Sangsub Han;Lee, Sanghun;Mengjun Liu;Byeongjin Cha
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.136.2-137
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2003
In order to diagnose and differentiate jujube witches' broom (JWB) phytoplasma rapidly, oligonucleotide primer pair, 16Sr(V) F/R, for polymerase chain reactions (PCRs) was designed on the basis of 165 rRNA sequences of JWB phytoplasma. The PCR employing phytoplasma universal primer pair P1/P7 consistently amplified DNA in all tested phytoplasma isolates. But no phytoplasma DNA was detected in healthy jujube seedlings. The nested PCR, the primer pair 16S(V) F/R, about 460 bp fragment, amplified DNA in all tested JWB and related phytoplasmas including LiWB phytoplasma of the 165 rRNA group V, but no DNA amplification was detected from other phytoplasma strains such as group 16SrI (Aster yellows) and group 16SrⅩII (Stolbur group) phytoplasmas in which mulberry dwarf phytoplasma and chrysanthemum witches broom phytoplasma are belonged to, respectively The same results were obtained from both Korean- and Chinese-isolates of JWB. Nested-PCR using phytoplasma universal primer pair P1/P7 and 16S rRNA group V specific primer pair 16S(V) F/R could detect group V phytoplasma rapidly and easily, in particular JWB phytoplasma.
The relative density of phytoplasmas in witches'broom (WB)-infected jujube trees was investigated using compatitive polymerase chain reaction (PCR). During dormant and defoliating seasons, the densities of phytoplasmas were about the same in roots and twigs. In early growing season, the density showed the highest rates in roots, then in twigs and in petioles. however, the density was highest in petioles and the lowest in roots during actively growing season. Throughout the year, root samples did not show any serious fluctuation compared with that of t2wigs and petioles. Density was lowest during actively growing season in root samples. In contrast, petiole sample densities varied to a great extent depending on the season, very high during actively growing season, but very low during the early growing season, In twig samples, the densities were very high and almost the same in both defoliating and dormant seasons. Among the parts of the trees, phytoplsma density was the most stable in root samples throughout the year. The highest densities of phytoplasmas were about the same in all tree parts. These results suggest that the phytoplasmas may overwinter not only in roots but also in twigs, and that multiplication rate of phytoplsma becomes very high right after the early growing season.
Jujube trees infected with phytoplasma exhibit symptoms of typical witches' broom, such as yellowing, abnormally small leaves, short internodes and proliferation of shoots. A 1.2 kb fragment of the 16S rDNA from jujube phytoplasma was generated by R16F2n/R16R2 primer pair from earlier amplified P1/P7 PCR products of cloned jujube witches' broom phytoplasmas. Enzymatic restriction fragment length polymorphism (RFLP) and sequence analysis of 16S rDNA revealed that the jujube tree was infected with 16S rDNA I and V groups of phytoplasmas. Extensive comparative analyses of restriction enzyme profiles from Alu I, Hha I, Msp I, and Rsa I clearly classified the two into different phytoplasma groups. The phylogenie analyses based on 16S rDNA showed that the similarity of the two different clones was 87.5%. This is the first report of a mixed phytoplasmal infection in a single jujube tree.
Seo, Sang-Tae;Kim, Kyung-Hee;Shin, Chang-Hoon;Lee, Sang-Hyun;Kim, Young-Mal;Park, Jong-Han;Shin, Sang-Chul
Research in Plant Disease
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v.15
no.1
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pp.13-16
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2009
In April 2008, cherry (Prunus yedoensis Matsumura) in Jeju exhibited severe disease of branches forming numerous twigs. Five isolates from diseased leaves were identified as Taphrina wiesneri on the basis of biological and genetic characteristics. Twenty one commercial fungicides were tested for control of the disease in vitro. Of the 21 fungicides, triazole compounds (difenoconazole, propiconazole and tebuconazole) showed relatively good antimicrobial activities. Results from the planta bioassays indicated that triazole compounds reduced the witches' broom disease showing control value $25.7{\sim}52.8%$ compared with the nontreated controls.
Mycoplasma-like organisms (MLO) were identified from three plants. The disease symptoms show stunting, yellowing and witche's broom on Cnidium officinale Makino collected from Ulreung Island, Bupleurum falcatum L. collected from Jangsu, and Plantago asiatica L. collected from Daegwanreung. The particles of MLO were observed in the phloem tissues by a Hitachi Hu-11E electron microscope. C. officinale infected with MLO was frequently observed in Ulreung Island.
