구기자(Lycium chinense Mill) 탄저병은 구기자 열매에 수침상의 흑색 병반을 형성하고 포자층을 형성한다. 일반농가 포장에서의 발병율은 $0.8\%\~23\%$(평균 $9.6\%$)의 이병과율을 보였다. 구기자 탄저병균은 Colletotrichum gloeosporioides Penz와 Colletotrichum dematium(Fr.) Grove의 2종으로 동정되었다. 구기자에 대한 병원성은 공시한 C. gloeosporioides와 C. dematium 모두 어린 잎이나 줄기에는 병원성이 없었고 열매에는 강한 병원성을 나타냈다. 성숙과에는 C. dematium Isolate I이 특히 병원성이 강하였고 미숙과에 대하여는 C. dematium Isolate II만이 약하게 나타났으나 10일정도 경과하면 병원성 정도의 구분이 어려웠다.
Effect of temperature, relative humidity (RH) and free water period on anthracnose development by Colletotrichum gloeosporioides was examined on red pepper fruits. Mycelial growth of C. gloeosporioides was best at 28$^{\circ}C$, but greatly retarded at 32$^{\circ}C$. Minimum inoculum density required for lesion development varied with isolates, but was mostly above 1.0$\times$105 conidia/ml. Optimum temperature for lesion development on fruits was 31$^{\circ}C$. Percentage of lesion development was decreased as incubation temperature decreased. similar trend of temperature response was observed for acervulus formation on the developed lesions. Acervuli were not developed on the lesion as low as at 19$^{\circ}C$. Lesion development and acervuli formation tended to increase as increasing RH, but were greatly inhibited at the RH lower than 88%. More than 2 hours of free water period after inoculation were required for lesion development. Lesion development was increased as free water period increased. This study indicates that anthracnose development by C. gloeosporioides favors the conditions of high temperature above 28$^{\circ}C$, high humidity above 90% RH, and requires free water period longer than 2 hours.
Colletotrichum contains many important pathogens which cause economically significant diseases of crops like pepper, strawberry, tomato and apple. Forty four isolates were collected to characterize the diversity of Colletotrichum causing apple anthracnose in various regions of Korea. They were analyzed by random amplified polymorphic DNA (RAPD), internal transcribed spacer (ITS) of rDNA and partial $\beta$-tubulin gene DNA sequence, and culture characteristics on PDA and PDA-Benomyl. From the results of molecular analyses, 31 strains belonged to Colletotrichum gloeosporioides, ribosomal DNA group (RG) 4 of Moriwaki et al. (2002), 8 strains belonged to C. acutatum, A2 group of Talhinhas et al. (2005) and 5 strains to C. acutatum, A3 group of Talhinhas et al. (2005). Most isolates of C. gloeosporioides RG4 grew faster on PDA than strains of C. acutatum, A2 and A3 groups and most RG4 strains were sensitive to Benomyl. However, a few strains of RG4 grew slower and were resistant to Benomyl. On the basis of molecular characteristics, apple isolates of C. acutatum were clearly differentiated from red pepper isolates of the species, but apple isolates of C. gloeosporioides were not.
고추 탄저병균 Colletotrichum gloeosporioides의 생장을 저해하는 물질을 생산하는 세균인 Bacillus subtilis의 각종 배양조건을 달리하여 최적 생산 조건을 조사하였다. 병원균 생장 저해물질 생산을 위한 배지의 초기 산도는 pH 7.0이 최적이였으며, 탄소원으로는 glucose를 첨가했을 경우 다른 탄소원에 비해 2배 이상 높은 활성을 보였다. 질소원으로는 유기 질소원일 경우 비교적 높은 병원균 생장저해활성을 보였으나, 무기 질소원인 ammonium sulfate에서 가장 높은 활성을 보였다. 여러 가지 배지를 사용하여 조사한 결과, LB(Luria Bertani) 배지의 배양액에서 가장 높은 활성이 나타났다.
C. gloeosporioides와 C. acutatum의 개체군 밀도분석을 위해 기존 ITS부위를 이용한 PCR방법에 사용한 caInt2와 cgint 프라이머에 형광을 표지하여 C. acutatum에 특이적인 fcaInt2와 C. gloeosporioides에 특이적인 vcgint의 두 probe를 제작하였다. 이 두개의 프라이머와 Unicof1, Unicor1 primer를 이용 real time PCR을 수행하였을 때 C. acutatum은 fcaInt2 probe에, C. gloeosporioides는 vcgint에 특이적인 형광증폭곡선을 나타냄에 따라 delta Rn 값을 비교함으로 두 종의 구분이 가능하였다.
