내인성 암원유전자인 c-myc유전자는 세포의 증식과 분화에 밀접한 연관되어 있으며, 그의 생물학적인 기능은 이형결합체인 myn과의 결합을 통해서 이루어진다. 본 연구에서는 착상전 생쥐 배아에서의 내인성 c-myc 유전자와 myn 유전자의 발현을 조사하기 위하여 RT-PCR 방법을 이용하였다. myn 유전자 산물은 배아 발생시기를 거쳐서 균일하게 발현된 반면,c-myc 유전자의 발현은 차후 포배기 시기까지 상당한 양으로 증가1세포기에 측정된 후,2세포기에 들어 현저하게 줄었으나, 차후 포배기 시기까지 상당한 양으로 증가하였다. 이러한 c-myc과 myn유전자발현의 비균등한 조화가 중요한 역할을 할 것으로 사료된다. 착상전 생쥐 초기배아 발생 과정에서의 myn 유전자의 기능을 알아 보고자, myn에 대한 antisense oligouncleotides(Myn2, Myn3)를 1세포기이 수정란에 미세주입하였다. Myn2와 Myn3의 미세주입에 의해 상실기/포배기의 변이 시기에 비정상적인 발생이 야기되었다. 이사의 결과로, c-myc은 그의 이형결합체인 myn과 함께 착상전 생쥐 초기배아에서의 중요한 역할을 할 것으로 사료된다.
Objectives : This study was performed to evaluate the effects of root of Cibotii rhizoma(CR) ethanol extract on the tissue and neuronal damage of the spinal cord injury(SCI). Methods : SCI was induced by mechanical contusion following laminectomy of 10th thoracic vertebra in Sprague-Dawley rats. CR was orally given once a day for 7 days after SCI. Tissue damage and nerve fiber degeneration were examined with cresyl violet and luxol fast blue(LFS) histochemistry. HSP72(as neuronal damage marker), MAP2(as nerve fiber degeneration marker), c-Fos(immediate early gene), and Bax(pro-apoptotic molecule) expressions were examined using immuno-histochemistry. Individual immuno-positive cells expressing HSP72, MAP2, c-Fos and Bax were observed on the damaged level and the upper thoracic and lower lumbar spinal segments. Results : 1. CR reduced degeneration of nerve fibers and motor neuron shrinkage in the ventral horn of the lower lumbar spinal segment, but generally it did not seem to ameliorate the tissue injury following SCI. 2. CR reduced demyelination in the ventral and lateral funiculus of the lower lumbar spinal segment. 3. CR reduced HSP72 expression on the neurons in the peri-central canal gray matter adjacent to the damaged region. 4. CR strengthened MAP2 expression on the motor neurons in the ventral horn and on nerve fibers in the lateral funiculus of the lower lumbar spinal segment. 5. CR reduced c-Fos positive cells in the peri-lesion and the dorsal horn of the damaged level and in the ventral horn of the lower lumbar spinal segment. 6. CR reduced Bax positive cells in the peri-lesion and the dorsal horn of the damaged level and in the ventral horn of the lower lumbar spinal segment. Conclusions : These results suggest that CR plays an inhibitory role against secondary neuronal damage and nerve fiber degeneration. following SCI.
Guanosine-5'-diphosphate 3'-diphosphate (ppGpp) serves as alarmone in bacterial stringent responses. In this study, an affinity column was constructed by immobilizing ppGpp to NHS-Sepharose for isolating ppGpp-binding proteins. A novel ppGpp-binding protein, YjgA, was isolated and characterized by MALDI-TOF MS (matrix-assisted laser desorption ionization-time-of-flight mass spectrometry) coupled with two-dimensional gel electrophoresis. YjgA and truncated forms of YjgA were cloned and over-expressed in BL21 (DE3). The binding affinity of YjgA to ppGpp was determined by equilibrium dialysis. The interaction of YjgA with ppGpp was very specific, considering that the dissociation constant of YjgA with ppGpp was measured as $5.2{\pm}2.0{\mu}M$, while the affinities to GTP and GDP were about 60 and 30 times weaker than ppGpp. Expression of yjgA gene in Escherichia coli K-12 MG1655 was examined by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). RT-PCR results revealed that yjgA was expressed from early to late stationary phase. The yjgA deletion mutant exhibited decreased cell number at stationary phase compared to parent strain and the over-expression of YjgA increased the cell number. These results suggested that YjgA might stimulate cell division under stationary phase. In most prokaryotic genome, about half of the protein candidates are hypothetical, that are expected to be expressed but there is no experimental report on their functions. The approach utilized in this study may serve as an effective mean to probe the functions of hypothetical proteins.
