본 연구는 고밀도 배양시 rotifer의 영양강화 방법 및 영앙강화제에 따른 rotifer의 개체밀도와 지방산 조성을 조사하였다. 첫째 방법은 담수산 Chlorella로 rotifer를 고밀도로 배양한 후 영양강화제인 유지효모, Algamac, Super Selco, 해수산 Chlorella로 2차 영양강화 하였다. 두 번째 방법은 rotifer 반 연속 고밀도 배양중 18시간 동안 담수산 Chlorella를 공급한 후 6시간동안 영양강화제를 공급하였고 대조구로 담수산 Chlorella을 공급하지 않고 24시간 동안 해수산 Chlorella를 공급하였다. 배양수조는 5$\ell$를 이용하여 수온 $28^{\circ}C$를 유지하였고 산소가스를 공급하였다. 반 연속 고밀도 배양 방법에서 24시간 동안 해수산 Chlorella를 공급하였을 때 rotifer 밀도와 용존산소는 안정적으로 유지되었고 rotifer의 n-3 HUFA의 함량이 다른 실험구보다 가장 높게 나타났다. 그러나 2차 영양강화 방법과 반 연속 고밀도 배양 방법에서 유지효모, Algamac 및 Super Selco로 영양강화하였을 때 rotifer의 밀도와 용존산소는 급격히 감소하는 경향을 보였고 이들 영양강화제 가운데 Super Selco가 비교적 높은 n-3 HUFA의 함량i글 보였다. 따라서 본 실험을 통해서 rotifer 고밀도 배양시 안정적인 rotifer 성장과 rotifer의 질적 개선을 위해서는 24시간 해수산 Chlorella를 공급하는 것이 효율적인 것으로 판단된다.
Park, Yueng-Guen;Takehiko Tosha;Satoshi Fujita;Boru Zhu;Hiroo Iwata;Ryu, Hwa-Won
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제8권1호
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pp.41-46
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2003
Difficulties associated with bioartificial liver (BAL) preservation limit not only the commercialization of BAL, but also its clinical trials. In this study, the possibility of cold preservation of BAL cartridges containing porcine hepatocytes was examined at 4$^{\circ}C$. In an in vitro perfusion culture System, BAL cartridges maintained cytochrome P450 metabolic function for at least 50 days. However, all BAL cartridges completely lost their ammonia eliminating ability when stored at 4$^{\circ}C$. We a1so studied the effect of cell density on the maintenance of BAL liver function In a highly differentiated and healthy state. As expected, BALs containing a larger number of hepatocytes demonstrated higher metabolic functions. When metabolic functions were compared per gram of hepatotytes, no large differences were observed between devices containing different densities of hepatocytes. Decreased cell density did not Successfully prolong BAL function. The viability and function of isolated hepatotytes highly depend on the culture conditions, such as cell density, substrata, culture media, and additives to the culture media. Perfusion culture of BAL cartridges at 4$^{\circ}C$ gave a promosing result with respect to the maintenance of P450 activity. However, as indicated by the rapid loss of ammonia metabolic activity, many factors still remain to be optimized for preservation of BAL keeping high metabolic functions for a longer time.
커들란은 용액의 pH 7.0에서 salt 상태로 존재하기 때문에 커들란만이 액상에 녹아 있는 경우에는 분리공정은 원심분리를 함으로써 분리가 가능하다. 그러나, 세포외 다당류로 생산된 커들란읜 세포, 염 의 무기물이 섞여 있기 때문에 이러한 물질을 제거하는 것이 커들란 분리의 중요한 변수가 되었다. 커들란의 생산을 위한 분리에 관한 보고는 원심분리 방법을 이용한 것으로 알려져 있음 세포 및 불순물 등을 제거하여 순수한 커들란을 분리하기 위해 pH swing separation (pH가 높은 경우 커들란이 용액에 녹는 성질을 이용)을 이용하였으나 원심분리를 수 차례 반복해야 되기 때문에 소요되는 동력이 많이 필요하여 에너지 절감형 및 오염절감형의 새로운 공정의 개발이 필요하게 되었다. 온 연구에서는 pH swing separation 에서 동력비가 많은 드는 단점을 감소시키기위하여 커들란의 물리 화학적인 특성을 고려한 분리공정을 개발하였다. 향후 공정 개선을 위한 지속적인 연구가 필요하며 완성시 경제적이 공정을 개발하는 것이 가능할 것이다.