국내 고추 재배지에서 고추탄저병균인 C. gloeosporioides에 대해 균사생장이나 포자발아 억제력이 우수한 균주를 선발하였다. 선발된 균주의 생리 생화학적특성과 MicroLog 방법을 이용하여 동정한 균주는 Paenibacillus sp. IUB225-08로 명명되었다. 항진균물질의 최적 생산을 위한 배양 조건은 pH 7.0, $25^{\circ}C$에서 60시간인 것으로 나타났다. Paenibacillus sp. IUB225-08를 배양한 액체배지에 부탄올을 첨가하여 분획한 물질과 시판 농약의 C. gloeosporioides에 대한 균사생장과 포자 발아억제 효과를 조사한 결과 부탄올 분획물이 시판 농약에 비해 고추탄저병균의 균사생장과 포자발아를 크게 억제하는 것으로 나타났다. 또한 고추열매와 고추종자에 C. gloeosporioides 포자와 부탄올로 분획한 물질을 동시에 접종한 결과 부탄올 분획물이 고추와 고추종자의 병 발생을 억제하는 것으로 나타났다. 따라서 본 연구를 통해 Paenibacillus sp. IUB225-08가 생산하는 항진균 물질은 고추탄저병의 생물적 방제제로 사용될 수 있는 잠재력이 있다고 판단되었다.
한국농업미생물자원센터(Korean Agricultural Culture Collection, KACC)에 보존되어 있는 Colletotrichum gloeosporioides 39 균주와 C. acutatum 5 균주를 ribosomal DNA-ITS와 $\beta$-tubulin 부분염기서열과 PDA와 Benomyl-PDA배지에서의 생장 특성에 의하여 재동정 하였다. 그 결과 13 균주가 Talhinhas 등의 C. acutatum A2 그룹으로, 5 균주가 C. acutatum A3 그룹으로, 1 균주가 C. acutatum A4 그룹으로, 18 균주가 Moriwaki 등의 C. gloeosporioides ribosomal DNA group(RG) 4로 2 균주가 C. gioeosporioides RG6로 2 균주가 c. boninense RG5로 2 균주는 C. coccodes RG2 그리고 1 균주는 c. dematium RG12로 재동정되었다. 이들 중에서 한국에서 분리된 31 균주는 12 균주가 C. acutatum A2 그룹으로, 1 균주가 C. acutatum A3 그룹으로, 14 균주가 C. gloeosporioides RG4 로 2 균주가 C. gloeosporioides RG6로 1 균주가 C. boninense RG5로 그리고 1 균주는 C. dematium RG12로 동정되었다. 더불어 C. acutatum/C. gloeosporioides의 분류적인 특징과 국내 주요 기주별 분포 등에 대하여 고찰하였다.
Ripe rot was frequently observed on fruits, leaves and stems of grape growing in eight locations in Korea from 2004 to 2006. All 30 isolates of Colletotrichum sp. were obtained from lesions of the ripe rot on grape plants. Out of the isolates, 19 isolates were identified as Colletotrichum acutatum and the others as Colletotrichum gloeosporioides based on morphological and cultural characteristics. Inter and intra specific variations of the Colletotrichum spp. isolates were investigated using RAPD and sequences of rDNA ITS and $\beta$-tubulin-2. Isolates of C. acutatum and C. gloeosporioides were distinctly differentiated by molecular analyses. Phylogenetic trees of ITS and$\beta$-tubulin-2 showed that Korean isolates of C. acutatum were clustered into groups A2 and A3 among the eight global groups. A2 included non-chromogenic isolates and A3 chromogenic ones. Both C. acutatum and C. gloeosporioides isolates were tested for pathogenicity to grape leaves. All isolates tested induced lesions on the leaves of grape by artificial inoculation. There was no difference in pathogenicity between C. acutatum and C. gloeosporioides isolates. This is the first report that C. acutatum except C. gloeosporioides causes grape ripe rot in Korea.
2007년 경상남도농업기술원 과수 포장에 재배중인 블루베리 과실에서 이상증상이 발생하였다. 병징은 성숙한 과실이 수침상으로 물러지고 부패되어지면서 낙과되어거나 미이라 상태로 남아 있으며 과실표면에 분홍색 포자퇴를 많이 형성하였다. 균총은 감자한천배지에서 회색이며 배지표면에 분홍색의 포자퇴를 많이 형성하였다. 분생포자의 모양은 단세포, 무색, 끝이 약간 무딘 원통형이며 크기는 $10{\sim}20{\times}3{\sim}5\;{\mu}m$이었다. 부착기는 갈색이고 곤봉형, 계란형이며 크기는 $6{\sim}18{\times}4{\sim}12\;{\mu}m$이었다. 균사생육 적온은 $25{\sim}30^{\circ}C$였다. 분리된 병원균으로 병원성을 검정한 결과, 자연 감염된 병징과 동일하였다. 이상의 결과를 가지고 본 병해를 Colletotrichum gloeosporioides에 의한 블루베리 탄저병으로 명명할 것을 제안한다.
The tulip tree ($Liriodendron$$chinense$) has been widely cultivated in Korea as a street or garden tree for its large flowers, which have a superficial resemblance to tulips. Occurrence of anthracnose disease on the leaves of tulip trees growing on the campus of Gyeongsang National University, Jinju, Korea, has been observed. Based on mycological characteristics, pathogenicity, and internal transcribed spacer sequence, the causal fungus was identified as $Colletotrichum$$gloeosporioides$. This is the first report on anthracnose disease caused by $C.$$gloeosporioides$ on tulip trees in Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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