Yi, Sang Ah;Lee, Jieun;Park, Sun Kyu;Kim, Jeom Yong;Park, Jong Woo;Lee, Min Gyu;Nam, Ki Hong;Park, Jee Hun;Oh, Hwamok;Kim, Saetbyul;Han, Jihoon;Kim, Bo Kyung;Jo, Dong-Gyu;Han, Jeung-Whan
Journal of Ginseng Research
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제44권1호
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pp.58-66
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2020
Background: The biological and pharmacological effects of BST204, a fermented ginseng extract, have been reported in various disease conditions. However, its molecular action in metabolic disease remains poorly understood. In this study, we identified the antiadipogenic activity of BST204 resulting from its inhibition of the S6 kinase 1 (S6K1) signaling pathway. Methods: The inhibitory effects of BST204 on S6K1 signaling were investigated by immunoblot, nuclear fractionation, immunoprecipitation analyses. The antiadipogenic effect of BST204 was evaluated by measuring mRNA levels of adipogenic genes and by chromatin immunoprecipitation and quantitative real-time polymerase chain reaction analysis. Results: Treatment with BST204 inhibited activation and nuclear translocation of S6K1, further decreasing the interaction between S6K1 and histone H2B in 10T1/2 mesenchymal stem cells. Subsequently, phosphorylation of H2B at serine 36 (H2BS36p) by S6K1 was reduced by BST204, inducing an increase in the mRNA expression of Wnt6, Wnt10a, and Wnt10b, which disturbed adipogenic differentiation and promoted myogenic and early osteogenic gene expression. Consistently, BST204 treatment during adipogenic commitment suppressed the expression of adipogenic marker genes and lipid drop formation. Conclusion: Our results indicate that BST204 blocks adipogenesis of mesenchymal stem cells through the inhibition of S6K1-mediated histone phosphorylation. This study suggests the potential therapeutic strategy using BST204 to combat obesity and musculoskeletal diseases.
대청호의 한 지류인 소옥천으로부터 고효율 조류억제 세균을 분리하기 위하여 176균주를 분리 스크린하였으며, 이 중 AJ1이 가장 높은 조류성장억제능을 나타내었다(지름 50.0 mm 성장억제환). 조류성장억제능이 높았던 AJ1 균주 동정을 위하여 형태학적, 생리 생화학적, 16S rRNA gene sequence 분석, 지방산 분석을 수행하였으며 그 결과, Pseudomonas aeruginosa 로 판별되었다. AJ1 배양액을 원심분리한 후 상등액을 조류배양액에 첨가 시, 상등액에 의한 조류성장억제능이 나타남에 따라 세포 외 물질 분비에 의한 것을 확인할 수 있었다. 가장 높은 조류성장억 제능[60.2(${\pm}$1.3)%]은 탄소원으로 mannitol을 사용하고, 온도 $30^{\circ}C$, pH 8에서 배양할 때 보였다. 또한, AJ1 균주의 배양기간 및 투여시기에 따른 조류성장억제능 평가 결과, 조류 성장 초기 단계에 조류성장억제균을 투여하였을 때 조류성장억제능이 높게 나타났고, 균주의 배양기간에 따른 조류성장억제능은 연관성이 나타나지 않았다. 상등액 접종량에 따른 조류성장억제능은 상등액의 접종량이 높아질수록 M. aeruginosa의 제거량은 증가하였으며, 고농도(40ml/L)로 적용하였을 때 80.3(${\pm}$8.6)%의 가장 높은 M. aeruginosa 제거효율을 보여주었다. 제거 속도의 경우 상등액 접종량이 낮아질수록 M. aeruginosa 제거율이 높아지는 경향을 확인하였으며, 저농도(10 ml/L)로 적용시 $8.2{\mu}g$ chl-a/supernatant ml/day로 가장 높게 나타났다. 본 연구 결과, AJ1 균주의 현장 적용 시 M. aeruginosa의 제어에 효율적일 것으로 사료된다.
