• 제목/요약/키워드: bacterial reverse mutation test

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The First Report to Evaluate Safety of Cyanobacterium Leptolyngbya sp. KIOST-1 for Use as a Food Ingredient: Oral Acute Toxicity and Genotoxicity Study

  • Lee, Youngdeuk;Kim, Taeho;Lee, Won-Kyu;Ryu, Yong-Kyun;Kim, Ji Hyung;Jeong, Younsik;Park, Areumi;Lee, Yeon-Ji;Oh, Chulhong;Kang, Do-Hyung
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제31권2호
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    • pp.290-297
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    • 2021
  • Leptolyngbya sp. KIOST-1 (LK1) is a newly isolated cyanobacterium that shows no obvious cytotoxicity and contains high protein content for both human and animal diets. However, only limited information is available on its toxic effects. The purpose of this study was to validate the safety of LK1 powder. Following Organisation for Economic Co-operation and Development (OECD) guidelines, a single-dose oral toxicity test in Sprague Dawley rats was performed. Genotoxicity was assessed using a bacterial reverse mutation test with Salmonella typhimurium (strains TA98, TA100, TA1535, and TA1537) and Escherichia coli WP2 uvrA, an in vitro mammalian chromosome aberration test using Chinese hamster lung cells, and an in vivo mammalian erythrocyte micronucleus test using Hsd:ICR (CD-1) SPF mouse bone marrow. After LK1 administration (2,500 mg/kg), there were no LK1-related body weight changes or necropsy findings. The reverse mutation test showed no increased reverse mutation upon exposure to 5,000 ㎍/plate of the LK1 powder, the maximum tested amount. The chromosome aberration test and micronucleus assay demonstrated no chromosomal abnormalities and genotoxicity, respectively, in the presence of the LK1 powder. The absence of physiological findings and genetic abnormalities suggests that LK1 powder is appropriate as a candidate biomass to be used as a safe food ingredient.

Acriflavine과 Guanosine 복합체(AG60)의 유전독성시험 (Genotoxicity Studies of the Complex of Acriflavine and Guanosine)

  • 정영신;홍은경;김상건;안의태;이경영;강종구
    • 한국환경성돌연변이발암원학회지
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    • 제22권2호
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    • pp.106-111
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    • 2002
  • AG6O, the complex of acriflavine and guanosine, has been shown to possess the synergistic antitumorigenic activity in the previous paper (J. Pharm. Pharmacol. 1997, 49:216). In this study, we have investigated the genotoxic properties of AG60 using in vitro and in vivo system such as Ames bacterial reversion test, chromosomal aberration assay and micronucleus assay. In Ames reverse mutation test, AG60 treatment at the dose range up to 250 $\mu\textrm{g}$/plate caused the dose-independent random induction of the mutagenic colony formation in S. typhimurium TA98, TA100, TA1537, and E. coli WP2uvrA, while any mutagenic effect of AG60 wasn't observed in S. typhimurium TA1535. Any significant chromosomal aberration wasn't observed in chinese hamster lung (CHL) fibroblast cells incubated with PBS or AG60 at the concentrations of 2.5, 5, 10 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ for 24 hours without but even with 59 metabolic activation system for 6 hours. In vivo ICR mice, the intramuscular injection of AG60 at the doses of 7.15, 14.3, and 28.6 mg/kg did not induce the frequency of micronucleus formation. However, mitomycin C, as one of the positive controls at the dose of 2 mg/kg caused the 8.4% induction in the frequency of micronucleus and 24% increase in the chromosomal aberration.

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까마귀쪽나무열매추출물의 유전독성 평가 (Genotoxicity Study of Litsea japonica Fruit Flesh Extract)

