Because Staphylococcus aureus (S. aureus) has variable number of short sequence repeat region in coagulase gene, it has been used to investigate the relatedness of S. aureus isolates. In this study, we isolated S. aureus strains from 20 dairy farms with bovine mastitis from September 2000 to August 2001. PCR-RFLP analysis of coagulase gene revealed 10 different patterns. Most of the S. aureus isolates showed only one coagulase gene RFLP pattern per farm. However, there were several S. aureus clones spreading between dairy farms. All the farms showed poor management conditions of milking machine and milker, indicating that managements for mastitis control program include use of proper milking matching, premilking sanitation, and segregation in the S. aureus infection herd. Our data suggest that PCR-RFLP analysis of coagulase gene might be applicable for the epidemiological investigations of S. aureus isolated from bovine mastitis cows.
In this study, the distribution of the mec regulator genes and the presence of the mutation in mecI gene and mec promoter region among 50 MRSA clinical isolates derived from a single university hospital in Korea were analyzed. Among 50 MRSA strains, 13 strains had a deletion of mecI gene, and 37 strains were found to have mutations in mecI gene or mecA promoter region corresponding to a presumptive operator of mecA, i.e., the binding site of the repressor protein. Furthermore, in order to track the evolution of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) distributed in Korea, we determined the MRSA clonotype by combined use of genetic organization patterns of mec regulator genes, ribotype, and coagulase type. As the result, 48 of 50 MRSA strains could be classified into four distinct clones. Clonotype I is characterized by the coagulase type 3, deletion of mecI gene, and ribotype 1 shared by NCTC10442, the first reported MRSA isolate in England (9 strains). Clonotype II is characterized by the coagulase type 4, C to T substitution at position 202 of mecI gene, and ribotypes 2, 3 and 4 shared by 85/3619 strain isolated in Austria (10 strains). Clonotype III is characterized by the coagulase type 2, mutations of mecA promoter region and/or mecI, and ribotypes 4, 5, and 6 shared by N315 strain isolated in Japan (25 strains). Clonotype IV is characterized by the coagulase type 4, deletion of mecI gene, and ribotype 7 (4 strains). The clonality of two strains could not be determined due to their undefined ribotype.
대부분의 식중독은 단체 급식으로부터 발생하는 경우가 많으며, 특히 위생상태와 연관되어 식중독을 야기 시키는 병인 물질 중 포도상 구균은 많은 부분을 차지하고 있다 따라서 본 연구에서는 서부경남지역의 5개 초등학교 급식시설에서 총 98개의 샘플 중 A 급식소의 식수, D 급식소의 손, E 급식소의 냉장고와 앞치마에서 4개의 포도상 구균을 분리하였다. 분리된 균주들은 1개의 메티실린 저항성 혈장응고 효소 음성 황색포도상구균(Methicilline Resistant Coagulase Negative Staphylococcus aureus; MRCPS)과 3개의 메치실린 민감성 혈장응고효소 양성 황색포도상구균 (Methicilline sensitive Coagulase positive Staphylococcus aureus; MSCPS)으로 구분되었다. 한편 포도상 구균은 내열성 내독소로서, 이 중 가장 문제가 되는 내독소 B(enterotoxin B)를 검색하기 위한 PCR을 실시한 결과, A 장소의 식수, D 장소의 손, E 장소의 냉장고와 앞치마에서 분리된 균주로부터 477bp의 생성물을 갖는 sob gene을 확인할 수 있었다. 이들 분리된 황색포도상구균에 대한 항생제 민감성 실험에서는 ampicillin과 penicillin에 대하여 전체적으로 저항성을 가졌으며, 특히 A 식수에서 분리된 균주는 옥사실린 저항성(oxacilline resistant)균주로 나타나 MRSA(methicilline resistant staphylococcus aureus)균주로 확인되었다.
