• 제목/요약/키워드: embryogenic callus induction

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기내배양에 의한 쪽파의 체세포 염색체 배가 (Chromosome Doubling of Allium wakegi Araki by In Vitro Cultures)

  • 임순희;안장순;정창남;한태호
    • Journal of Plant Biotechnology
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    • 제29권4호
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    • pp.259-264
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    • 2002
  • 쪽파의 배발생 캘러스 유도에는 2,4-D의 단독첨가가 보다 효과적이었으나, 2,4-D의 농도가 높을수록 기형배의 배발생율이 높았다. BA를 혼합첨가하였을 때는 기형배가 보다 많이 발생하였다. 배형성을 위한 외식편으로는 경정이 가장 좋았으며 그 다음 인편, 엽조직 순이었다. 또한 0.09 M의 sucrose를 첨가한 배지에서 배발생 callus 유기가 가장 좋았다. 2,4-D와 BA의 농도가 상이한 배지에서 유기된 배발생 callus로부터 재분화된 식물체의 염색체 변이율은 8∼33.3%였으며, 4배체와 2배체+4배체의 혼수체가 나타났다. 염색체 변이율은 인편 유래의 식물체에서 18.7%로 가장 높았다. 경정 부위에서 유기된 배발생 callus는 33.5%로 식물체 재분화율이 높았지만, 염색체 변이율은 7.0% 정도로 낮았다. 또한 0.26 M sucrose배지에서 배양한 식물체에서 염색체 변이율이 높았으며. 0.09∼0.20 M sucrose배지에서 분화된 식물체에서 염색체 변이율은 15.2∼16.6%로 거의 안정적이었다.

들잔디 성숙종자로부터 캘러스배양 및 식물체 재분화에 미치는 몇 가지 요인의 영향 (Factors Affecting Callus Induction and Plant Regeneration from Mature Seed of Zoysiagrass (Zoysia japonica Steud.))

  • 이상훈;김범수;원성혜;조진기;김기용;박근제;성병렬;이효신;이병현
    • 한국초지조사료학회지
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    • 제24권1호
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    • pp.29-36
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    • 2004
  • 들잔디(Zoysia japonica Steud.)의 최적 조직 배양 조건을 확립하기 위하여 성숙종자로부터 최적 캘러스 유도 및 효율적인 식물체 재분화에 미치는 몇 가지 요인의 영향을 조사하였다. 성숙종자로부터 배발생 캘러스 유도율은 3mg/L 2,4-D가 첨가된 MS 배지에서 85%로 가장 높았으며 NAA 또는 IAA를 첨가한 처리구보다 높게 나타났다. 배발생 캘러스로부터 식물체 재분화는 0.1 mg/L 2,4-D와 5 mg/L BA가 첨가된 N6 배지에서 73.3%로 가장 높게 나타났다. 기본배지의 종류에 따른 배양효율의 차이는 배발생 캘러스 유도에는 MS 배지가, 식물체 재분화에는 N6배지가 가장 효과적이었다. 재분화 된 식물체는 1/2 MS rooting 배지에서 뿌리를 형성되어 pot에 이식하였을 때 정상적으로 분화되어 생장하였다. 본 연구를 통하여 확립된 단기간 고효율 재분화 시스템은 분자육종을 통한 신품종 들잔디의 개발에 유용하게 응용되어질 수 있을 것이다.

배지첨가물질이 이탈리안 라이그래스의 종자유래 캘러스 배양에 미치는 영향 (Effects of Medium Supplements on Seed-derived Callus Culture of Italian Ryegrass)

