This study investigated the hypoglycemic effect of fermented soymilk extract (FSE) in STZ-induced diabetic mice. FSE was prepared via fermentation of soymilk with Bacillus subtilis followed by methanol extraction. The hypoglycemic effect was determined by inhibitory activities against ${\alpha}$-glucosidase and ${\alpha}$-amylase as well as the alleviation of postprandial glucose level. The non-fermented soymilk extract (SE) was used as control in this experiment. FSE showed higher (p<0.05) inhibitory activities than SE against ${\alpha}$-glucosidase and ${\alpha}$-amylase. The $IC_{50}$ values of FSE for ${\alpha}$-glucosidase and ${\alpha}$-amylase were 0.77 ancd 0.94 mg/mL, respectively, which were comparable or even superior to those of acarbose (0.79 and 0.68 mg/mL, respectively). In addition, a further suppression on the postprandial blood glucose levels were observed in the FSE than SE group for both STZ-induced diabetic mice and normal mice. Furthermore, FSE significantly lowered the incremental area under the curve (AUC) in the diabetic mice and the AUC in normal mice corroborated the hypoglycemic effect of FSE (p<0.05). Results from this study suggest that FSE may help decrease the postprandial blood glucose level via inhibiting ${\alpha}$-glucosidase and ${\alpha}$-amylase and the usefulness of FSE was proven to be better than SE.
Diverse types of nuruks (traditional Korean fermentation initiators) were examined in order to isolate thermotolerant yeast strains capable of utilizing xylose as a carbon source. Among twenty yeast strains that grew at 46℃, MBY/L1597 showed a notably higher specific growth rate than other strains. This strain was identified as Millerozyma farinosa. While the control strain M. farinosa KCTC27412 (= CBS7064) did not show xylose reductase (XR) activity and apparent growth at 46℃, M. farinosa MBY/L1597 exhibited XR activity of 4.98 ± 0.49 U/mg protein when NADPH was used as a cofactor. M. farinosa MBY/L1597 cultured at 46℃ produced (9.87 ± 1.00 g/l) xylitol from 20 g/l xylose, corresponding to approximately 50% yield. M. farinosa MBY/L1597 was deposited at the Korean Collection for Type Cultures as KCTC27797.
Lee, Kyu Ri;Yang, Sun Min;Cho, Sung Min;Kim, Myunghee;Hong, Sung-Yong;Chung, Soo Hyun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.27
no.1
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pp.57-66
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2017
Aflatoxins are classified as Group 1 (carcinogenic to humans) by the International Agency for Research on Cancer. In this study, a total of 134 fungal strains were isolated from 65 meju samples, and two fungal isolates were selected as potential aflatoxin $B_1$ ($AFB_1$)-biodetoxification fungi. These fungi were identified as Aspergillus oryzae MAO103 and A. oryzae MAO104 by sequencing the beta-tubulin gene. The two A. oryzae strains were able to degrade more than 90% of $AFB_1$ (initial concentration: $40{\mu}g/l$) in a culture broth in 14 days. The mutagenic effects of $AFB_1$ treated with A. oryzae MAO103 and MAO104 significantly decreased to 5.7% and 6.4%, respectively, in the frame-shift mutation of Ames tests using Salmonella typhimurium TA98. The base-substituting mutagenicity of $AFB_1$ was also decreased by the two fungi. Moreover, $AFB_1$ production by Aspergillus flavus was significantly decreased by the two A. oryzae strains on soybean-based agar plates. Our data suggest that the two $AFB_1$-detoxifying A. oryzae strains have potential application to control $AFB_1$ in foods and feeds.
