Objectives : Coptidis rhizoma (CR) is an oriental medicine that has been used in many traditional prescriptions against diabetes mellitus in Korea for centuries. Our purpose was to determine the protective effect and its action mechanism of CR on the cytotoxicity of pancreatic -cell line (RINm5F cell). Methods : In this experiment, we used methods such as MTT assay for detection of cytotoxicity, DNA fragmentation assay for detection of apoptotic cell death, LDH activity assay for detection of necrotic cell death, and measurement of $DiOC_{6}$ (3) retention for detection of mitochondrial membrane potential (MMP). Background : Nitric oxide (NO) is believed to playa key role in the process of pancreatic -cell destruction leading to insulin-dependent diabetes mellitus (IDDM). Results : Exposure of RINm5F cells to chemical NO donor such as S-nitroso-N-acetylpenicillamine (SNAP) induced cytotoxic events such as DNA fragmentation and lactate dehydrogenase (LDH) release into medium. However, pretreatment of RINm5F cells with CR extract ($10~50{\mu\textrm{g}}/ml$) for 3 hours prevented SNAP-induced DNA fragmentation and LDH release into medium through the inhibition of MMP disruption. Conclusions : These results suggest that CR may be a candidate for a therapeutic or preventing agent against IDDM.
Studies have been conducted on fermentation products known to increase biological activity through bioconversion of mycelium. In this study, ethanol extract of waxy sorghum (WS) and ethanol extract of waxy sorghum fermented with Phellinus linteus mycelium (WSPM) were prepared, and functional component contents, antioxidant activity, and cytotoxicity were analyzed. Total polyphenol contents and total flavonoid contents of WSPM were higher than those of WS. In addition, the ${\beta}-glucan$ content of WS was higher than that of WSPM. DPPH and ABTS radical scavenging activities showed that WSPM had higher antioxidant activity than WS at all concentrations. Analysis of SOD-like activity also showed higher antioxidant activity in WSPM. MTT assay demonstrated that WSPM exhibited high inhibitory activity in all cancer cells, and in particular, in HeLa cells with the highest inhibition. A concentration-dependent increase in anticancer activities of WS and WSPM was detected in all cancer cells, which was identical to the SRB assay result. MTT and SRB assay showed the increased cytotoxicity of WSPM in cancer cells. Therefore, it is expected that WSPM can be used as a functional food material.
Objectives : The purpose of this study is to investigate the biological Effect of multi-herbal drug 'KOCO-P1' on mouse macrophage Raw 264.7 cells. Methods : Multi-herbal drug 'KOCO-P1' was composed of Ginseng Radix, Astragali Radix, Polygonati Rhizoma, Liriopis Tuber, and Scrophulariae Radix. Cytotoxicity and cytoprotective activity of K0C0-P1 was verificated by MTT assay. And antioxidative effect of K0C0-P1 against EtOH, Nicotine was inspected by Hydroperoxide assay. Results : K0C0-P1 showed no cytotoxicity on RAW 264.7 cells for 24, 48, 72 hours. KOCO-P1 at 200, 100, and 50 ug/mL reduced the production of H202 in Raw 264.7 cells by EtOH. KOCO-P1 at 50 ug/mL reduced the production of H202 in Raw 264.7 cells by Nicotine. Conclusions : KOCO-P1 could be supposed to have antioxidative effect on macrophage with no cytotoxicity.
The cytotoxicity of the ethanol extracts of varietal samples of mulberry leaves and branches and silkworm feces was measured using CT-26 cells originated from murine metastatic colon cancer, using dye uptake assay in order to find potential anticancer agents. Two ethanol extracts (varietal mulberry leaves and mulberry branches) were prepared from 16 varietal mulberries and used as partial extract materials for the activity assay. Among these, the ethanol extracts from Shinkwangppong leaves showed a little anticancer activity, and those from Sugaeppong, Cheongunppong and Gumsulppong branches showed some anticancer activity as well as cytotoxicity. In contrast, ethanol extracts from freeze-dried, the 3rd day of 5th instar feces showed more potent anticancer activity than that of other mulberry leaves, mulberry branches and other 5th silkworm instar larva feces on the basis of high UV absorbance at 665 nm.
Ganoderma lucidum has been traditionally used as a medicine for treatment of bronchitis, arthritis, and high blood pressure, and it has been reported to display many biological activities including anticancer and immune activities. Since mushroom mycelium is known to have excellent biological activities together with mushroom fruiting body, studies on biological activities of mushroom mycelium have been actively conducted. Thus, the present study compared the biological activities before and after the cultivation of Ganoderma lucidum mycelium on Atractylodes rhizoma. When the radical scavenging activity was assessed by the DPPH assay, ARGL (ethanol extract of Atractylodes rhizoma mycelium fermented with Ganoderma lucidum) showed radical scavenging activity of 5.58~82.56% at concentrations of $10{\sim}500{\mu}g/assay$, while AR (ethanol extract of Atractylodes rhizoma) showed radical scavenging activity of 5.27~72.08% at the same concentrations. When measured by using the ABTS assay, ARGL showed higher radical scavenging activity than AR, which was consistent with the result obtained by the DPPH assay. In the MTT assay, the cytotoxicity of ARGL against all cell lines was higher than that of AR. In particular, the cytotoxicities of AR and ARGL against Hep3B at a concentration of $400{\mu}g/assay$ were 71.81% and 86.40%, respectively. In addition, the result obtained by the SRB assay was consistent with the result obtained by the MTT assay. According to the results mentioned above, there is a high probability that medicinal herb cultures using mycelium can be used as sources of functional foods since the cytotoxicities against cancer cells and antioxidant activities increased when the mycelium was fermented with Atractylodes rhizoma.