  • 우현숙;이병현
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • 제46권2호
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    • pp.243-250
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    • 2004
  • 이탈리안 라이그래스의 최적 조직배양조건을 확립하기 위하여 ‘Jeanne’ 'Florida-80', 'Metro'세 가지 품종의 성숙종자로부터 배발생 캘러스 유도 및 캘러스로부터 식물체 재분화에 미치는 배지 첨가물질의 영향을 조사하였다. 성숙종자로부터 배발생 캘러스 유도시에 첨가되는 식물 생장조절물질로는 모든 품종에서 2,4-D의 경우 5mg/L의 농도로 첨가된 MS 배지에서 배발생 캘러스가 가장 높은 빈도로 유도되었으며, dicamba의 경우 7mg/L의 농도로 첨가해주었을 때 배발생 캘러스의 유도율이 가장 높았다. 배발생 캘러스로부터 식물체 재분화는 배발생 캘러스를 1mg/L 2,4-D와 5mg/L BA가 첨가된 N6 배지에서 배양했을 때 가장 높은 식물체 재분화율을 나타내었다. 광조건에 따른 배양효율의 차이는 모든 품종에서 배발생 캘러스의 유도시에 암상태에서 배양한 캘러스로부터 식물체 재분화율이 광상태에서 배양한 캘러스의 재분화율 보다 약10%정도 높게 나타났다. Casein hydrolyaste와 L-proline의 경우 동시에 배지에 혼용 첨가해 주었을 때 배발생 캘러스 유도율과 식물체 재분화율이 증가되었다. 본 연구를 통하여 확립된 효율적인 배발생 캘러스의 유도 및 식물체 재분화체계는 분자육종을 통한 신품종 이탈리안 라이그래스의 개발에 유용하게 이용되어질 수 있을 것이다.

Improvement of Shoot Regeneration from Scutella-Derived Callus in Rice

  • Kim, Yong-Wook;Cho, Joon-Hyeong;Lee, Jang-Yong
    • 한국작물학회지
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    • 제49권1호
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    • pp.52-60
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    • 2004
  • The optimized in vitro culture system was investigated for improvement of regeneration efficiencies by observing the responses of scutella-derived callus of Korean rice (Oryza sativa L.). Large variations of callus induction (43.9-93.9%) and shoot regeneration (0-88.7%) were observed among the rice cultivars depending on medium. However, shoot regeneration was significantly improved by selected utilization of basal medium, growth regulators, and carbon sources. N6 basal medium was more efficient for embryogenic callus induction than MS or LS basal medium, while MS was superior to N6 for shoot regeneration. The calli of highly regenerative cultivars grew faster and showed higher rates of green tissue formation (GT) and shoot regeneration (SR) and lower rate of callus browning (CB) than those of recalcitrant cultivars. Although a higher level of kinetin stimulated the GT and SR in highly regenerative cultivars, $10\textrm{mgL}^{-1}$ kinetin generally suppressed the GT and SR, while CB was accelerated compared to $2\textrm{mgL}^{-1}$ kinetin. Additional benefits of sorbitol combined with maltose (or sucrose) under $5\textrm{mgL}^{-1}$ kinetin were certainly confirmed on regeneration efficiencies compared to sucrose alone as carbon source and osmotic regulator. This combination showed high rate of GT and SR with multiple shoots while low rate of CB. With MSRK5SM-Pr medium ($5\textrm{mgL}^{-1}$ kinetin, 3% sorbitol, 2% maltose, $500\textrm{mgL}^{-1}$ proline), the regeneration efficiencies of total 17 out of 24 cultivars were practically improved 160% on average compared to MSRK2S ($2\textrm{mgL}^{-1}$ kinetin, 3% sucrose) control medium. Especially, the medium was most effective to the cultivars showing a medium level of regenerability such as Daesanbyeo and Dongjinbyeo and Suwon477, enhancing efficiencies more than 300-600% compared to MSRK2S medium.

두릅의 엽조직배양에 의한 Callus유기 및 식물체 재분화 (Callus Induction and Plant Regeneration from Leaf Tissue. Culture of $\emph{Aralia elata}$ S.)

  • 장한호;박철호;조동하;신영범
    • 한국작물학회지
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    • 제38권4호
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    • pp.366-370
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    • 1993
  • 본 연구는 기내에서 두릅의 잎조직배양을 통한 효율적인 종묘대량증식체계를 확립하기 위한 기초연구로서 엽내으로부터 캘루스 유기 및 식물체 재분화를 시도한 결과이다. 1. 유연조직으로부터 캘루스 유기는 1.0mg/1 Thidiazuron 첨가배지에서 70%의 유기율을 보였다. 2. 0.1~0.2mg/1 Dicamba 및 1.0mg/1 Picloram 첨가가 캘루스의 증식에 효과가 있었다. 3. 호르몬 첨가배지에서는 식물체 재분화가 이루어지지 않은 반면 Hormon-free 배지에서 shoot 및 root의 분화가 이루어져 완전한 식물체를 얻었다.