The study was conducted to evaluate and compare the effects of feed additives on ruminal fermentation, nutrient digestibility and performance of lambs fed diets containing 60% wet brewers grains (WBG). In Experiment 1, two simultaneous trials were conducted. Fifty intact ($20.2{\pm}0.8kg\;BW$) lambs were used in a feedlot trial and 10 (rumen cannulated; $32{\pm}1kg\;BW$) in a digestion trial. The pH, volatile fatty acids (VFA) and ammonia-N in lambs were also estimated. Lambs were randomly assigned to one of five diets: i) without additives (Con), ii) with 1% bicarbonate (Bic), iii) with 1% bentonite (Ben), iv) with 33 mg/kg monensin (Mon) and v) with 200 mg/kg fibrolityc enzymes (Enz). In Experiment 2, 120 RambouilletPelibuey intact male lambs ($19.5{\pm}1.5kg\;BW$) were used in a feedlot trial and randomly assigned to four diets: i) without additives (control), ii) with 1% Bic, iii) with 33 mg/kg Mon and iv) with 1% Bic and 33 mg/kg Mon. In Experiment 1, lambs fed diets containing Bic or Mon had significantly higher final weight, DMI, ADG than other lambs. However, apparent DM, OM, CP, NDF and ADF digestibilities and ruminal individual VFA content were similar (p>0.05) among treatments. Conversely, treatmentcollection period interaction was significant for ruminal pH and NH3. In Experiment 2, lambs fed diets containing a Bic and Mon combination had significantly higher final weight, DMI and ADG. It is concluded lambs fed Bic or Mon or Bic and Mon combination had better performance characteristics than lambs on Ben or Enz.
Kim, H. J,;Park, K. K.;Myung, B. S.;Choi, J. S.;Kim, T. W.;Jang, C.;Hong, D. H.
Journal of Biosystems Engineering
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v.27
no.3
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pp.195-202
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2002
In order to make a winter cereal wrap silage, a tractor attached round bale wrapper was developed locally. Its specific structure and various functions were reported in the last submitted paper. In this study a control system of bale wrapper combining with the actuators of various processes was developed to make round bale wrapper compatible in the field. Also. its performance was tested by making the rye round bale. The results can be summarized as fellow. 1. The field capacity of round bale wrapping was investigated around 0.5 ha/hr, and the operating time of bale wrapper was about 3 min for each 500kg round bale 2. Plastic film which has maximum elongation rate of 796% was stretched to 150∼170% of original length and was lessened to 80∼90% of original width. 3. In the quality test of bale produced by developed bale wrapper, there was no significant changes of moisture contents if it was wrapped more than 4 layers of 25 ㎛-plastic film. 4. Also. temperature of the wrapped bale was about 33$\^{C}$ in the beginning of fermentation and was stabled to 26∼29$\^{C}$ during one month or more storage. Therefore, wrapping performance of the developed bale wrapper was properly.
Two experiments were carried out on a laboratory scale. The first involved a study of the effect of green tea on characteristics of fermented juice of epiphytic lactic acid bacteria (FJLB). FJLB was treated with 50 g/L of green tea products as follows: new shoot powder (FJLB+N), leaf powder (FJLB+L), commercial powder (FJLB+P), sterilized new shoot powder (FJLB+SN), sterilized leaf powder (FJLB+SL) or sterilized commercial powder (FJLB+SP). FJLB without any additive was also prepared (Untreated FJLB). After incubation, the number of microorganisms in FJLB were studied. Subsequently, these FJLB were applied at 10 ml/kg to chopped rhodesgrass to study their effects on fermentation. Compared with untreated FJLB, the addition of green tea increased (p<0.05) lactic acid bacteria (LAB) and also aerobic bacteria counts in FJLB. At 60 d of ensiling, all the FJLB treated silages were well preserved, pH and butyric acid content were lower (p<0.001) and lactic acid was higher (p<0.001) than that of the control. Lactic acid content was significantly higher (p<0.001) with treated FJLB than with untreated FJLB. FJLB treated with sterilized green tea decreased (p<0.001) the pH and the lactic acid content was higher (p<0.001) than that in the unsterilized green tea silages.
For the expression of CGTase gene(cgtS) kom Bacillus stearothemophilus NO2 in Saccharomyces cerevisiae, cgtS gene was subcloned into the Eschepichia coll-yeast shuttle vector, pVT103-U. The constructed plasmid, pVT-CGTS was introduced to 5. cemi-siae 2805 cell, and then the cgtS gene under the control of adhl promoter was successfully expressed in the yeast transformant and 87% of the total activity was detected into the fermentation medium. Therefore, the signal peptide of B. stearothemephilus NO2 CeTase showed high secretion efficiency in 5. cerevisiae. Optimal conditions of the recombinant yeast cell f3r expression of CGTase was achieved, when 5. cerevisiae 2805/pv7-CGTS was cultivated on YP medium at 2% dextrose, pH 5.5,$30^{\circ}C$ and the expression level of CGTase was 0.624units/mL for 48 h culture.
