Some biological activities such as an electron donating capacity, the contents of total polyphenol compounds and flavonoids, fibrinolytic activity and $\alpha$-glucosidase inhibitory activity have been detected in hot water extracts of Ligularia fischeri and Angelica gigas Nakai. To increase the usefulness of the functional ingredients for prevention and improvement of some metabolic disorders, ethanol-treated hot water extracts of Angelica gigas Nakai were prepared. A hot water extract of Ligularia fischeri has 92% of electron donating capacity, 39.4 mg/g of total polyphenol compounds, 24.8 mg/g of flavonoids and 29.8% of $\alpha$-glucosidase inhibitory activity, but no fibrinolytic activity. A hot water extract of Angelica gigas Nakai has 94.7% of electron donating capacity, 5.8 mg/g of total polyphenol compounds, 2.6 mg/g of flavonoids, 0.48 plasmin units of fibrinolytic activity and no $\alpha$-glucosidase inhibitory activity. However, with partial purification using cold ethanol treatment, the $\alpha$-glucosidase inhibitory activity of Angelica gigas Nakai was increased to 70.5%. Thus, we expected a more useful effect with the use of the addition of a cold ethanol-treated Angelica gigas Nakai extract. The L, b values of cold buckwheat noodles using a mixture of 0$\sim$3% of Ligularia fischeri powder and 0.5% of an ethanol-treated hot water extract of Angelica gigas Nakai were decreased with the addition of an increasing amount of Ligularia fischeri powder. Among the mechanical qualities, only adhesiveness was significantly higher in 3% Ligularia fischeri noodles. From sensory evaluation data, it was determined that these two functional ingredients did not ruin the color, texture, and overall acceptance of the cold buckwheat noodles. A higher amount of the extracts improved the quality of the product with little added cost.
Clove has been frequently used as anti-diabetic, anti-microbial, anti-inflammatory, anesthetic drug and remedies for stomachache by coldness. In this study, the antioxidant activity of extract from Clove was studied in vitro methods by measuring the antioxidant activity by TEAC, measuring the scavenging effects on reactive oxygen species (ROS) [superoxide anion, hydroxyl radical] and on reactive nitrogen species (RNS) [nitric oxide and peroxynitrite] as well as measuring the inhibitory effect on $Cu^{2+}$-induced human LDL oxidation. Anti-platelet aggregation and anti-thrombotic effects of Clove extracts were studied ex vivo methods by mesuring the inhibitory effect on thrombin induced platelet aggregation and the fibrinolytic activity. The Clove extracts were found to have a potent scavenging activity, as well as an inhibitory effect on LDL oxidation in vitro. Moreover Clove extracts were exhibited remarkable inhibitory effect on platelet aggregation and fibrinolytic activity. In conclusion, the Clove extracts have anti-oxidative and anti-atherosclerotic effects in vitro and ex vivo system, which can be used for developing pharmaceutical drug against oxidative stress and atherosclerosis.
감마선 조사를 이용한 장류제품의 미생물 살균 시, 감마선 조사가 장류제품의 효소활성에 미치는 영향을 살펴보기 위한여 된장, 고추장, 간장, 청국장, 메주에 5, 10, 20 kGy의 선량으로 감마선을 조사한 다음 amylase, protease, lipase 그리고 혈전용해효소 활성을 비교하였다. 가수분해효소의 활성은 메주, 청국장, 된장에서 대체로 높았고 간장과 고추장은 상대적으로 낮았다. Amylase, protease, lipase의 효소활성은 10 kGy까지의 감마선 조사에 의하여 영향을 받지 않았으며, 20 kGy의 감마선 조사구에서는 10% 내외의 효소활성 감소가 있었으나 청국장의 protease 활성감소(15%)를 제외하고는 통계적인 유의차가 없었다(p<0.05). 혈전용해효소 활성은 20 kGy까지의 감마선 조사에 의해서 효소활성 변화가 없었다.