Water temperature of Oliver flounder farm affects Oliver flounder growth and mortality rate. In laboratory experimental tanks, optimal water temperature was $22.5^{\circ}C$($21{\sim}24^{\circ}C$) and cultivatable water temperature was $12{\sim}28^{\circ}C$. The purpose of this study is to identify applicable and useful water temperature of Oliver flounder farm in case of actual farming. The data applied in the analysis was collected from Jeju island. In the study, various analytical methods including productivity analysis, regression analysis, statistical analysis were conducted for 13 Oliver flounder culture farms. The result of analysis can be summarized as follows : First, growth rate on the Oliver flounder culture farms was related to mean of water temperature, variation of water temperature and low water temperature. Second, survival rate on the Oliver flounder culture farms was related to mean of water temperature. In case of including Oliver flounder stocking density, defined as the surface area of Oliver flounder per $m^2$ of water surface area, survival rate strongly related to mean of water temperature, variation of water temperature, cultivating capability and stocking density. Third, production weight per $m^2$ of water surface area was strongly related to mean of water temperature, low water temperature and cultivating capability. Growth rate and survival rate was analyzed into mediate variable character.
High-cell-density cultivation of yeast was investigated using the agricultural waste products corn steep liquor (CSL) and molasses. The Saccharomyces cerevisiae KV-25 cell mass was significantly dependent on the ratio between C and N sources. The concentrations of molasses and CSL in the culture medium were statistically optimized at 10.25% (v/v) and 16.87% (v/v), respectively, by response surface methodology (RSM). Batch culture in a 5-l stirred tank reactor using the optimized medium resulted in a cell mass production of 36.5 g/l. In the fed-batch culture, the feed phase was preceded by a batch phase using the optimized medium, and a very high dried-cell-mass yield of 187.63 g/l was successfully attained by feeding a mixture of 20% (v/v) molasses and 80% (v/v) CSL at a rate of 22 ml/h. In this system, the production of cell mass depended mainly on the agitation speed, the composition of the feed medium, and the glucose level in the medium, but only slightly on the aeration rate.
Characteristic growth patterns of Cordyceps militaris isolates on various media, under varying light conditions and at varying incubation periods were examined. Light was found to be the most critical single factor in determining the density, texture, and pigmentation of the mycelial culture of the fungus. However, under the light condition, the degree of pigmentation and mycelial density were found to be affected by the incubation period and type of medium. Irrespective of the variations in medium type or incubation period, there was no pigmentation of the mycelium under dark condition. Radial growth of the mycelium was faster under dark incubation rather than under light incubation. Abundant mycelial density and darkest pigmentation of C. militaris isolates were produced in nutritionally rich media like SDAY, SMAY and CZYA, suggesting that these media may fulfill all the requirements for vegetative growth of the fungus. Growth characteristics of C. militaris isolates could be easily observed by the simple agar culture method, which would be useful to characterize the phenotypic characteristics of large number of pure cultures of the fungus under given conditions of growth factors such as medium, light and temperature.
Mesenchymal cells from the leg buds of stage 24-chick embryos differentiated into chondrocytes when plated at high density. Treatment of high density micromass culture of chick mesenchymal cells with cytochalasin D(CD, 2 $\mu$M for 24 h) resulted in inhibition of chondrogenesis. CD treatment was found to affect the expression of the contractile protein $\alpha$-smooth muscle actin ($\alpha$-SM actin). In control cultures, $\alpha$-SM actin uniformly expressed from culture day 2, but the CD-treated cells induced expression of $\alpha$-SM actin from the first day of culture followed by a continuous increase. Expression of pan-cadherin (P-cadherin) decreased as chondrogenesis proceeded in the control culture, whereas the CD-treated cells showed sustained expression. These results propose a close connection of chondrogenic differentiation with expression of $\alpha$-SM actin and P-cadherin.