To evaluate the phylogenetic and taxonomic status of the phytoplasmas associated with water dropwort (Oenanthe javanica DC) disease in Korea and Japan, their 16S rDNA was analyzed. DNAs extracted from water dropworts collected in Korea (Kyongnam province) and Japan (Chiba prefecture) affected by witches' broom and yellows were subjected to PCR using phytoplasma-specific primers, which amplified a 1.4-kbp fragment that included the 16S rDNA. Phytoplasmas were characterized by RFLP analysis using AluI, HaeIII, HhaI, KpnI, MseI, and RsaI restriction enzymes and by sequence analysis of the PCR products. The mater dropwort witches'broom (WDWB) and water dropwort yellows (WDY) 16S rDNA sequences were identical and closely related to onion yellows (OY, 99.9% identity), which belong to the aster yellows (AY) 16S-subgroup. However, the KpnI RFLP analyses clearly distinguished the WDY and WDWB phytoplasmas from the OY phytoplasma. The phylogenetic analysis based on 16S rDNA showed that WDWE and WDY phytoplasmas are members of a relatively homogeneous group that evolved from a common ancestor.
A Witches'-broom disease of jujube (Zizyphus jujuba) with which mycoplasma-like bodies are associated is wide spread in South Korea. Jujube trees with witches'-broom symptoms were selected from 15-20 year old planting and treated with solution of oxytetracycline hydrochloride (Terramycin). Treatments were 1) one injection on April; 2) one postharvest injection on October; 3) two injections (April and July); 4) three injections (April, June and August) and 5) an untreated control. Each injection consisted of 500ml of 1,000 p.p.m. solution of oxytetracycline HCl transfused into affected trees from plastic reservoir through plastic tubes connected to 3 small holes drilled in the basal part of the tree trunks. Complete remission of witches'-broom symptoms was accomplished within one growing season by one spring (April) injection. One postharvest (Oct.) injection also prevented the symptoms in the following growing season. Two and three injection treatments prevented the symptoms for at least two growing seasons and restored previously severely diseased trees to normal or near normal conditions. Remission of symptoms was found only above the injection site while current season witches'-brooms developed from areas below the injection site and from untreated main scaffolds. The results of this experiment demonstrates that transfusion treatment with oxytetracyclin HCl is feasible for the practical control of witches'-broom of jujube.
Curling sweeping is one of important motion to control the position of the curling stone, and sweeping speed and applied force to the broom pad are major research subjects. In this study, a device was developed to measure the force applied to the curling broom pad in curling sweeping motion, and two load cells were mounted between the broom pad and pad holder. Analog signals generated from the load cells were sampled about 300 times per second using a micro controller, and then converted to 10-bit digital signals. Calibration of the load cell and set up of regression equations to convert the measured electrical signals into mass (force) was done by three M1 class weights, and the developed system was designed as wearable device to minimize increasing of total weight of the broom. Same force was applied to the developed system and a force plate that was using as a reference force measurement system in field of sports, and the difference between the measured values were showed about $0.909{\pm}1.375N$(mean and standard deviation). The developed system could be applied other kinds of study which required force measurement function similar to sweeping motion.
Phytoplasmas have been associated with more than 46 plant species in Korea. Several vegetables, ornamentals, fruit trees and other crop species are affected by phytoplasma diseases. Six 16Sr groups of phytoplasmas have been identified and these phytoplasmas are associated with 63 phytoplasma diseases. Aster yellows phytoplasmas are the most prevalent group and has been associated with more than 25 diseases in Korea. Jujube witches' broom, paulownia witches' broom and mulberry dwarf diseases cause economic losses to host trees throughout the country. So far, Korean phytoplasmas belong to six species of 'Candidatus Phytoplasma'; 'Ca. P. asteris', 'Ca. P. pruni$^*$', 'Ca. P. ziziphi', 'Ca. P. trifolii', 'Ca. P. solani$^*$' and 'Ca. P. castaneae'. The diseases are distributed throughout the country and most of them were observed in Gyeongbuk and Chonbuk provinces. At least four insect vectors; Cyrtopeltis tenuis, Hishimonus sellatus, Macrosteles striifrons and Ophiola flavopicta have been identified for phytoplasma transmission.
Askari, N.;Jouzani, Gh. Salehi;Mousivand, M.;Nazari, A. Hagh;Abbasalizadeh, S.;Soheilivand, S.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.21
no.1
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pp.81-88
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2011
The anti-phytoplasma activities of surfactin (derived from Iranian native Bacillus subtilis isolates) and tetracycline towards Candidatus "Phytoplasma aurantifolia", the agent of lime Witches' broom disease, were investigated. HPLC was used to quantify the surfactin production in four previously characterized native surfactin-producing strains, and the one producing the highest amount of surfactin (about 1,500 mg/l) was selected and cultivated following optimized production and extraction protocols. Different combinations of purified surfactin and commercial tetracycline were injected into artificially phytoplasmainfected Mexican lime seedlings using a syringe injection system. An absolute quantitative real-time PCR system was developed to monitor the phytoplasma population shifts in the lime phloem during 3 months following the injections. The results revealed that the injections of surfactin or tetracycline had a significant inhibitory effect on Candidatus "P. aurantifolia". However, the combined treatment with both surfactin and tetracycline (1:1) resulted in the highest inhibition due to a synergic effect, which suppressed the phytoplasma population from about $2{\times}10^5$ to less than 10 phytoplasma units/g plant tissue.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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