  • 윤지현;박인재;박성환;최구희;김현정;조주현
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제33권3호
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    • pp.207-213
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    • 2018
  • 본 연구는 까마귀쪽나무열매추출물(LJF-HE)의 유전독성을 평가하고자 하였다. 유전독성연구는 OECD와 MFDS(Korea Ministry of Food and Drug Safety) 지침에 따라 복귀돌연변이시험, 염색체이상시험, 마우스 골수세포를 이용한 소핵시험을 실시하였다. 세균을 이용한 복귀돌연변이시험은 까마귀쪽나무열매추출물(LJF-HE) 처리군에서 S9 mix 존재유무에 상관없이 복귀돌연변이 콜로니 수는 음성 대조군과 비교하였을 때 증가 양상을 나타내지 않은 반면에 양성 대조물질에서 유발된 복귀돌연변이 콜로니 수는 대사활성계 미적용(S9-) 및 적용(S9+)의 모든 시험 균주에 대하여 음성(용매)대조 값의 2배를 넘어 증가한 것으로 나타났다. 염색체 이상 시험에서 까마귀쪽나무열매추출물(LJF-HE) 처리군에서 모든 세포주의 처리시간 및 S9 mix 존재유무에 상관없이 5%미만의 비정상적인 염색체이상을 나타내었으나, 음성대조군에 비해 유의적인 변화는 없었다. 소핵시험은 까마귀쪽나무열매추출물(LJF-HE) 처리군에서 음성 대조군과 비교하여 소핵을 가진 다염성 적혈구의 증가는 볼 수 없었으며 통계학적인 유의성도 나타나지 않았다. 상기의 결과를 종합하면 까마귀쪽나무열매추출물(LJF-HE)은 유전독성을 유발하지 않는 것으로 판단되어진다.

고삼추출물의 in vitro 항돌연변이원성과 유전독성 연구 (In vitro Antimutagenic and Genotoxic Effects of Sophora Radix Extracts)

  • 조현조;윤현주;박경훈;이제봉;심창기;김진효;정미혜;오진아;김두호;백민경
    • 농약과학회지
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    • 제17권4호
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    • pp.335-342
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    • 2013
  • 고삼추출물은 한국에서 유기농업자재로 등록되어 있어 친환경농산물 재배시에 널리 사용되고 있다. 고삼추출물의 유효성분인 matrine은 쥐의 신경계에 독성을 나타낸다고 보고된 바 있으나 다른 안전성 확인 연구는 미비한 상황이다. 따라서 본 연구는 고삼추출물 2종을 이용하여 항돌연변이원성 시험과 유전독성시험 2종(복귀돌연변이 및 염색체이상 시험)을 실시하였다. 항돌연변이원성 시험은 복귀돌연변이 시험방법을 이용하여 실시하였으며, 복귀돌연변이 시험으로는 Salmonella Typhimurium TA98, TA1535와 TA1537을 이용하여, S-9 mix를 사용한 대사활성계 처리군과 PBS를 사용한 대사활성계 미처리군으로 구분하여 진행하였다. 염색체이상 시험은 Chinese hamster lung cells을 이용하여 고삼추출물 시료에 대사활성계 처리군은 6시간 노출시켰고, 대사활성계 미처리군은 각각 6시간과 24시간 노출시켜 시험하였다. 항돌연변이 시험 결과, 4-NQO에 의해 유도된 돌연변이 집락수는 고삼추출물 시료 처리에 의해 감소되어 항돌연변이 효과가 있는 것으로 나타났다. 시험결과, 복귀돌연변이 시험에서는 고삼추출물의 모든 시험 농도군에서 대사활성계의 처리 유무와 관계없이 독성이 나타나지 않았다. 반면, 염색체이상시험 결과 고삼추출물 시료 1종에서 대사활성계 미처리군에서는 250 ${\mu}g/mL$, 대사활성 처리군에서는 500 ${\mu}g/mL$ 의 농도에서 의양성이 나타났고 이 이하의 농도에서는 모두 음성으로 나타났으며, 나머지 시료 1종에서는 모든 처리농도군에서 음성으로 판정되었다. 고삼추출물의 유전독성 가능성을 더 정밀히 평가하기 위해서는 향후 battery system에 포함된 다른 in vivo 유전독성 시험을 추가로 시행하여 유전독성 여부를 최종 확인할 필요가 있다고 판단된다.

Appropriate In Vitro Methods for Genotoxicity Testing of Silver Nanoparticles

  • Kim, Ha Ryong;Park, Yong Joo;Shin, Da Young;Oh, Seung Min;Chung, Kyu Hyuck
    • Environmental Analysis Health and Toxicology
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    • 제28권
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    • pp.3.1-3.8
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    • 2013
  • Objectives We investigated the genotoxic effects of 40-59 nm silver nanoparticles (Ag-NPs) by bacterial reverse mutation assay (Ames test), in vitro comet assay and micronucleus (MN) assay. In particular, we directly compared the effect of cytochalasin B (cytoB) and rat liver homogenate (S9 mix) in the formation of MN by Ag-NPs. Methods Before testing, we confirmed that Ag-NPs were completely dispersed in the experimental medium by sonication (three times in 1 minute) and filtration ($0.2{\mu}m$ pore size filter), and then we measured their size in a zeta potential analyzer. After that the genotoxicity were measured and especially, S9 mix and with and without cytoB were compared one another in MN assay. Results Ames test using Salmonella typhimurium TA98, TA100, TA1535 and TA1537 strains revealed that Ag-NPs with or without S9 mix did not display a mutagenic effect. The genotoxicity of Ag-NPs was also evaluated in a mammalian cell system using Chinese hamster ovary cells. The results revealed that Ag-NPs stimulated DNA breakage and MN formation with or without S9 mix in a dose-dependent manner (from $0.01{\mu}g/mL$ to $10{\mu}g/mL$). In particular, MN induction was affected by cytoB. Conclusions All of our findings, with the exception of the Ames test results, indicate that Ag-NPs show genotoxic effects in mammalian cell system. In addition, present study suggests the potential error due to use of cytoB in genotoxic test of nanoparticles.

