In anti-cancer therapies, radiotherapy and chemotherapy show a superior inhibition effect on cancer cell growth, but those are very toxic to normal tissues and organs. Particularly, drugs for neutropenia, one of chemotherapy agents, which suppress the function of bone marrow, are needed to be controlled in terms of their dosage and therapy period because of their side effect. Phellinus linteus polysaccharide (PL) has been reported to increase the number of splenocytes and bone marrow cells. PL has been shown to decrease the side effects of cyclophosphamide (CYC) treatment to the cancer patients. PL showed no effects in semisolid clonogenic assay, suggesting that PL doesn't contain substantial compounds to substitute for colony stimulating factors (CSFs). On the other hand, PL increased the expression of SCF, IL-3, GM-CSF, TPO genes. These results indicate that PL may promote the growth and proliferation of splenocytes and bone marrow cells through indirect or CSFs-dependent pathway, which may lead to a hematopoiesis.
Kim, Tae-Gon;Cheon, Min-Woo;Park, Yong-Pil;Kim, Seong-Hwan;Song, Chang-Hun;Kim, Young-Su
Proceedings of the Korean Institute of Electrical and Electronic Material Engineers Conference
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2006.11a
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pp.349-350
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2006
In this module, RED Light Emitting Diode was employed to replace for Low level He-Ne laser for medical applications Each experiment was performed to irradiation group and non-irradiation group for both Dog bone marrow and Rat tissue cells. MTT assay method was chosen to verify the cell increase of two groups and the effect of irradiation on cell proliferation was examined by measuring 590nm transmittance of ELISA reader. As a result, the cell increase of 37% on Dog bone marrow, 23% on Rat tissue cells was verified m irradiation group as compared to non-irradiation group. The fact that specific wavelength irradiation has an effect on cell vitality and proliferation is known through this study.
Purpose: The purpose of this study was to determine whether metformin (MF) could alleviate the expresssion of reactive oxygen species (ROS) and improve the osteogenic ability of bone marrow mesenchymal stem cells derived from diabetic rats (drBMSCs) in vitro, and to evaluate the effect of MF on the ectopic osteogenesis of drBMSCs in a nude mouse model in vivo. Methods: BMSCs were extracted from normal and diabetic rats. In vitro, a cell viability assay (Cell Counting Kit-8), tests of alkaline phosphatase (ALP) activity, and western blot analysis were first used to determine the cell proliferation and osteogenic differentiation of drBMSCs that were subjected to treatment with different concentrations of MF (0, 50, 100, 200, 500 µM). The cells were then divided into 5 groups: (1) normal rat BMSCs (the BMSCs derived from normal rats group), (2) the drBMSCs group, (3) the drBMSCs + Mito-TEMPO (10 µM, ROS scavenger) group, (4) the drBMSCs + MF (200 µM) group, and (5) the drBMSCs + MF (200 µM) + H2O2 (50 µM, ROS activator) group. Intracellular ROS detection, a senescence-associated β-galactosidase assay, ALP staining, alizarin red staining, western blotting, and immunofluorescence assays were performed to determine the effects of MF on oxidative stress and osteogenic differentiation in drBMSCs. In vivo, the effect of MF on the ectopic osteogenesis of drBMSCs was evaluated in a nude mouse model. Results: MF effectively reduced ROS levels in drBMSCs. The cell proliferation, ALP activity, mineral deposition, and osteogenic-related protein expression of drBMSCs were demonstrably higher in the MF-treated group than in the non-MF-treated group. H2O2 inhibited the effects of MF. In addition, ectopic osteogenesis was significantly increased in drBMSCs treated with MF. Conclusions: MF promoted the proliferation and osteogenic differentiation of drBMSCs by inhibiting the oxidative stress induced by diabetes and enhenced the ectopic bone formation of drBMSCs in nude mice.
Purpose: The aim of this study was to investigate the immunomodulatory effects of canine periodontal ligament stem cells on allogenic and xenogenic immune cells in vitro. Methods: Mixed cell cultures consisting of canine stem cells (periodontal ligament stem cells and bone marrow stem cells) and allogenic canine/xenogenic human peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were established following the addition of phytohemagglutinin. The proliferation of PBMCs was evaluated using the MTS assay. The cell division of PBMCs was analyzed using the CFSE assay. The apoptosis of PBMCs was assessed using the trypan blue uptake method. Results: Periodontal ligament stem cells and bone marrow stem cells inhibited the proliferation of allogenic and xenogenic PBMCs. Both periodontal ligament stem cells and bone marrow stem cells suppressed the cell division of PBMCs despite the existence of a mitogen. No significant differences in the percentages of apoptotic PBMCs were found among the groups. Conclusions: Canine periodontal ligament stem cells have an immunomodulatory effect on allogenic and xenogenic PBMCs. This effect is not a product of apoptosis of PBMCs but is caused by the inhibition of cell division of PBMCs.