기관지확장증은 일반적으로 원인을 찾기 위한 광범위한 조사없이 증상적 치료를 하는 경우가 많으나 기관지확장증을 유발할 수 있는 원인을 아는 경우 특별한 치료 방침을 정할 수도 있다. X연관 무감마글로불린혈증은 세포질 내 X 염색체에 존재하는 Bruton's tyrosine kinase (Btk) 유전자의 돌연변이에 의해 성숙 B 림프구가 분화하지 못하여 발생하는 체액성 면역결핍질환으로 반복적인 호흡기감염을 통해 기관지확장증을 유발한다. 이는 드문 유전적 질환으로 조기 발견과 주기적인 면역글로불린 치료가 중요하다. 저자들은 반복적인 감염의 과거력과 함께 미만성 기관지확장증을 가진 성인 남성에서 BTK 유전자의 돌연변이를 확인하여 X연관 무감마글로불린혈증을 진단하고 치료한 사례를 경험하여 이를 보고하는 바이다.
Journal of the Korean Data and Information Science Society
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제25권5호
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pp.1095-1106
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2014
본 연구에서는 악성간암환자의 생존기간에 영향을 주는 인자를 찾기 위하여 반응변수를 악성간암 환자의 생존을 임상변수의 정보와 SNP유전인자를 통합한 자료를 대상으로 이해하기 쉬운 나무구조 생존모형과 심볼릭자료분석을 실시하여 영향을 주는 유의한 인자 뿐 아니라 그 임계치를 구하여 임상적으로 유용한 결과를 찾아 임상에 적용하는 것이 목적이다. 악성간암환자의 임상자료를 계량화하여 통계적 예후진단 모형을 구함으로써 임상변수 간 숨겨진 변수간의 관계를 규명하고 생존기간 군에 따른 예측 분류모형을 구하여 현시적으로 진단후 예후에 영향을 주는 중요 임상변수와 유전체변수 그 임계치를 구하여 임상에서의 치료계획에 중요한 근거를 제시했다. 심볼릭데이터 분석 결과 정상, 만성 간염, 간염, 악성간염 등의 4개 군으로 구성된 1840명의 대상자를 분석 5 유전체의 20개 SNP가 밝혀진 바 있다. 즉 IL10-ht2가 악성간암의 발병에 매위 강한 관련이 있고 TGFB L10P-Prosms가 만성 간염 환자 중 악성간암 발생 위험을 줄여주는 유전체로 밝혀졌다. SNP변수와 질병군의 컴셉트 변수에 따라 상관정도를 원의 반지름 길이로 상대적으로 나타내 줌으로써 가장 판별력 있는 심볼릭변수를 상대적으로 비교할 수 있었다. 임상자료와 유전체자료를 통합하여 심볼릭 나무구조 생존모형을 구하여 생존기간을 군으로 한 나무구조모형을 유의한 변수와 기준치와 함께 구할 수 있었다.
In the present study, we investigated the antiproliferative activity of the water extract of Samgibopae-tang (SGBPT) in NCI-H460 and A549 non-small-cell lung cancer cell lines. We found that exposure of A549 cells to SGBPT resulted in the growth inhibition in a dose-dependent manner as measured by MTT assay, however SGBPT did not affect the growth of NCI-H460 cells. The antiproliferative effect by SGBPT treatment in A549 cells was associated with morphological changes such as membrane shrinking and cell rounding up. SGBPT treatment did not induce the cell cycle arrest in both cell lines, however the frequency of sub-G1 population was concentration-dependently increased by SGBPT treatment in A549 cells. SGBPT treatment partially induced the expression of tumor suppressor p53 in A549 cells and the expression of cyclin-dependent kinase inhibitor p21(WAF1/CIP1) was markedly increased in both transcriptional and translational levels in A549 cells. The up-regulation of p21 by SGBPT occurred in a similar a concentration dependent manner to that observed with the inhibition of cell viability and induction of sub-G1 population of the cell cycle. However SGBPT treatment did not affect other growth regulation-related genes such as early growth response-1 (Egr-1), nonsteroidal anti-inflammatory drug-activated gene-1 (NAG-1), inducible nitric oxide synthease (iNOS), cyclooxygenases (COXs), telomere-regulatory factors in A549 as well as NCI-H460 cells. Taken together, these findings suggested that SGBPT-induced inhibition of human lung carcinoma A549 cell growth was aoosciated with the induction of p21 and the results provided important new insights into the possible molecular mechanisms of the anti-cancer activity of SGBPT.