한국산 겨우살이 추출물의 안전성 평가 (Safety Evaluation of Korean Mistletoe Extract)

  • 김인보;정주성;윤택준;김종배
    • 한국식품영양학회지
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    • 제26권3호
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    • pp.383-390
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    • 2013
  • 본 연구에서는 겨우살이 열수 추출물인 미슬로 C의 안전성을 검토하고자 유전 독성 및 실험동물을 이용한 안전성 검사를 실시하였다. 미슬로 C의 미생물 돌연변이 실험을 S. typhimurium의 히스티딘 요구성 균주와 E. coli의 트립토판 요구성 균주를 이용하여 대사 활성계 적용 및 비적용 하에서 복귀돌연변이 시험을 실시한 바, $5,000{\mu}g/plate$의 처리 농도까지 복귀돌연변이 집락은 나타나지 않았다. ICR 마우스에게 500, 1,000 및 2,000 mg/kg를 경구 투여하고, 골수세포를 수집하여 소핵을 측정한 결과, 정상마우스의 경우와 비교하여 유의한 소핵은 관찰되지 않았기에 미슬로 C는 유전독성을 유발하지 않는 것으로 판단되었다. 식품의약안전청의 의약품 등의 독성시험기준에 따라 암 수 SD 계열의 랫드에 시험물질을 0, 500, 1,000 및 2,000 mg/kg/day의 용량으로 1회 경구 투여한 후, 14일간의 체중 변화 및 사망률을 조사한 결과, 대조군과 비교하여 유의한 체중 변화는 없었으며, $LD_{50}$은 2,000 mg/kg 이상인 것으로 사료된다. 또한 0, 250, 500 및 1,000 mg/kg/day의 용량으로 13주간 반복 투여하면서 실험동물의 일반증상, 체중변화, 혈액 및 혈액생화학적 변화, 부검소견, 조직학적인 변화를 관찰하였다. 시험기간 중 암 수 모든 군에서 시험물질 투여에 기인한 일반적인 증상 변화는 관찰되지 않았고, 시험물질의 반복 투여로 인한 사망 마우스 역시 관찰되지 않았다. 따라서 미슬로 C를 13주간의 랫드에 대한 13주 반복 경구 투여 결과, 무독성량은 최소한 1,000 mg/kg 이하인 결과를 나타냈으며, 이 농도에서 독성을 유발하는 표적장기는 관찰되지 않았다.

수질 정화제로 개발한 Ag-Os의 변이원성 시험 (Studies on Mutagenicity of Ag-Os, a Water Treatment Agent)

  • 이용규;백남진;신순환
    • 한국환경성돌연변이발암원학회지
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    • 제18권1호
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    • pp.43-46
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    • 1998
  • 굴(Oester)껍질에 은 이온을 도입해 개발한 수질 정화제 Ag-Os의 복귀 돌연변이원성을 관찰하기 위하여, Salmonella typhymurium TA 1535, TA 1537, TA 98, TA 100 이용하였고, DAN-손상여부를 관찰하기 위하여 Bacillus Subtils H-17($Rec^+$)와 H-45($Rec^-$)을 이용하였다. Ag-Os에 의한 복귀 돌연변이는 관찰되지 않았고, 이는 S9을 첨가시에도 같은 현상을 나타내었다. Rec-assay에 의한 DNA 손상도 관찰되지 않은 결과로 미루어, 수질 정화제 Ag-Os는 본 시험 조건에서 변이원성을 보이지 않음을 확인하였다.