본 연구에서는 된장으로부터 혈전용해효소(subtilisin CP-1) 생산 균주를 단리하여 16S rRNA 유전자 분석과 생화학적 분석을 통하여 동정하여 Bacillus sp. CP-1로 명명하였으며, TSB와 LB 배지를 이용하여 혈전용해효소의 생산에 적합한 Bacillus sp. CP-1 배양 배지에 대하여 검토하였다. 그 결과 균주 생육과 균주 유래 전체 단백질의 생산에는 LB 배지가 더욱더 효과적임에 반해 높은 혈전용해효소 활성은 TSB 배지에서 Bacillus sp. CP-1 배양하였을 때 얻어졌다. Bacillus sp. CP-1의 배양 상층액의 fibrin zymography에 의한 분석에서 gel상의 상단 부분에 하나의 명확한 혈전용해 활성을 확인하였으며, 분자량은 약 29-30 kDa으로 추정되며, pH 9.0와 $45^{\circ}C$에서 최적의 효소활성을 보였다. 그리고, 기질 특이성 검토에 있어서는 chymotrypsin에 대한 특이적 기질인 Meo-Suc-Arg-Pro-Tyr-pNA (S-2586)에 대하여 가장 높은 기질 특이성을 나타내었다. Subtilisin CP-1단백질의 N-말단 염기 서열을 분석한 결과 처음 8개가 AQSVPYGI로 분석되었으며 이 배열은 subtilisin NAT및 E와 동일하였다.
항혈전 효능을 탐색하기 위하여 한약재의 호장근 추출물로 혈전 용해능 활성과 혈액 응고시간 지연효과 즉 PT(prothrombin time), APTT(activated partial thromboplastin time)와 혈소판 응집억제 활성 등에 대해 항혈전 효능을 평가하였다. 혈전용해도를 측정하는 fibrin plate가 용해되어 형성된 투명환의 넓이를 측정하는 실험을 진행한 결과 혈전 용해도가 농도의존적으로 탁월한 효능을 나타내었다. 혈액응고 cascade에 미치는 영향을 알아보기 위해 혈액 응고시간 지연 및 단축 효과를 확인하고자 APTT와 PT에 미치는 영향을 조사한 결과 PT의 경우 대조군보다 단축됨을 보였다. APTT의 경우 농도의존적으로 우수한 지연효과를 보였다. 혈소판의 응집에 따라 형성되는 두 전극 사이에 형성된 전기적 저항의 변화로 나타나는 실험을 시행한 결과 호장근의 ADP로 유도한 결과에서 뛰어난 응집억제 활성을 보였다. 따라서 호장근을 향후에 혈전 질환의 치료제 개발에 효과적으로 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
Commercialized production of onion vinegar, which has biological activities formed through alcohol and acetic acid fermentation, requires standardization. The objective of this study was to determine optimal conditions of sugar contents ($11{\sim}15^{\circ}Brix$) and agitation rate (100~300 rpm) of fermenter in the alcohol-acetic fermentation for producing onion vinegar. The alcohol and total acidity contents increased, whereas contents of total sugars decreased during alcohol fermentation. Contents of alcohol of 13 and $15^{\circ}Brix$ reactants were about 8% in 36 hr and total acidities of all samples were below 0.2% in 60 hr. During acetic fermentation, total acidity increased with highest value at 9 days (3.2% in 100 rpm), 10 days (4.1% in 200 rpm) and 8 days (4.3% in 300 rpm), respectively. From these results, sugar contents ($13^{\circ}Brix$) were measured for alcohol fermentation and agitation rate (300 rpm) for fast fermentation method of vinegar. The contents of total phenols, flavonoids and quercetin in onion vinegar were 33.3 mg/100 g, 3.0 mg/100 g and 2.0 mg/100 g, respectively. Onion vinegar showed an antimicrobial activity against Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Salmonella typhimurium, Escherichia coli and Enterobacter aerogenes. Antioxidant effect of onion vinegar was 26.23% in DPPH radical inhibition and 58.58% in superoxide dismutase like activity, respectively. Fibrinolytic activity was 1.51 plasmin unit/mL in onion vinegar. In conclusion, onion vinegar processed by alcohol and acetic fermentation had nutritional values and potential biological activities.