Substantial evidence suggests that behavioral and reinforcing effects of cocaine can be mediated by the mesolimbic dopaminergic system. It has been shown that repeated injections of cocaine produce increase in locomotor activity, expression of the immediate-early gene, c-fos in the nucleus accumbens (NAc), which was one of the main dopaminergic terminal areas. Herbal-acupuncture as a therapeutic intervention has been widely used for the treatment of many functional disorders such as drug abuse. Coptidis Rhizoma (CR) and its main component, berberine (BER) were selected as herbal medicine of herbal-acupuncture. Both medicines have been known to have the therapeutic effect on the central nervous system. In order to investigate the effects of CR and BER herbalacupuncture at shenmen (HT7) point (CR/H and BER/H) on the cocaine-induced behavioral sensitization, the influence of CR/H and BER/H on repeated cocaine-induced locomotor activity, the change of c-Fos expression in the brain by immunohistochemistry were examined. Male SD rats were given CR/H (0.4mg/kg) and BER/H (0.1mg/kg) 30 min before daily injections of cocaine hydrochloride (15mg/kg. i.p.) 10 days. After 3 days withdrawal, rats received a challenge injection of cocaine (15mg/kg, i.p.). Systemic challenge with cocaine produced much larger increased locomotor activity, accumbal Fos-like immunoreactivity in the NAc. Pretreatment with CR/H and BER/H significantly inhibited cocaine-induced locomotor activity, the change of c-Fos expression in the rats. Our data demonstrated that the inhibitory effects of cocaine-induced behavioral sensitization by CR/H and BER/H were closely associated with the reduction of presynaptic dopamine release in the NAc. These results suggest that CR/H and BER/H can be effectively applied to cocaine addiction.
본 연구는 영주댐 건설사업 영향에 따른 멸종위기야생생물 1급 어류 흰수마자의 보전을 위하여 수몰예정지 내 흰수마자를 서식적합지로 이주시키고, 댐에 의한 내성천 상하류 단절 및 유전적 폐쇄에 대비하여 인공종묘생산 및 복원을 통해 내성천에 치어를 방류하여 그 결과를 관찰하였다. 영주댐 수몰예정지 내 흰수마자는 8회 이상 포획 시도에도 불구하고 서식이 확인되지 않아 이주가능지로 이주는 이루어지지 않았다. 내성천에서 포획한 친어 40개체를 통해 인공종묘생산한 치어 5,000개체는 친어의 유전 다양성을 물려받은 것으로 분석되었으며, 사전에 물리적, 생물학적 환경조건 분석을 통하여 자연 서식지와 유사한 최적방류지를 선정하여 인공종묘생산 치어를 방류하였다. 초기에는 방류지점을 중심으로 미소분산이 이루어졌으나, 시간흐름에 따라 확산이 진행되면서 재포획 개체수가 감소하였다. 포획된 방류 개체들은 내성천 자연생태환경에 적응하여 서식하고 있으며, 복부 팽만도가 높고 총배설공으로 배설물이 확인되는 점으로 보아 자연 먹이 섭식이 정상적으로 이루어지고 있는 것으로 나타났다. 따라서 인공종묘생산에 의한 영주댐 상하류 내성천 흰수마자 유전적 동질성 확보와 복원 개체군의 증강에 일차적 성공이 이루어지고 있는 것으로 파악되었으며 향후 장기적인 모니터링을 통한 지속적인 효과 분석이 필요할 것으로 전망되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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