인의학에서 메티실린 내성 포도상균주는 병원감염의 주요 원인균으로 보고되고 있지만 소동물에서 이에 대한 연구는 거의 없다. 본 연구에서는 2002년 8월부터 2003년 7월까지 개와 고양이에서 분리된 136개의 포도상구균 분리주 (coagulase 양성 87주, coagulase 음성 49주)에 대하여 항생제 감수성 검사와 이들 분리주에서 메티실린 내성 유전자인 mecA 분포상황을 조사하였다. 136개 분리주중 43주 (31.6%)가 mecA 유전자를 가지고 있었고, 유전자의 분포율은 균주에 따라 상당한 차이를 보였다. 43주의 mecA 양성균주 중 31주 (72.1%)가 oxacillin 내성을 보여 mecA 양성균주가 반드시 oxacillin 내성과 일치하는 것은 아님을 시사하였다. 그러나 mecA 양성균주일수록 oxacillin 내성율이 높았는데 S. intermedius의 71.4% (p<0.001), coagulase 음성균주의 경우 72.4%가 내성을 보였다 (p<0.001). 분리주의 94주(69%) 적어도 하나 이상의 항생제에 내성을 보였고 특히 31주(22.8%)는 4가지 이상의 항생제에 동시에 내성을 보였다. Penicillin 항생제에 내성율이 71.7%로 가장 높았다. 본 연구는 국내 소동물에서 mcA 양성균주가 존재하며, 이러한 균에 의해 유도된 감염증을 치료할 때 다제내성의 특성 때문에 항생제 선택의 폭이 매우 제한될 수 있음을 시사한다.
부산시 동아대학병원으로 내원한 83명의 환자 가건물로부터 methcillin 내성 Stphylococcus aureus(MRSA) 88 균주를 분리하고 응고 효소의 유형별 분석과 다약제 내성의 상호 관계를 연구하였다. 농(64.7%), 객담(26.2%), 기타 혈액, 장액 및 뇨로부터 균주가 분리되었고 mec A 유전자에 특이적인 primer 5'-AAAATCGATGGTAAAGGTT-GGC-3'와 5'-AGTTCTGCAGTACCGGATTTGC3'를 사용하여 PCR을 한결과 86균주에서 mec 유전자가 확인되었다. 응고효소형은 제 III형이 50%m IV형이 12.5%, III형이 6.8%, I, VII, VIII형이 4.5%로 제 II형이 가장 많았으며 제 V형은 전혀 분리되지 않았다. 응고효소형의 병동별 분포는 일반외과에서 제 II형이, 이비인후과 외래에서는 제 IV형이 우점종으로 분리되었다. 항균제 감수성 시험결과, vancomycin과 teicoplanin에서 전균주가 감수성을 나타내었었고 penionillin, cephalothin, erythromycin, gentamycin, imipenem, clindamycin, ciprofloxacin과 oxacillin등 8가지의 항균제에 대하여 동시내성을 나타낸 균주가 71주 (81%)였다. 항균제 내성과 응고효소형과의 상관관계는 없었다.
젓갈로부터 분리된 ampicillin 감수성, coagulase 음성 Staphylococcus 속 17 균주의 항생물질내성 및 위해성을 평가하였다. 15 균주는 한 종류 이상의 항생물질에 대한 내성을 나타내었고, penicillin G 내성 균주가 가장 높은 빈도로 검출되었다. PCR 증폭에 의한 항생물질내성 유전자 존재 확인 결과, trimethoprim 내성 관련 dfrA 유전자와 tetracycline 내성 관련 tetK 유전자를 각각 보유한 두 균주가 확인되었다. α 형 용혈활성은 검출되지 않았지만, 다섯 균주가 δ 형의 용혈을 나타내었고, 그 중 두 균주는 β 형 용혈활성을 나타냈으며, 12 균주가 biofilm을 형성하였다. 본 실험에서 수행한 모든 안전성 평가 결과는 균주 특이적으로 나타났다.