인간 암세포의 생육에 미치는 혈전용해효소(BK-1)의 영향을 조사하기 위해, 세포증식, 생존력, 형태변화 및 apoptosis 유도 등을 포함한 여러 가지 생화학적 실험을 하였다. 그 결과, AGS 인간 위장 암세포 및 T24 인간 방광 암세포상에의 BK-17 처리는 그 암세포들의 생존력 및 생율을 농도의존적 방법으로 감소시켰다. 현미경 관찰은, BK-17 처리에 의한 항 생육 효과는 막 수축, 세포의 rounding up, apoptotic bodies와 같은 형태학적 변화를 나타내었다. 특히, RT-PCR과 Western blotting data는, BK-17 처리가 항 apoptosis Bcl-2 군들 특히 Bcl-2, and $Bcl-X_L$의 down-regulation 그리고 AGS 세포에서, apoptosis 촉진 매개체 Bax와 Bad의 up-regulation를 유도했다는 것을 보여주었다. BK-17에 의해 유도된 AGS 세포의 apoptosis는 caspase-3, caspase-8 그리고 caspase-9의 단백질가수분해 활성과 관련이 있었다. 이상의 결과를 볼 때, BK-17은 apoptotic cell death의 유도와 밀접한 관련이 있다는 것을 보여주고 있다.
뽕나무버섯 균사체의 생산 및 혈전분해활성을 증대시키고자 배양기질에 7종의 식물체추출물을 첨가하여 증식시킨 결과 가시오가피 뿌리, 유근피, 홍삼박추출물의 첨가가 균사체 중식에 양호하였으나 인삼추출물 첨가에 의해서 유의적으로 증식이 억제되었다. 또한 가시오가피 가지, 유근피, 홍삼박추출물 첨가에 의하여 단백질분해 활성이 무첨가구보다 $36.8{\sim}46.1%$ 정도 증가되어졌으며 옻피, 가시오가피 가지, 홍삼박 첨가구의 혈전분해 활성은 각각 0.70, 0.71, 0 73 plasmin $unit/200\;{\mu}g$ protein으로 무첨가구의 0.44 plasmin $unit/200\;{\mu}g$ protein에 비하여 $59{\sim}65%$ 증가시킬 수 있었다. 뽕나무버섯 균사체의 조효소는 fibrinogen의 $A{\alpha}-chain$에 대해 높은 분해특성을 가지고 있었을 뿐만 아니라 무첨가구가 fibrinogen의 모든 단위체를 완전 분해시 까지 3시간이 소요되었던 반면 홍삼박 첨가구는 2시간 후 모든 단위체가 분해되어 대조구보다 높은 활성을 나타내었다. 현미경을 통한 관찰에서 역시 홍삼박 추출물첨가구가 무첨가구보다 높은 분해 활성을 보였다.
Jo, Kwang-Wook;Kim, Seong-Rim;You, Seung-Hoon;Kim, Sang-Don;Park, Ik-Seong;Baik, Min-Woo
Journal of Korean Neurosurgical Society
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제37권4호
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pp.287-292
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2005
Objective: Recent clinical studies have demonstrated that intracisternal administration of recombinant tissue plasminogen activator(rt-PA) can facilitate the normal clearing of blood from the subarachnoid space. Urokinase, a first generation fibrinolytic agent, has been used to liquify such clots with some success. Therefore, recombinant tissue plasminogen activator, a second generation fibrinolytic drug that may be safer and more effective, is studied to evaluate its dosage to lyse clots in vitro and reactivity in the brain parenchyme. Methods: Intracerebral hematomas were created by stereotactically injecting 2ml of clotted autogenous blood into the brain parenchyme of total 28 anesthetized adult cats (weighting 3.8 to 4.1 kg). The control animals (group A) received 1 ml of normal saline injected into the clots and the experimental animals received each 0.1 mg of rt-PA (group B), 0.5mg of rt-PA (group C) and 1 mg of rt-PA (group D) at 6 hours after the clot injection. Results: 1. The amount of remained clots after lysing the hematomas were as follows: $1.80{\pm}0.17ml$ in group A, $1.65{\pm}0.23ml$ in group B, $0.61{\pm}0.37ml$ in group C and $0.52{\pm}0.34$ in group D. The result indicated that hematomas in rt-PA treated groups (C & D) were lysed better than the control group. 2. At least 0.5mg of rt-PA should be required for the lysis of 2ml of hematomas. 3. Light microscopic examination revealed no histological evidence of hemorrhage in tissue sections from each brain. Conclusion: Recombinant tissue plasminogen activator may be safely and effectively employed for the lysis of intracerebral hematomas in animal model.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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