The over-expression of Bcl-2 has greatly improved the culture period, specific growth rate, and maximum viable cell density of NS0 cells culture under low serum condition. Further analysis of these data suggests that a saturation model of the Monod type can be used to represent the relationships of specific growth rate and initial serum concentration. The ${\mu}_{max}$ and $K_s$ for the Bcl-2 cell line is $0.927day^{-1}\;and\;0.947\%(v/v)$ respectively, which are $21\%$ greate and $7\%$ lower respectively than its control counterpart. Study on the amino acid supplementation revealed that Bcl-2 cell lines possess greater improvement in the specific growth rate and maximum viable cell density compared to the control cell lines. A further increase in the amino acid supplementation has resulted a $17\%$ decrease in specific growth rate and no improvement in maximum viable cell density in the control culture. However, the Bcl-2 cell line exhibited a better growth characteristic in this culture condition compared to that of control cell lines. The higher specific growth rate and maximum viable cell density of the Bcl-2 cell line in medium fortified with serum and MEM EM suggested a more efficient nutrient metabolism compared to that in the control cell line. The low serum and amino acid utilisation rate and the higher cell yield may prove to be important in the development of serum/protein free culture.
전북 고창의 시설하우스에서 수박 재배 작기에 따른 해충의 시기별 발생 밀도를 2006년부터 2007년 까지 조사하였다. 촉성재배에서 발생되는 주요 해충은 목화진딧물이었으며, 다발생기는 3월 중순과 4월 하순이었다. 반촉성재배에서 발생되는 주요 해충은 목화진딧물과 응애류(점박이응애+차응애) 이었으며, 다발생시기는 6월 이었다. 억제재배에서는 목화진딧물, 응애류(점박이응애+차응애), 아메리카 잎굴파리, 목화바둑명나방의 발생과 피해가 많았다. 목화진딧물과 응애류는 9월에 발생량이 많았다. 아메리카잎굴파리는 9월 상순에 발생량이 많았다. 목화바둑명나방은 8월 중순부터 피해가 나타났으며, 9월 중순에 피해엽률이 79.4%로 가장 큰 피해를 주었다.
This study was carried out to investigate the effect of biological factors on the in vitro production(IVP) of bovine oocytes for development of simple culture methods and medium. Oocytes from the slaughterhouse ovaries were matured and fertilized using general protocol and this study was examined if there were necessary to co-culture, media change, media type and embryo density. This results were as follows: 1. The development rate according to co-culture with cumulus cells and non co-culture as drop culture was not significantly different in cleavage (68.9 vs 71.7%), 8-cell stage (41.2 vs 44.1%) and blastocyst stage (12.2 vs 13.8%), respectively (p<0.05) 2. The blastocyst development rates in YS and CRIaa were higher than that in TCM199 (12.4, 10.4$ vs 3.7%), but the cleavage (69.0, 77.8 and 61.0%) and 8-cell stage (31.7, 37.0 and 35.7%) development accoring to YS, TCM199 and CRIaa ws not significantly different, respectively (p<0.05). 3. There was no significantly different in cleavage (62.6, 59.5 and 61.2%), 8-cell(34.7, 37.9 and 34.0%) and blastocyst (9.5, 11.6 and 12.8%) development among medium change time as control, Group I and Group II, respectively (p<0.05). 4. Blastocyst formation of 8-cell stage according to embryo density was not significantly different in 1, 10 and 25 embryos (27.3, 22.5 and 34.0%), respectively (p<0.05). These results indicated that simple culture system could reduce bovine IVP embryos as drop culture as non co-culture system, high density embryo (25 embryos/50 $\mu$1 drop). YS defined medium and no medium change for whole culture period, although other biological factors need to examine in order to produce efficient IVP bovine embryos.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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