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GST 추출물의 유전독성평가 (Genotoxicity Study of GST Extract)

  • 이철화;한종민;이미영;정인철;진미림;김승형;박양춘
    • 동의생리병리학회지
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    • 제28권6호
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    • pp.621-629
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    • 2014
  • This study aimed to evaluate the genotoxicity of GST (Gamisasangja-tang). For examining genotoxicity, we carried out bacterial reverse mutation assay, chromosome aberration assay, micronucleus induction test according to OECD guidelines. Bacterial reverse mutation assay: In GST treating group, regardless of existence S9 mix, revertant colonies counts appeared to be less than twice of negative control group and dose dependent increase. In positive control group, revertant colonies counts were shown to be more than twice of negative control croup. Chromosome aberration assay: All cell line showed repetition rate of abnormal chromosome aberration less than 5%, regardless of treating time, existence of S9 mix, and no significant change ($p{\succeq}0.05$) compared with negative control group. Micronucleus induction test: Micronucleated polychromatic erythrocytes (MNPCE) repetition rate of Polychromatic erythrocytes (PCE) showed no significant changes compared with negative control group ($p{\succeq}0.05$). PCE portion of total erythrocytes also showed no significant changes ($p{\succeq}0.05$). Our results showed that GST didn't induce any genotoxicity.

세균을 이용한 정제봉독의 복귀돌연변이시험 (Mutagenicity Study of Purified Bee Venom (Apis mellifera L.) by the Bacterial Reverse Mutation Assay)

  • 한상미;홍인표;우순옥;김세건;장혜리
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제32권3호
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    • pp.228-233
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    • 2017
  • 서양종 꿀벌의 일벌의 독을 채취하여 정제한 정제봉독에 대한 세균에서의 돌연변이 유발성 검색을 위하여 S. typhimurium의 히스티딘 요구성 균주 TA100, TA1535, TA98, 그리고 TA1537의 균주와 대장균 E. coli의 트립토판 요구성 균주인 WP2 uvrA를 이용해 복귀돌연변이시험을 실시하였다. 정제봉독은 부형제로 사용한 멸균생리식염수에 용해되었으며 모든 농도군의 조제물에서 침전은 관찰되지 않았으며, 정제봉독 조제물을 top agar와 혼합할 때 모든 농도군에서 혼탁이나 침전이 관찰되지 않았다. 대사활성계 적용 TA100, TA1535, TA98 균주에 대해 0, 1.5, 5, 15, 50, 150 및 500 µg/plate의 범위를 설정하고 미 적용시엔 0, 0.15, 0.5, 1.5, 5, 15 및 $500{\mu}g/plate$의 범위로 설정하였다. TA1537과 WP2 uvrA균주에 대한 농도 범위은 대사활성계 적용시엔 0, 5, 15, 50, 150, 500 및 1,500를 미 적용시엔 0, 1.5, 5, 15, 50, 150 및 500 µg/plate 범위로 설정하여 시험을 수행하였다. 그 결과 모든 시험균주에서 대사활성계 적용 여부에 상관없이 정제봉독 처리군의 평균 집락 수는 증가를 나타내지 않았으며, 양성판정 기준을 만족시키지 못하였다. 따라서, 정제봉독은 본 시험조건 하에 사용한 시험 균주에 복귀돌연변이를 유발하지 않는 것으로 사료되었다.

Genotoxicity Assessment of Erythritol by Using Short-term Assay

  • Chung, Young-Shin;Lee, Michael
    • Toxicological Research
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    • 제29권4호
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    • pp.249-255
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    • 2013
  • Erythritol is a sugar alcohol that is widely used as a natural sugar substitute. Thus, the safety of its usage is very important. In the present study, short-term genotoxicity assays were conducted to evaluate the potential genotoxic effects of erythritol. According to the OECD test guidelines, the maximum test dose was 5,000 ${\mu}g$/plate in bacterial reverse mutation tests, 5,000 ${\mu}g/ml$ in cell-based assays, and 5,000 mg/kg for in vivo testing. An Ames test did not reveal any positive results. No clastogenicity was observed in a chromosomal aberration test with CHL cells or an in vitro micronucleus test with L5178Y $tk^{+/-}$ cells. Erythritol induced a marginal increase of DNA damage at two high doses by 24 hr of exposure in a comet assay using L5178Y $tk^{+/-}$ cells. Additionally, in vivo micronucleus tests clearly demonstrated that oral administration of erythritol did not induce micronuclei formation of the bone marrow cells of male ICR mice. Taken together, our results indicate that erythritol is not mutagenic to bacterial cells and does not cause chromosomal damage in mammalian cells either in vitro or in vivo.