Effects of growth regulators and culture conditions on seed germination, haustorium development, and callus formation of Korean mistletoe (Viscum album var. coloratum (Kom.) Ohwi) were described. Histological examination showed that seed of V. album contained one or two zygotic embryos with rod shape, and actively dividing cells were mainly distributed in radicle region rather than cotyledon of zygotic embryo. The most significant factor for seed germination and haustorium development of V. album was the requirement of the light. Various growth regulators examined in this study failed to substitute the effect of the light on seed germination. The frequency of callus formation was highest at 27.3% when flower buds were cultured onto B5 medium containing $0.1\;mgl^{-1}$ IAA. Explants from other organs were recalcitrant in forming calluses. Culture conditions described in this study could be applied for production of useful metabolites and multiplication of V. album in future.
This study was carried out to investigate the appropriate medium and constitutionof growth regulators for somatic embryogenesis for development of rapid mass propagation system via somatic embrygenesis in Rehmennia glutinosa. Embryogenic callus formation from leaf explant was more effective when 4mg / l BA with 0.5mg / l NAA than that of treated with only auxins or cytokinins. LS medium was suitable for embryogenic callus formation. LS medium with 4mg / l BA with 0.5mg / l NAA was effective for the maintenance and proliferation of embryogenic callus. In suspension culture, addition of 1mg / l BA to LS medium was proper for somatic embryogenesis. The highest rate of shoot developement form cotyledon stage embryo was obtained in 1/2 LS medium and plantlet survived by 75% after transplanted to the soil. after 4 weeks.
Carrot cotyledon explants cultured on MS medium with 1 mg/L 2,4-D were transferred to a hormone-free solid medium overlaid with filter paper in order to elucidate the effect of simple physical treatment on the development and germination of somatic embryos. Transfer of the explants cultured for one week on MS basal medium overlaid with 3 sheets of filter paper on to MS basal medium increased somatic embryo production 2-39 times over the one week culture on medium without filter paper overlay. Maturation and germination of somatic embryos was more prominent on medium overlaid with filter paper than on medium without filter paper. The explants cultured for one week on filter paper overlay added with liquid medium showed prominent decrease in somatic embryo formation compared to filter paper overlay only. It is suggested that the filter paper overlay affected the moisture environment of the somatic embryos developing on it.
In order to investigate the effect of cytokinins on the cotyledonary variability of somatic embryos in Heracleum moellendorffii Hance., somatic embryos were induced from the immature zygotic embryo on MS medium containing 1.0mg/l 2, 4-D, and then transferred to 2,4-D-free and cytokinin-added medium for somatic embryogenesis after 4weeks culture. Polycotyledonary embryos were formed most abundantly(84.9%) on the 0.2mg/l BA medium as compared with the 0.2mg/l 2ip(42.6%) and kinetin(32.9%) media, and it was proportional to BA concentrations(0.01~0.1mg/l). The rate of polycotyledonary embryo formation increased proportional to the period of BA treatment and also increased more at the globular stage than at the heart, torpedo-shaped and cotyledonary stages.
Watering methods for soybean sprouts could be mainly divided into two groups of overspraying and underwatering. The study was carried out to determine the effect of water supplying method on growth, morphological characteristics, colour and cutting resistance of soybean (cv. Junjery) sprouts and culture temperatures. The morphological characters, fresh and dry weights were measured on the 6th day after their culture, but daily mean temperatures inside the plastic culture boxes were measured by data-loggers. Lateral roots were more formed in the underwatering method (UM) than in the overspraying method (OM). Although their total lengths of both methods were nearly same, OM had longer hypocotyl but UM did longer root than the other. Middle and upper parts of hypocotyl were more thickened in UM than in OM. UM showed more hypocotyl fresh and dry weights than OM. There was, however, no significant difference between the two methods in cotyledon, root, total fresh and dry weights although the culture temperature was higher in OM than in UM.
Park, Jae-Seong;Kim, Ik-Hwan;Hong, Eui-Yon;Yun, Tae;Lee, Cheol-Hee;Jeong, Jae-Hun;Yang, Deok-Chun;Yun, Jong-Sun
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.15
no.4
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pp.285-290
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2007
This study was conducted to introduce phosphinothricin acetyl transferase (PAT) gene, resistant to basta which was non-selective herbicide, into balloon flower (Platycodon grandiflorum A. De. candolle). Seeds were germinated on MS medium, and 10-day-old immature cotyledon explants and 30-day-old leaf explants were cocultured with Agrobacterium tumefaciens strain MP 90 (pBinSyn) on 1/10 MS medium for 48 hours in the dark at $25^{\circ}C$. The cultures were transferred for selection of kanamycin-resistant shoots to the MS medium supplemented with 0.2 $mg/{\ell}$ NAA, 1.0 $mg/{\ell}$ BA, 3% sucrose, 100 $mg/{\ell}$ kanamycin, 500 $mg/{\ell}$ carbenicillin. Shoots were obtained from 10-day-old immature cotyledon explants after 4 weeks of culture. The shoots were subcultured twice every 4 weeks on the same medium for growth of transgenic shoots. Successful transformation was confirmed by histochemical GUS assay, PCR analysis, RT-PCR analysis, 10 $mg/{\ell}$ phosphinothricin treatment and 0.3% basta spray. The basta-resistant transgenic plants flowered normally.