Nacre seashell is a natural osteoinductive biomaterial with strong effects on osteoprogenitors, osteoblasts, and osteoclasts during bone tissue formation and morphogenesis. Although nacre has shown, in one study, to induce bridging of new bone across large non-union bone defects in 8 individual human patients, there have been no succeeding human surgical studies to confirm this outstanding potency. But the molecular mechanisms associated with nacre osteoinduction and the influence on bone marrow-derived mesenchymal stem cells (BMSC's), skeletal stem cells or bone marrow stromal cells remain elusive. In this study we highlight the phenotypic and biochemical effects of Pinctada maxima nacre chips and the global nacre soluble protein matrix (SPM) on primary human bone marrow-derived stromal cells (hBMSCs) in vitro. In static co-culture with nacre chips, the hBMSCs secreted Alkaline phosphatase (ALP) at levels that exceeded bone morphogenetic protein (rhBMP-2) treatment. Concentrated preparation of SPM applied to Stro-1 selected hBMSC's led to rapid ALP secretions, at concentrations exceeding the untreated controls even in osteogenic conditions. Within 21 days the same population of Stro-1 selected hBMSCs proliferated and secreted collagens I-IV, indicating the premature onset of an osteoblast phenotype. The same SPM was found to promote unselected hBMSC differentiation with osteocalcin detected at 7 days, and proliferation increased at 7 days in a dose-dependent manner. In conclusion, nacre particles and nacre SPM induced the early stages of human bone cell differentiation, indicating that they may be promising soluble factors with osteoinductive capacity in primary human bone cell progenitors such as, hBMSC's.
Journal of the Korean Institute of Electrical and Electronic Material Engineers
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v.20
no.1
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pp.92-97
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2007
This paper performed the basic study for developing the Photodynamic Therapy Equipment for medical treatment. We developed the equipment palpating cell proliferation using a high brightness LED. This equipment was fabricated using a micro-controller and a high brightness LED, and designed to enable us to control light irradiation time, intensity, frequency and so on. Especially, to control the light irradiation frequency, FPGA was used, and to control the change of output value, TLC5941 was used. Control stage is divided into 30 levels by program. Consequently, the current value could be controlled by the change of level in Continue Wave(CW) and Pulse Width Modulation(PWM), and the output of a high brightness LED could be controlled stage by stage. And then, each experiment was performed to irradiation group and non-irradiation group for both Rat bone marrow and Rat tissue cells. MTT assay method was chosen to verify the cell increase of two groups and the effect of irradiation on cell proliferation was examined by measuring 590 nm transmittance of ELISA reader. As a result, the cell increase of Rat bone marrow and tissue cells was verified in irradiation group as compared to non-irradiation group. The fact that specific wavelength irradiation has an effect on cell vitality and proliferation is known through this study.
Objectives: This study was designed to investigate intestinal immune system activation and antimetastatic effect of Ojeok-san on cancer cells by oral administration. Methods: Cell viability of Ojeok-san was tested with colon 26-M3.1 carcinoma cells and Peyer's patch cells in vitro. Antimetastatic experiments were conducted in vivo mouse model by using colon 26-M3.1 carcinoma cell. To observe immunomodulating effects of Ojeok-san on Peyer's patch cells, we measured interleukin (IL)-4, GM-CSF. In addition to observing effects of Ojeok-san on hematopoiesis, we measured proliferation of bone marrow cells mediated by Peyer's patch cells in vitro. IgA induction activated in serum and intestinal content was measured to observe the effect of orally administered Ojeok-san on mucosal immune system. After administering Ovalbumin (OVA) with Ojeok-san, Proliferation of Peyer's patch cell was measured to investigate gut immunostimulatory effect. Results: in vitro cytotoxicity analysis, the inhibitory concentration $(IC)_{50}$ of the colon 26-M3.1 carcinoma cell was $890{\mu}g/ml$. $IC_{50}$ of the Peyer's patch cells with LPS was $990{\mu}g/ml$. We found that orally administered Ojeok-san significantly inhibited tumor metastasis in vivo. In addition, the amounts of IL-4 and GM-CSF in the culture supernatant of Peyer's patch cells were significantly increased compared to the control group. The proliferation of bone marrow cell was significantly up-regulated with Ojeok-san. These results indicate that oral administration of Ojeok-san enhances the secretion of hematopoietic growth factors such as GM-CSF and IL-4 from Peyer's patch cells, and these cytokines also act on modulator of bone marrow cell proliferation. After orally administering Ovalbumin (OVA) with Ojeok-san, IgA induction and Proliferation of peyer's patch cell was up-regulated with Ojeok-san. These results means orally administered Ojeok-san activates intestinal immune system and has an inhibitory effect on tumor metastasis. Conclusions: Orally administered Ojeok-san appears to have considerable activity on the anti-metastasis by activation of immune system.
