease, hypertension and inflammation. In this study, a method for CRP detection exploiting quantum dot (Qdot)-antibody conjugate was developed according to an indirect-competitive immunosensing protocol. For this purpose, a streptavidin-bound $Qdot_{605}$ was linked with a separately prepared biotinylated monoclonal antirat CRP antibody to produce a Qdot-antibody conjugate. The immunosensing was performed at 0.1 and 20 nM of the coating antigen and conjugate, respectively. The current method was found very sensitive in CRP detection, judging from the concentration-dependent fluorescence emission.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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