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한국들잔디 배아세포의 부유배양과 식물체 재생 (Embryogenic cell suspension culture and plant regeneration in zoysiagrass (Zoysia japonica Steud))

  • 팽왼주안;한리바우;퀴충휘;리다이엥;박태윤
    • 아시안잔디학회지
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    • 제23권2호
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    • pp.345-352
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    • 2009
  • 한국들잔디는 운동경기장이나 골프 코스 등에 폭넓게 쓰이는 난지형 잔디이다. 많은 품종은 영양체로 번식한다. 이 연구는 배아세포 유도와 식물체 재생을 위한 적정 배양액 개발과 배양조건을 연구하여, 한국잔디의 육종과 번식을 위한 세포배양 체계 확보를 목적으로 하였다. 그 결과 $Cu^{++}\;2.5mgL^{-1}$를 유도 배양액에 첨가하는 것이 캘러스 유도를 위한 최적 농도 조건 이였음을 보여주었다. Sub-culture의 횟수의 증가는 캘러스의 질을 향상시켰다. 세포 부유배양을 위한 최적 용량은 2.5에서 10mL 사이였으며 본 연구에서 58%의 식물체 재생산비율을 보였다.

켄터키 블루그래스에 있어서 캘러스 배양 및 식물체 재분화에 미치는 요인의 영향 (Factors Affecting Callus Culture and Plant Regeneration in Kentucky Bluegrass)

  • 이기원;이상훈;이동기;우현숙;김도현;최명석;원성혜;서성;이병현
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • 제47권6호
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    • pp.1067-1074
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    • 2005
  • 켄터키 블루그래스의 최적 조직배양조건을 확립하기 위하여 성숙종자로부터 배발생 캘러스 유도 및 효율적인 식물체 재분화를 위한 품종별 배양효과, 배지종류 및 배지첨가물 등의 최적조건을 조사하였다. 배발생 캘러스 유도시 첨가되는 auxin으로는 2,4-D가 가장 효율적이었으며, 3mg/L 2,4-D와 0.1mg/L BA가 첨가된 MS배지에서 배발생 캘러스가 가장 높은 빈도로 유도되었다. 식물체 재분화는 배발생 캘러스를 1mg/L 2,4-D와 3mg/L BA가 첨가된 N6 배지에서 배양했을 때 57.7%의 높은 재분화율을 나타내었다. 기본배지의 종류에 따른 배양효율의 차이는 캘러스 유도에는 MS 배지가, 식물체 재분화에는 N6 배지가 효과적이었다. 켄터키 블루그래스의 품종에 따른 배발생 캘러스의 유도율과 재분화 능력은 큰 차이를 나타내어 Newport가 가장 높은 배양효율을 나타내었다. 본 연구를 통하여 확립된 단기간의 효율적인 재분화시스템은 분자육종을 통한 신품종 켄터키 블루그래스 개발에 유용하게 응용되어질 수 있을 것이다.

알팔파 캘러스로부터 삼투압 스트레스 처리에 의한 효율적인 식물체 재분화 (Efficient Plant Regeneration from Alfalfa Callus by Osmotic Stress Treatment)