84세 여성이 항문까지 욕창이 번져 응급실에 내원하였다. 그녀는 근처의 요양기관에서 전원되었고, 입원시 소변 도뇨관을 달고 있었으며 열은 없었다. 그람염색에서 많은 수의 포도상구균과 >25의 호중구 (${\times}1000$배 렌즈)가 관찰되었다. 24시간 배양한 혈액한천배지에서 용혈이 없는 점액성의 집락이 관찰되었으며 배양 48시간에는 점액성이 더욱 확대되었다. India ink로 염색하여 협막의 모습을 관찰하였으며, 카타라제 양성, 라텍스법 혈액응고효소 음성, 시험관법 혈액응고효소 음성소견을 보였다. Vitek-2와 질량분석기인 Vitek MS V-3 IVD에서 S. aureus로 나타났으며, 16S rRNA 유전자 염기서열 분석 및 Multilocus sequencing typing (MLST)에서 S. aureus로 표준균주인 ATCC 29213과 99.9% 일치를 보였다. 본 증례는 용혈성이 없고, 점액성이 강하며, 라텍스법 혈액응고효소 음성, 시험관법 혈액응고효소 음성소견을 보이는 MRSA를 동정하여 이를 보고한다.
Bovine mastitis (BM) has resulted in enormous economic loss in the dairy industry and coagulase-negative staphylococci (CNS) have caused subclinical BM. Although VITEK 2 GP ID card (VITEK 2) has been used for CNS identification, the probability of identification varies. The rpoB sequence typing (RSTing) method has been used for molecular diagnosis and epidemiology of bacterial infections. In this study, we undertook RSTing of CNS and compared the results with those of VITEK2 and 16S rRNA gene sequencing. As compared VITEK2, the molecular-based methods were more reliable for species identification; moreover, RSTing provided more molecular epidemiological information than that from 16S rRNA gene sequencing.
Purpose : In the treatment of MRSA infection, rapid detection of MRSA is extremely important. The mecA gene codes the new drug resistant polypeptides called PBP2' which mediates the clinically relevant resistance to all beta-lactam antibiotics. The identical mecA gene has been found in coagulase-negative staphylococcus with the methicillin-resistant phenotype. On the other hand, the femA gene was absent from coagulase negative staphylococcus strains with the methicillin resistant phenotype. This study is aimed at early detection and definite diagnosis of MRSA. Methods : A total of 24 MRSA strains were studied. All strains were tested for antimicrobial susceptibility and purified DNA. We amplified both mecA and femA genes by PCR in 24 strains. Results : In MRSA all the 16 strains (100%) carried femA gene and 11 strains (68.7%) carried mecA gene. In contrast, in methicillin sensitive staphylococcus all the 8 strains (100%) carried femA and only 3 strains (37.5%) were detected mecA. Conclusions : As results, there are difference in the phenotype and genotype of methicillin resistance by PCR of mecA and femA. Such disparities between methicillin resistance and the presence of mecA gene suggest the presence of control gene of the mecA.
Methicillin-resistant coagulase-negative staphylococci (MRCNS) were isolated from the respiratory sites of chickens in 4 farms and slaughter house located in Chungnam provinces. Isolation of coagulase-negative staphylococci (CNS) was positive for 61 (26.6%) of the 229 chickens tested, and isolation of MRCNS was positive for 17 (27.9%) of the isolated CNS. A total of 17 MRCNS isolates were selected and subjected to identification. Of the 17 MRCNS isolates selected, 6 were identified as Staphylococcus cohnii, 2 as S. saprophyticus, 3 as S. simulans, 3 as S. lentus, 2 as S. carnosus, and 1 as S. xylosus. The MRCNS isolates were resistant to many beta-lactam antibiotics, and some isolates were also resistant to macrolide and aminoglycoside antibiotics. The mecA gene was detected in some isolates of each MRCNS strains. The mecA-positive isolates were classified into five staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec). SCCmec types I to IV were detected in isolates from chickens.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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