Kim, Jin-Hwan;Hwang, Deok-Sang;Lee, Jin-Moo;Lee, Chang-Hoon;Lee, Kyung-Sub;Jang, Jun-Bok
The Journal of Korean Obstetrics and Gynecology
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v.27
no.2
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pp.46-58
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2014
Objectives: This study was designed to investigate intestinal immune system activation and anti-metastatic effect on cancer cells by orally administered extracts of Boyanghwano-tang. Methods: To observe immunomodulating effects of Boyanghwano-tang on Peyer's patch cells, we measured cytokines GM-CSF, IL-4. In addition to observing effects of Boyanghwano-tang on hematopoiesis, we measured proliferation of bone marrow cells mediated by Peyer's patch cells in vitro. IgA induction activated in intestinal content and serum was measured to observe the effect of orally administered Boyanghwano-tang on mucosal immune system. After administering ovalbumin (OVA) with Boyanghwano-tang, Proliferation of Peyer's patch cell was measured to investigate gut immunostimulatory effect. Anti-metastatic experiments were conducted in vivo mouse model by using colon 26-M3.1 carcinoma cell. Results: The amounts of GM-CSF and IL-4 in the culture supernatant of Peyer's patch cells were significantly increased compared to the control group. The proliferation of bone marrow cell was significantly up-regualted with Boyanghwano-tang. These results indicate that oral administration of Boyanghwano-tang enhances the secretion of hematopoietic growth factors such as GM-CSF and IL-4 from Peyer's patch cells, and these cytokines also act on modulator of bone marrow cell proliferation. After orally administering OVA with Boyanghwano-tang, IgA induction and Proliferation of peyer's patch cell was up-regulated with Boyanghwano-tang. These results means orally administered Boyanghwano-tang activates intestinal immune system and has an inhibitory effect on tumor metastasis. In addition, We found that orally administered Boyanghwano-tang significantly inhibited tumor metastasis in vivo. Conclusions: Orally administered Boyanghwano-tang appears to have considerable activity on the anti-metastasis by activation of immune system.
Na, Yi Rang;Jung, Daun;Gu, Gyo Jeong;Seok, Seung Hyeok
Molecules and Cells
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v.39
no.10
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pp.734-741
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2016
Granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) has a role in inducing emergency hematopoiesis upon exposure to inflammatory stimuli. Although GM-CSF generated murine bone marrow derived cells have been widely used as macrophages or dendritic cells in research, the exact characteristics of each cell population have not yet been defined. Here we discriminated GM-CSF grown bone marrow derived macrophages (GM-BMMs) from dendritic cells (GM-BMDCs) in several criteria. After C57BL/6J mice bone marrow cell culture for 7 days with GM-CSF supplementation, two main populations were observed in the attached cells based on MHCII and F4/80 marker expressions. GM-BMMs had $MHCII^{low}F4/80^{high}$ as well as $CD11c^+CD11b^{high}CD80^-CD64^+MerTK^+$ phenotypes. In contrast, GM-BMDCs had $MHCII^{high}F4/80^{low}$ and $CD11c^{high}CD8{\alpha}^-CD11b^+CD80^+CD64^-MerTK^{low}$ phenotypes. Interestingly, the GM-BMM population increased but GM-BMDCs decreased in a GM-CSF dose-dependent manner. Functionally, GM-BMMs showed extremely high phagocytic abilities and produced higher IL-10 upon LPS stimulation. GM-BMDCs, however, could not phagocytose as well, but were efficient at producing $TNF{\alpha}$, $IL-1{\beta}$, IL-12p70 and IL-6 as well as inducing T cell proliferation. Finally, whole transcriptome analysis revealed that GM-BMMs and GM-BMDCs are overlap with in vivo resident macrophages and dendritic cells, respectively. Taken together, our study shows the heterogeneicity of GM-CSF derived cell populations, and specifically characterizes GM-CSF derived macrophages compared to dendritic cells.
Of hot-water extracts prepared from 10 herbal components of Sip-Jeon-Dae-Bo-Tang, Atractylodes lancea DC. (ALR) and Panax ginseng C.A. Meyer (PG) showed the most potent bone marrow cell proliferation activity through intestinal immune system whereas other extracts did not have the activity except for Astragalus membranacues Bunge (ASR) and Angelica acutiloba Kitagawa (AR) having low activity. Especially, ALR had the potent activity irrespective of classes of ALR, a place of production and the condition of breeding. In addition, we found that hot-water extract from Atractylodes lancea DC rhizomes (ALR-0) contributed mainly to Peyer's patch cells mediated-hematopoietic response of Sip-Jeon-Dae-Bo-Tang. ALR-0 was further fractionated into MeOH-soluble fraction (ALR-1), MeOH-insoluble and EtOH-soluble fraction (ALR-2), and the crude polysaccharide fraction (ALR-3). Among these fractions, only ALR-3 showed potent stimulating activity for proliferation of bone marrow cells mediated by Peyer's patch cells, dose-dependently. In treatments of ALR-3 with $NaIO_4,\;NaClO_2$ and pronase, all significantly reduced the intestinal immune system modulating activity of ALR-3, and the activity of ALR-3 was much affected by $NaIO_4$ oxidation particularly. These results reveal that macromolecules, such as polysaccharide, rather than low-molecular-weight substances, are the potent intestinal immune system modulating compound of ALR.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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