Streptococcus mutans, one of a major causal agents of dental caries, is component of the dental plaque and produces various organic acids such as lactic acid as the end-product of glycolysis. In this study, we isolated S. mutans from Korean children with caries and also investigated the expression of protein under acid stress. S. mutans was identified at the species level using a 16S ribosomal DNA sequencing comparison method. The primer specificity was tested on eleven S. mutans strains isolated from Korean children with caries. The data showed that eleven strains are S. mutans. At treatment of concentration of 20 mM lactic acid in the mid-log phage, K-7 exhibited the highest maximum culture OD compared with those of other groups. As a consequence, we examined the expression of protein under 20 mM lactic acid stress using S. mutans K-7. The results of 2D gel electrophoresis by image analysis showed that thirteen proteins are up-regulated under the stress. Further study is being focused on amino acid analysis by mass spectrometry in order to analyze those spots.
Oh, Joung-Hwan;Kim, Hye-Jin;Kim, Tae-Il;Woo, Kyung Mi
BMB Reports
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제47권2호
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pp.110-114
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2014
Fibrin is a natural provisional matrix found in wound healing, while type I collagen is a major organic component of bone matrix. Despite the frequent use of fibrin and type I collagen in bone regenerative approaches, their comparative efficacies have not yet been evaluated. In the present study, we compared the effects of fibrin and collagen on the proliferation and differentiation of osteoblasts and protein adsorption. Compared to collagen, fibrin adsorbed approximately 6.7 times more serum fibronectin. Moreover, fibrin allowed the proliferation of larger MC3T3-E1 pre-osteoblasts, especially at a low cell density. Fibrin promoted osteoblast differentiation at higher levels than collagen, as confirmed by Runx2 expression and transcriptional activity, alkaline phosphatase activity, and calcium deposition. The results of the present study suggest that fibrin is superior to collagen in the support of bone regeneration.
A 2-D gel protein analysis of Lactobacillus reuteri ATCC 55739 produced spots corresponding to subunits of the pyruvate dehydrogenase complex, as identified by N-terminal protein sequencing. Oligonucleotide probes specific for the subunits of the pyruvate dehydrogenase complex were synthesized ,md used to screen a L. reuteri genomic library to clone the structural genes. Two positive clones were isolated and identified as having the same 2.2 kb insert. A pdhB encoding the $\beta$-subunit of El subunit (pyruvate dehydrogenase component) of the pyruvate dehydrogenase complex was located in the middle of the insert. Furthermore, a 5' truncated pdhA encoding the $\alpha$-subunit of the E1 subunit and a 3' truncated pdhC encoding the E2 subunit (dihydrolipoamide acetyltransferase) were also located upstream and downstream of the pdhB, respectively.
This study evaluated the composition two popular species of edible bamboo shoots in Korea (Phyllostachyspubescens and Sinoarundinarianigra) and the effect of their abundant dietary fiber on intestinal microorganisms in healthy young women. The ranges of total moisture, crude protein, crude lipid, crude ash, and dietary fiber content were 87.190.8, 2.943.5, 0.150.39, 0.411.05, and 4.206.15% (wet weight basis), respectively. Moisture and crude ash content increased after heat treatment; however, crude protein, crude lipid, and dietary fiber content were reduced after heating. The major minerals found in bamboo shoots were potassium, phosphorous, sulfur, magnesium, and calcium. In addition, glucose and fructose were abundant free sugars, while asparagine and tyrosine were the most abundant free amino acids. Approximately 70% of the total free fatty acids found in bamboo shoots were linoleic acid and linolenic acid. The ascorbic acid content was 6.60~17.56 mg/100 g (wet weight basis), and one phenolic compound, p-hydroxy benzoic acid, was 0.10.2% (wet weight basis) and detected by HPLC analysis. The intake of bamboo shoots for seven days significantly increased viable cell counts of Lactobacillus spp. and reduced viable cell counts of Bacteriodes spp. in feces (p<0.05). In our data, bamboo shoots may be useful in the food industry as high dietary fiber ingredients.
the purpose of this paper is to study on the proximate composition, mineral and saponin content in white sesame, black sesame, and perilla seed. For this purpose, we have compared six different materials: white-raw-sesame, white-roast-sesame, black-raw-sesame, black-roast-sesame, raw-perilla seed and roast perilla seed, and have come to the following results. The crude fat content was the highest in white-raw-sesame(55.3%). In all the six samples, the crude fat content in raw seeds was all higher than that in roast seeds. The crude protein content was the highest in the roast perilla seed(24.6%), and in the six samples, the crude protein content in roast seeds all higher than that in roast seeds. The total sugar content was found to be the highest in the roast perilla seed(8.29%). The reducing sugar content was higher in raw perilla seed(1.57%) than in other sample materials. The ash content was the highest in black raw-sesame(5.93%), and that percentage rates was the same as that of FAO and of Japan. Minerals like Cd. Mn. Cu. Na. Mg. Pb. and Ca. were found to be contained more in black sesame than in other sample materials. The minerals contained most in white sesame were Zn.(61.6ppm) and Fe(49.4ppm), and K was contained a little more in perilla seed than in the others. The sample materials which contain saponin most were white-roast-sesame(0.34%) and black-roast-sesame(029%).