The in vitro regeneration and genetic transformation systems in hot pepper(Capsicum annuum L.) have not been routinely available, which has been a major limiting factor in the application of new genetic manipulations. An efficient procedure to regenerate whole pepper plants and to generate transgenic plants expressing a foreign gene was established. A relatively high frequency of plant regeneration was observed when hypocotyl and cotyledon explants were cultured on MS medium supplemented with NAA 0.1 mg/L plus zeatin 2.0 mg/L or IBA 10.0 mg/L plus BAP 1.0 mg/L. Addition of AgNO$_3$5 $\mu$M to these media improved the regeneration frequency up to 8%. For plant transformation, hypocotyl and cotyledon explants of hot pepper were precultured on shoot induction media without kanamycin added for 2 days, and then cocultured with Agrobacterium tumefaciens pDY183 for 2 days. Putative transformants were obtained from selection media containing 100 mg/L kanamycin sulfate and 500 mg/L carbenicillin. Putatively selected transformants were confirmed by amplification of selectable marker genes (ADA and NPT II) by polymerase chain reacion. Successful transcripts of ADA gene were detected by Northern blot analysis. Enzyme activity of ADA was also examined by spectrophotometric analysis, and expression of ADA gene in hot pepper suggests the potential application of ADA gene as a selectable marker in plants.
This study was conducted to see the feasibility of breeding for sprout soybean cultivar with minimum benny flavor using lipoxygenase-less lines. Lipoxygenase-less cultivar Jinpumkong2 was crossed by lipoxygenase containing Gwangankong, Sebaeknamulkong, and Pureunkong as paternal parent and 24 lipoxygenase-less lines derived from those 3 combinations were selected and those lines were evaluated with their parental cultivars. Germination rate showed no difference between lipoxygenase-less lines and their parental cultivars, however, rates of normal sprout of those and Jinpumkong2 were 63 and $56\%$, and were lower than that of paternal parents. Hypocotyl length of those was same as Jinpumkong2, however, shorter than paternal parents. Texture characteristics including hardness, cutting force and mastication of 96 hour-cultured sprout of lipoxygenase-less lines showed higher value than that of their parental cultivars. Lipoxtgenase isozyme was not detected in the sprout cotyledon of lipoxygenase-less lines, however it was observed in the sprout hypocotyl of all the used genotypes. Though lipoxygenase activity in the seed of lipoxygenase-less lines was lower than that of Jinpumkong2(0.477, ${Delta}A$ 234 nm min-1 mg meal-1),2 lines revealed more than 0.5 value. Lipoxygenase-activity of 2 day-cultured sprout(both cotyledon and hypocotyl) was the highest, decreased in 3 days after culture and re-increased thereafter. Several lipoxygenase-less lines with lower lipoxygenase activity of sprout than Jinpumkong2 were selected and this suggested the possibility of breeding lines for soy-sprout with low benny flavor.
Kim, Dong-Gun;Kantayos, Vipada;Kim, Dong-Kwan;Park, Heung-Gyu;Kim, Haeng-Hoon;Rha, Eui-Shik;Lee, Sheong Chun;Bae, Chang-Hyu
Korean Journal of Plant Resources
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v.29
no.1
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pp.143-153
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2016
Plant regeneration via organogenesis and somatic embryogenesis was investigated in Korean soybean cultivars including Cheongja 3, Jinpumkong 2, Taekwangkong and Uram. Cotyledon, cotyledon+hypocotyl and hypocotyl segments of 7-day-old seedlings were cultured on MS medium containing various concentration (0, 1, 2 and 4 ㎎/L) of BA and TDZ. The results showed that MS medium supplemented with BA 2.0 ㎎/L yielded the highest shoot formation ratio of 83.3%. In 4 cultivars, Taekwangkong showed the highest ratio of shoot formation. When various sizes of immature cotyledons (S: 1∼ 2 ㎜, M: 3∼5 ㎜, L: 6∼8 ㎜) were tested on MS medium containing 2,4-D 40 ㎎/L for somatic embryogenesis, the optimum size for embryogenic callus induction was 3∼5 ㎜ in length of immature cotyledons. In 4 cultivars, Taekwangkong showed the highest percentage of embryogenic callus induction. The results indicate that Taekwangkong is the best soybean cultivar for plant regeneration via organogenesis and embryogenic callus induction among the 4 cultivars.
This study was conducted to examine suspended embryogenic cells growth with days of culture, effects of various kinds/concentrations of osmoticum for induction of somatic embryos (SEs), following somatic embryos germination or plantlet regeneration. The proliferation pattern of embryogenic cells in suspension culture is characterized by settled cells volume (SCV) increased with the duration of culture with marked the maxium of SCV (10.1 ml) in 18 days of culture, however the SCV of cells gradually decreased after that. In comparison of kinds/concentrations of osmoticum on somatic embryo induction, the highest induction number (352.3/g FW) of the SE was showed in 0.2 M sucrose, in addition, we also observed some effects with treatments of 0.2 M maltose (203.7) and 0.3 M maltose (193.7), respectively. However, no somatic embryos produced in treatments of 7.5% PEG plus 0.15 M sucrose or maltose. In comparison of germination efficiency of SEs which occurred from the treatments of various kinds/ concentrations of osmoticum, the highest induction frequency of cotyledon (25.2%) was obtained from SEs that produced 0.3 M maltose, however, the best occurrence rates of hypocotyl (39%), radicle (30.3%) and plantlet regeneration (3.5%) were observed from the 0.2 M sucrose treatment, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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