In typical proteomic analysis, trypsin digestion is one of the most time-consuming steps. Conventional proteomic sample preparation methods use an overnight trypsin digestion method. In this study, we compared high-pressure cycling technology (PCT) during enzyme digestion for proteome analysis to the conventional method. We examined the effect of PCT on enzyme activity at temperatures of 25, 37, and $50^{\circ}C$. Although a fast digestion (1 h) was used for the standard protein mixture analysis, the PCT-assisted method with urea showed better results for protein sequence coverage and the number of peptides identified compared with the conventional method. There was no significant difference between temperatures for PCT-assisted digestion; however, we selected PCT-assisted digestion with urea at $25^{\circ}C$ as an optimized method for fast enzyme digestion, based on peptide carbamylation at these conditions. The optimized method was used for stem cell proteome analysis. We identified 233, 264 and 137 proteins using the conventional method with urea at $37^{\circ}C$ for 16h, the PCT-assisted digestion with urea at $25^{\circ}C$ for 1 h, and the non-PCT-assisted digestion with urea at $25^{\circ}C$ for 1 h, respectively. A comparison of these results suggests that PCT enhanced the enzyme digestion by permitting better access to cleavage sites on the proteins.
With benefits to the human health, environment, economy, and energy, anaerobic digestion (AD) systems have attracted remarkable attention within the scientific community. Anaerobic digestion system is created from (bio)reactors to perform a series of bi-metabolism steps including hydrolysis/acidogenesis, acetogenesis, and methanogenesis. By considering the physical separation of the digestion steps above, AD systems can be classified into single-stage (all digestion steps in one reactor) and multi-stage (digestion steps in various reactors). Operation of the AD systems does not only depend on the type of digestion system but also relies on the interaction among growth factors (temperature, pH, and nutrients), the type of reactor, and operating parameters (retention time, organic loading rate). However, these interactions were often reviewed inadequately for the single-stage digestion systems. Therefore, this paper aims to provide a comprehensive review of both single-stage and multi-stage systems as well as the influence of the growth factors, operating conditions, and the type of reactor on them. From those points, the advantages, disadvantages, and application range of each system are well understood.
Microbial digestion of feed in the rumen involves a sequential attack culminating in the formation of fermentation products and microbial cells that can be utilized by the host animal. Most feeds are protected by a cuticular layer which is in effect a microbial barrier that must be penetrated or circumvented for digestion to proceed. Microorganisms gain access to digestible inner plant tissues through damage to the cuticle, or via natural cell openings (e.g., stomata) and commence digestion from within the feed particles. Primary colonizing bacteria adhere to specific substrates, divide to form sister cells and the resultant microcolonies release soluble substrates which attract additional microorganisms to the digestion site. These newly attracted microorganisms associate with primary colonizers to form complex multi-species consortia. Within the consortia, microorganisms combine their metabolic activities to produce the diversity of enzymes required to digest complex substrates (e.g., cellulose, starch, protein) which comprise plant tissues. Feed characteristics that inhibit the microbial processes of penetration, colonization and consortia formation can have a profound effect on the rate and extent of feed digestion in the rumen. Strategies such as feed processing or plant breeding which are aimed at manipulating feed digestion must be based on an understanding of these basic microbial processes and their concerted roles in feed digestion in the rumen.
Chiang, C.-C.;Croom, J.;Chuang, S.-T.;Chiou, P.W.S.;Yu, B.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.21
no.10
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pp.1522-1528
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2008
The objective of this study was to develop a model for simulating gastric digestion in the pig. The model was constructed to include the chemical and physical changes associated with gastric digestion such as enzyme release, digestion product removal and gastric emptying. Digesta was collected from the stomach cannula of pigs to establish system parameters and to document the ability of the model to simulate gastric digestion. The results showed that the average pH of gastric digesta increased significantly from 2.47 to 4.97 after feed consumption and then decreased 140 min postprandial. The model described the decrease in pH within the pigs' stomach as $pH_t=5.182e^{-0.0014t}$, where t represents the postprandial time in minutes. The cumulative distribution function of liquid digesta was $V_t=64.509e^{0.0109t}$. The average pepsin activity in the liquid digesta was 317Anson units/mL. There was significant gastric emptying 220 min after feed consumption. The cybernetic dynamic system of gastric digestion was set according to the above data in order to compare with in vivo changes. The time course of crude protein digestion predicted by the model was highly correlated with observed in vivo digestion (r = 0.97; p = 0.0001), Model prediction for protein digestion was higher than that observed for a traditional static in vitro method (r = 0.89; p = 0.0001).
Islam, Mohammad Ashiqul;Ekeberg, Dag;Rukke, Elling-Olav;Vegarud, Gerd Elisabeth
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.28
no.4
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pp.559-567
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2015
Ex vivo digestion of proteins and fat in Red Chittagong Cattle milk from Bangladesh was carried out using human gastrointestinal enzymes. This was done to investigate the protein digestion in this bovine breed's milk with an especial focus on the degradation of the allergenic milk proteins; ${\alpha}_{s1}$-casein and ${\beta}$-lactoglobulin and also to record the generation of peptides. Lipolysis of the milk fat and release of fatty acids were also under consideration. After 40 min of gastric digestion, all the ${\alpha}_s$-caseins were digested completely while ${\beta}$-lactoglobulin remained intact. During 120 min of duodenal digestion ${\beta}$-lactoglobulin was reduced, however, still some intact ${\beta}$-lactoglobulin was observed. The highest number of peptides was identified from ${\beta}$-casein and almost all the peptides from ${\kappa}$-casein and ${\beta}$-lactoglobulin were identified from the gastric and duodenal samples, respectively. No lipolysis was observed in the gastric phase of digestion. After 120 min of duodenal digestion, milk fat showed 48% lipolysis. Medium (C10:0 to C16:0) and long (${\geq}C17:0$) chain fatty acids showed 6% to 19% less lipolysis than the short (C6:0 to C8:0) chain fatty acids. Among the unsaturated fatty acids $C18:1{\sum}others$ showed highest lipolysis (81%) which was more than three times of $C18:2{\sum}all$ and all other unsaturated fatty acids showed lipolysis ranging from 32% to 38%. The overall digestion of Bangladeshi Red Cattle milk was more or less similar to the digestion of Nordic bovine milk (Norwegian Red Cattle).