In this study, antineoplastic activity against human hepatocellular carcinoma cell line(Hep G2) was tested in Gleditsiae Spina. Gleditsiae Spina was extracted with water, and the cytotoxic activity was tested using a calorimetric tetrazolium assay(MTT assay), the apoptosis was tested using a DNA electrophoresis and flow cytometry. The nitric oxide production from mouse peritoneal macrophage was tested using a Griess method. Gleditsiae Spina extracts against the proliferation of Hep G2 cells not showed cytotoxicity at the concentration of less than $100{\mu}g/ml$, and Gleditsiae Spina extracts not showed the cytotoxicity of mitomycin C and the cytotoxicity of cisplatin on Hep G2 cells. Gleditsiae Spina extracts aginist the proliperation of BALB/c 3T3 cells not showed cytotoxicity, the proliperation of mouse thymocytes and splenocytes not showed cytotoxicity at the concentration of less than $100{\mu}g/ml$. Gleditsiae Spina extracts not showed nitric oxide production from mouse peritoneal macrophage in vitro. Gleditsiae Spina was administered orally for 7 days at 300mg/kg increased nitric oxide production from mouse peritoneal macrophage.
The purpose of this study is to examine the protective effect of Cynomorii herba on $H_2O_2$-induced cytotoxicity in male germ cells. The effects were studied by a modified MTT assay. Hydrogen peroxide significantly induced cytotoxicity in GC-1 spg cells, and co-treatment or pre-treatment of Cynomorii herba extract has reduced the cytotoxicity in a dose dependant manner. These results suggest that Cynomorii herba extract increases the survival rate of GC-1 spg cells through the antioxidant effect against $H_2O_2$-induced cytotoxicity.
The flower buds of Tussilago farfara (TF) have been traditionally used in oriental medicine for the treatment of bronchitis and asthma. In our study, the primary objective was to determine the mechanisms that are inherent to TF-induced cytotoxicity and apoptosis, using the methanolic extract of TF (TFM) in HT-29 human colon cancer cells. We found that TFM-induced induced cytotoxicity in HT-29 cells in a dose-dependent manner. This effect was verified via an MTT reduction assay, an lactate dehydrogenase (LDH) release assay, and a colony formation assay. Interestingly, we also detected apoptotic bodies on Hoechst staining, and attempted to determine whether TFM-induced apoptosis involved the caspase pathway using a caspase-3/7 activity assay. Overall, the results indicate that TFM contain chemotherapeutic agents and potential candidates use for against human colon cancer cells.
Prunus mume is well known contain many functional materials that play beneficial roles in the human body. Studies have found that many organic acids and polyphenol compounds exist in Prunus mume. In this study, content of total polyphenols and flavonoids, antioxidative activity and cytotoxicity of ethanol extract from Prunus mume were measured Contents of total polyphenolic and total flavonoid compounds in ethanol extract from Prunus mume were 16.92 mg/g and 59.95 mg/g, respectively. The $IC_{50}$ of ethanol extract from Prunus mume were $237.72 {\mu}g$/assay and $239.58 {\mu}g$/assay by DPPH and ABTS radical cation scavenging test, respectively. Additionally, ferric ion reducing antioxidant power (FRAP) value of ethanol extract from Prunus mume was 0.94 mM ($FeSO_4$ eq.) by $800 {\mu}g$/assay. Cytotoxicity of Prunus mume against five kinds of cancer cell lines increased as the extract concentration increased Especially, cytotoxicity of the ethanol extract against A-549 (lung cancer line) was higher than that against any other cancer cell line by both MTT and SRB assay. These results show that ethanol extract of Prunus mume has considerably high antioxidative and cytotoxic activities.
Objectives: This study investigated the removal efficacy and cytotoxicity of a newly developed calcium hydroxide paste (cleaniCal, Maruchi) using N-2-methyl-pyrrolidone (NMP) as a vehicle in comparison with ApexCal (Ivoclar Vivadent) and Calcipex II (Nishika), which use different vehicles such as polyethylene glycol and propylene glycol, respectively. Materials and Methods: Thirty maxillary premolars with oval-shaped canals were divided into 3 groups and the teeth were filled with one of the pastes. After removal of the paste, micro-computed tomographic (${\mu}$-CT) imaging was obtained to assess the volume of residual paste in the root canal of each tooth. The teeth were then split longitudinally and the area of the paste-coated surface was evaluated by stereomicroscopy. The cytotoxicity of each product was assessed using an agar overlay assay. The effect of each vehicle on cell viability was evaluated using the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. The data were analyzed using one-way analysis of variance and Tukey's tests to detect any significance (p < 0.05). Results: In the ${\mu}$-CT and stereomicroscopic analysis, cleaniCal exhibited less remnants of medicament than ApexCal and Calcipex. cleaniCal showed a higher cytotoxicity than the other pastes in the agar overlay assay. Furthermore, NMP exhibited lower cell viability compared to the other vehicles. Conclusions: cleaniCal showed better removal efficacy compared to the other products. However, clinicians should be aware of the higher cytotoxicity of the NMP-based material and consider its possible adverse effects on periradicular tissue when it is overfilled.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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