Production of 4-androstene-3,17-dione(AD) from cholesterol by microbial conversion was investigated. To facilitate the solubilization of cholesterol in the fermentation broth, ethanol was used as an organic solvent. Inhibition on cell growth by ethanol was observed to be negligible upto 2% (V/V) concentration. Microbial conversion was successfully carried out with high yield when the cholesterol was added at early logarithmic growth phase with pH control at 7.0. In order to improve the process productivity, bioconversion was conducted at various mode of cholesterol addition ; 0.1% (V/W) of cholesterol was found to be most appropriate for solubilization in ethanol and was added intermittently. When added three time(total 3 g/$\ell$), overall bioconversion yield reached upto 65% while single addition of same amount of cholesterol (3 g/$\ell$) yielded about 40% conversion.
Human insulin is composed of 21 amino acids of an A-chain and 30 amino acids of a B-chain. This is the protein hormone that has the role of blood sugar control. When the recombinant human proinsulin is expressed in Escherichia coli, a serious problem is the formation of an inclusion body. Therefore, the inclusion body must be denatured and refolded under chaotropic agents and suitable reductants. In this study, H27R-proinsulin was refolded from the denatured form with β-mercaptoethanol and urea. The refolding reaction was completed after 15 h at $15^{\circ}C$, whereas the reaction at $25^{\circ}C$ was faster than that at $15^{\circ}C$. The refolding yield at $15^{\circ}C$ was 17% higher than that at $25^{\circ}C$. The refolding reaction could be carried out at a high protein concentration (2 g/l) using direct refolding without sulfonation. The most economical and optimal refolding condition for human preproinsulin was 1.5 g/l protein, 10 mM glycine buffer containing 0.6 M urea, pH 10.6, and 0.3 mM β-mercaptoethanol at $15^{\circ}C$ for 16 h. The maximum refolding yield was 74.8% at $15^{\circ}C$ with 1.5 g/l protein. Moreover, the refolded preproinsulin could be converted into normal mature insulin with two enzymes. The average amount of human insulin was 138.2 g from 200 L of fermentation broth after enzyme reaction with H27R-proinsulin. The direct refolding process for H27R-proinsulin was successfully set up without sulfonation. The step yields for refolding and enzyme reaction were comparatively high. Therefore, our refolding process for production of recombinant insulin may be beneficial to the large-scale production of other biologically active proteins.
Kim, Tae-Su;Jung, Hyung-Moo;Kim, Sang-Yong;Zhang, Liaoyuan;Li, Jinglin;Sigdel, Sujan;Park, Ji-Hyun;Haw, Jung-Rim;Lee, Jung-Kul
Journal of Microbiology and Biotechnology
/
v.25
no.7
/
pp.1093-1100
/
2015
Acetate and lactate in growth media are detrimental to the production of Thermus maltogenic amylase (ThMA), a heterologous protein, as well as to the growth of recombinant Escherichia coli. Only 50 mM of acetate or 10 mM of lactate reduced 90% of specific ThMA activity. In this study, mutant E. coli strains blocked in the ackA-pta or ackA-pta and ldh pathways were created, characterized, and assessed for their culture performace in 300 L-scale fermentation. The ackApta and ldh double-mutant strain formed significantly less lactate and acetate, and produced a concomitant increase in the excretion of pyruvate (17.8 mM) under anaerobic conditions. The ackA-pta mutant strain accumulated significant acetate but had an approximately 2-fold increase in the formation of lactate. The ackA-pta and ldh double-mutant strain had superior overall performance in large-scale culture under suboptimal conditions, giving 67% higher cell density and 66% higher ThMA activity compared with those of the control strain. The doublemutant strain also achieved a 179% improvement in volumetric ThMA production.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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