1. Objectives To examine appearances is essential of diagnosing Sasang constitution. It has been studied in various way, we focus the correlation between morphology of mouth and digestion. 2. Methods We have collected 231 cases of participants who were diagnosed sasnag constitution and measured morphology of mouth and analyzed the correlation between morphology of mouth and digestion. 3. Results and conclusions In result of analyzing the relation between morphology of mouth and digestion, morphology of mouth have correlation with digestion. And also morphology of mouth have correlation with digestion according to sex and sasang constitution.
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.33
no.1
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pp.32-38
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2011
In this study, the correlations of concentrations in sediment heavy metals between two pretreatment methods, total digestion and aqua regia digestion, have been investigated. Total 43 samples had been collected from streams and lakes in Yeongsan and Seomjin watersheds. They were decomposed in two pretreatment methods and five metal components (Cd, Cr, Ni, Pb, Zn) were analyzed. Overall average concentrations of heavy metals were Zn>Cr>Pb>Ni>Cd in the order. The concentrations of aqua regia digestion were 35.0% (Cd), 53.8% (Cr), 66.2% (Ni), 64.4% (Pb) and 76.4% (Zn) of the concentrations of total digestion and heavy metal concentrations of total digestion were higher. Heavy metal concentrations in sediments from lakes were higher than those from streams. The correlation equations between the concentrations of total digestion and aqua regia digestion were obtained. The concentrations of Zn and Ni, which showed strong linear correlations, increased in aqua regia digestion as the concentration in total digestion increased. The linear correlation coefficients between two digestion methods for most analyzed metals were above the average correlation. However, these results can be applied with limitations due to heterogeneity of sediments.
The high concentration of nitrogen and phosphorus in wastewater incorporated with the ability to use carbon dioxide as the carbon source make the microalgae become more attractive in wastewater treatment process. This study evaluates the optimal conditions for the digestion of settelable solids from the recirculating aquaculture system to produce the biomass of the green microalga Scenedesmus sp. After solids separation, aerobic digestion of settleable solids under disperse condition produced nitrate as the final product of consequently ammonification and nitrification processes. With the optimal digestion procedure, nitrate concentration during aerobic digestion in 2000 mL vessel increased from $9.63{\pm}0.65mg\;N/L$ to $58.66{\pm}0.06mg\;N/L$ in 10 days. Thereafter, cultivation of Scenedesmus sp. was performed in 1000 mL Duran bottle with air bubbling. The highest Scenedesmus sp. specific growth rate of $0.321{\pm}0.01/d$ was obtained in treatment using liquid fraction after aerobic digestion as the whole culture medium for Scenedesmus sp. cultivation. With this study, digestion of $8,800{\pm}128.12mg\;dry\;weight/L$ of settleable solids from fish pond finally produced $1,235{\pm}21mg\;dry\;weight/L$ of Scenedesmus sp. biomass.
An on-line digestion system based on the flow injection analysis technique was presented for the determination of total phosphorus. The system converts condensed and organic phosphoruses into orthophosphate that can be analyzed spectrophotometically. The reaction between orthophosphate and ammonium molybdate in a strong acid medium forms the yellow complex of phosphomolybdate which is next reduced to a molybdic blue complex by stannous chloride. The quantitation of orthophosphate is based on the absorbance of the molybdic blue. To determine total phosphorus, the digestion system was installed between the sample injector and the reaction coil with the added lines of digestion solution(potassium persulfate+sulfuric acid) and the $H_2O$ carrier. The system has shown that the digestion efficiencies were greater than 95% for the typical condensed and organic phosphoruses. When tripolyphosphate standards were used, the calibration data showed that the linear dynamic range extended to a concentration of 1.5ppm with the detection limit of 25ppb total phosphorus. The typical relative standard deviation was less than 2%. The proposed system was successfully applied to lake water, wastewater, and streamwater. The analytical variables such as digestion efficiency, analysis time, and reproducibility were evaluated and compared with the manual digestion method.
This study has been conducted to investigate biodegradation characteristics and optimum mixing ratio for co-digestion with thermophilic acid-fermented food waste and sewage sludge using batch anaerobic digester. As the basis operating conditions for anaerobic digestion, the reaction temperature was controlled $35{\pm}1^{\circ}C$ and stirrer was set 70rpm. Thermophilic acid-fermented food waste and sewage sludge were mixed at the ratio of 10:0, 7:3, 5:5, 3:7, 0:10 and 5;5(food waste : sewage sludge) as the influent substrates. In results of co-digestion according to mixing ratio of thermophilic fermented food wastes and sewage sludge in batch mesophilic anaerobic digestion reactor, $385mL\;CH_4/g\;VS_{added}$ of methane production rate at 1:1 mixing ratio was more than that of any other mixing ratios. Compared with $293mL\;CH_4/g\;VS_{added}$ of methane production rate at 1:1 mixing ratio of food wastes and sewage sludge, pretreatment of food wastes by thermophilic acid fermentation was more effective in co-digestion with sewage sludge.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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