  • 김진수;이동기;이상훈;우현숙;이병현
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • 제46권5호
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    • pp.879-886
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    • 2004
  • 알팔파의 최적 조직배양 조건을 확립하기 위하여 자엽으로부터 배발생 캘러스 유도 및 캘러스로부터 식물체 재분화에 미치는 배지첨가물질과 삼투압 스트레스 처리의 영향을 조사하였다. 배발생 캘러스 유도시에 첨가되는 식물생장조절물질로는 5mg/L 2,4-D와 0.2mg/L kinetin이 혼용 첨가된 SH 배지에서 배발생 캘러스가 가장 높은 빈도로 유도되었다. 배발생 캘러스를 1mg/L 2,4-D와 2mg/L BA가 첨가된 SH 배지에서 배양했을 때 체세포 배가 형성되었다. 재분화 배지에 첨가되는 질소원으로 5mM L-proline과 1g/L casein hydrolysate를 동시에 첨가해주었을 때, 식물체 재분화율이 증가되었다. 배발생 캘러스를 0.7M 농도의 삼투압 스트레스 조건에서 12 ${\sim}$ 18시간 처리한 후, 재분화 배지에서 배양한 결과 재분화율이 현저히 증가되었다. 가장 높은 식물체 재분화율은 0.7M sucrose가 첨가된 배지에서 18시간 처리한 후, 재분화 배지에서 배양했을 때 30.7%의 효율을 나타내었다. 본 연구를 통하여 확립된 알팔파의 효율적인 배발생 캘러스의 유도 및 식물체 재분화체계는 분자육종을 통한 신품종 알팔파의 개발에 유용하게 이용되어질 수 있을 것이다.

High frequency plant regeneration from mature embryos of an elite barley cultivar (Hordeum vulgare L. cv Baegdong)

  • Lee, Kui-Jae;Wtpsk, Senarath;Lee, Wang-Hyu
    • 한국자원식물학회:학술대회논문집
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    • 한국자원식물학회 2003년도 제10차 국제학술회의 및 추계정기 학술발표회
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    • pp.21-21
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    • 2003
  • An efficient plant regeneration system was developed for Hordeum vulgare L. cv Baegdong - an important Korean cultivar. The protocol was based on a series of experiments involving the sizes of mature embryos and the culture media. The embryo size is found to be critical for the establishment of embryogenic callus. Embryos of 1.1-1.5 mm size showed a much higher ability to produce embryogenic callus capable of regenerating green plants. The auxins picloram and dicamba proved effective in inducing callus from mature embryos. 2.5 mg $I^{-1}$ dicamba and 4.0 mg $I^{-1}$ picloram in Murashige and Skoog's (MS) medium was optimum for the induction of primary callus. The induced primary callus was loose and friable which ultimately developed into creamy white and compact callus after transferring into the fresh medium. Multiple shoots were induced in the MS medium supplemented with 6.0 g $I^{-1}$ maltose, 20 mg $I^{-1}$ sorbitol, 0.5 mg $I^{-1}$ 2,4-D and 1.0 mg $I^{-1}$ kinetin and the rate was 6.5 shoots per embryo. Regenerated plants were hardy and developed roots rapidly in the medium containing 0.2 $I^{-1}$ IBA. This efficient plant regeneration system provides a foundation for generating transgenic plants of this important barley cultivar.

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High frequency plant regeneration from mature embryos of an elite barley cultivar (Hordeum vulgare L. cv Baegdong)

  • Lee, Kui-Jae;Wtpsk, Senarath;Lee, Wang-Hyu
    • 한국자원식물학회:학술대회논문집
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    • 한국자원식물학회 2003년도 심포지엄
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    • pp.59-67
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    • 2003
  • An efficient plant regeneration system was developed for Hordeum vulgare L. cv Baegdong - an important Korean cultivar. The protocol was based on a series of experiments involving the sizes of mature embryos and the culture media. The embryo size is found to be critical for the establishment of embryogenic callus. Embryos of 1.1-1.5 mm size showed a much higher ability to produce embryogenic callus capable of regenerating green plants. The auxins picloram and dicamba proved effective in inducing callus from mature embryos. $2.5\;m;I^{-1}$ dicamba and $4.0\;mg\;I^{-1}$ picloram in Murashige and Skoog's (MS) medium was optimum for the induction of primary callus. The induced primary callus was loose and friable which ultimately developed into creamy white and compact callus after transferring into the fresh medium. Multiple shoots were induced in the MS medium supplemented with $6.0\;g\;I^{-1}$ maltose, $20\;mg\;I^{-1}$ sorbitol, $0.5\;mg\;I^{-1}$ 2, 4-D and $1.0\;mg\;I^{-1}$ kinetin and the rate was 6.5 shoots per embryo. Regenerated plants were hardy and developed roots rapidly in the medium containing $0.2\;I^{-1}$ IBA. This efficient plant regeneration system provides a foundation for generating transgenic plants of this important barley cultivar.

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