소의 혈장으로부터 알부민을 순수 정제하였으며 순도는 면역 화학적 방법을 사용하여 확인하였다. 정제된 알부민에 maleate, iodoacetate, iodoacetamide 및 glutathione의 4가지 thiol 화합물을 각각 반응시켜 그 복합체를 9가지의 상이한 완충용액내에서 초산셀룰로우즈 전기영동한 결과 barbital buffer와 Na-acetate buffer를 제외한 다른 완충용액내에서 albumin-glutathione 복합체는 두 가지의 단백질로 분리되었으며 pH 4.8 citrate buffer 및 pH 4.8 succinate buffer내에서 albumin-iodoacetate 및 albumin-iodoacetamide 복합체는 두 가지의 단백질로 분리되었다. 전기영동상에 나타나는 알부민 분획에는 conformation이 서로 다른 두 가지 이상의 알부민 분자가 존재한다고 사료된다.
This letter presents a smart integrated microfluidic device which can be applied to actively immobilize proteins on demand. The active component in the device is a temperature-controllable microelectrode array with a smart polymer film, poly(N-isopropylacrylamide) (PNIPAAm) which can be thermally switched between hydrophilic and hydrophobic states. It is integrated into a micro hot diaphragm having an integrated micro heater and temperature sensors on a 2-micrometer-thick silicon oxide/silicon nitride/silicon oxide (O/N/O) template. Only 36 mW is required to heat the large template area of 2 mm${\times}$16 mm to $40^{\circ}C$ within 1 second. To relay the stimulus-response activity to the microelectrode surface, the interface is modified with a smart polymer. For a model biomolecular affinity test, an anti-6-(2, 4-dinitrophenyl) aminohexanoic acid (DNP) antibody protein immobilization on the microelectrodes is demonstrated by fluorescence patterns.
한국산 밀 품종들 중에서 장광의 것을 선정하여 단백질을 추출한 다음 이 단백질의 아미노산 조성과 gliadin 단백질의 정제로 주 gliadin 단백질을 분리하여 본 결과 1. Gliadin과 glutenin 단백질은 다같이 disc 전기이동상에 5개의 band를 나타내었다. 2. Gliadin과 glutenin 단백질은 다같이 glutamic acid의 함량이 가장 많았다. 3. Gliadin과 glutenin 단백질간에 아미노산 조성의 차이는 gliadin이 glutenin보다 alanine의 함량은 적었으나 proline의 함량은 많았다. 4. 주 gliadin 단백질은 gliadin 단백질을 Sephadex G-150과 A-25 coumn으로 정제하여 얻었다.
Hong, Young Gi;Roh, Seyun;Paik, Donggi;Jeong, Sangyun
Molecules and Cells
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제40권1호
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pp.73-81
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2017
The ${\gamma}$-secretase complex represents an evolutionarily conserved family of transmembrane aspartyl proteases that cleave numerous type-I membrane proteins, including the ${\beta}$-amyloid precursor protein (APP) and the receptor Notch. All known rare mutations in APP and the ${\gamma}$-secretase catalytic component, presenilin, which lead to increased amyloid ${\beta}$-peptide production, are responsible for early-onset familial Alzheimer's disease. ${\beta}$-amyloid protein precursor-like (APPL) is the Drosophila ortholog of human APP. Here, we created Notch- and APPL-based Drosophila reporter systems for in vivo monitoring of ${\gamma}$-secretase activity. Ectopic expression of the Notch- and APPL-based chimeric reporters in wings results in vein truncation phenotypes. Reporter-mediated vein truncation phenotypes are enhanced by the Notch gain-of-function allele and suppressed by RNAi-mediated knockdown of presenilin. Furthermore, we find that apoptosis partly contributes to the vein truncation phenotypes of the APPL-based reporter, but not to the vein truncation phenotypes of the Notch-based reporter. Taken together, these results suggest that both in vivo reporter systems provide a powerful genetic tool to identify genes that modulate ${\gamma}$-secretase activity and/or APPL metabolism.
Genomic instability, which occurs through both genetic mechanisms (underlying inheritable phenotypic variations caused by DNA sequence-dependent alterations, such as mutation, deletion, insertion, inversion, translocation, and chromosomal aneuploidy) and epigenomic aberrations (underlying inheritable phenotypic variations caused by DNA sequence-independent alterations caused by a change of chromatin structure, such as DNA methylation and histone modifications), is known to promote tumorigenesis and tumor progression. Mechanisms involve both genomic instability and epigenomic aberrations that lose or gain the function of genes that impinge on tumor suppression/prevention or oncogenesis. Growing evidence points to an epigenome-wide disruption that involves large-scale DNA hypomethylation but specific hyper-methylation of tumor suppressor genes, large blocks of aberrant histone modifications, and abnormal miRNA expression profile. Emerging molecular details regarding the modulation of these epigenetic events in cancer are used to illustrate the alterations of epigenetic molecules, and their consequent malfunctions could contribute to cancer biology. More recently, intriguing evidence supporting that genetic and epigenetic mechanisms are not separate events in cancer has been emerging; they intertwine and take advantage of each other during tumorigenesis. In addition, we discuss the collusion between epigenetics and genetics mediated by heterochromatin protein 1, a major component of heterochromatin, in order to maintain genome integrity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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