Gami-Sopungsan (GS) is one of the traditional korean remedy. We investigated the anti-inflammation and anti-atopic dermatitis (AD) effect of GS. No cytotoxicity of GS was observed in the range of $1{\sim}100{\mu}g/m{\ell}$ on Raw 264.7 cells. The Inflammatory response of Raw 264.7 cells were induced by lipopolysaccharide (LPS), followed by GS treatment at indicated concentrations (0, 1, 10 and $100{\mu}g/m{\ell}$). At $100{\mu}g/m{\ell}$ concentration, GS showed inhibitory effect on LPS-induced nitric oxide production by 20%. Production of IL-$1{\beta}$, IL-6 and TNF-${\alpha}$ was decreased by approximately 56%, 36% and 79%, respectively upon GS treatment at $100{\mu}g/m{\ell}$. 200 mg/kg of GS was orally administered to NC/Nga mice, where AD was induced by 1-chloro 2,4-dinitrobenzene. There were no significant difference between GS treated group and the control group on body weight and food intake changes during growth. The back skin of GS group showed decrease in erythema, pruritus, dry skin, edema, excoriation, erosion and lichenification level through naked eye observations. In addition, leukocyte infiltration and the thickness of epidermis were significantly decreased in the skin tissues (back and ear). The serum IgE levels were decreased by 28.8% in the GS treated group. The GS treated group showed remarkable inhibition of IL-4 (83%), IL-5 (95%), IL-6 (62%) and TNF-${\alpha}$ (84%) in serum, indicating that GS has similar or higher efficacy than those of the dexamethasone treated group. From the results above, we conclude that GS has significant anti-inflammation and anti-AD effects on Raw 264.7 cells and NC/Nga mice. The results should provide fundamental and valuable data for the research on natural products being developed against atopic dermatitis.
본 연구는 BALB/c mice의 등 쪽 부위에 반복적인 DNCB 도포를 통해 유발시킨 아토피 피부염에 있어서 참모자반 물 추출물의 효능에 대해 연구하였다. 참모자반 물 추출물을 2주 동안 지속적으로 처리하고 IL-4 및 IFN-γ cytokine의 분비량, 비장세포 증식능, 혈청 중 총 IgE 함량, 육안 평가 및 skin clinical severity score, 조직관찰을 실시하였다. 그 결과 참모자반 물 추출물을 지속적으로 도포함으로써 IL-4 cytokine과 총 IgE 함량이 현저히 감소하는 것을 확인할 수 있었으며 IFN-γ cytokine은 유의적으로 증가하는 것을 확인하였다. 비장세포 증식능에는 참모자반 물 추출물의 도포처리가 큰 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 육안평가 및 skin clinical severity score 결과, 참모자반 물 추출물을 2주간 지속적으로 도포 처리하였을 때, 그 증상이 눈에 띄게 완화되는 것을 확인할 수 있었으며 score 또한 DNCB 단독 처리군과 비교 시 유의적으로 감소하였다. 등 조직 관찰에서도 참모자반 물 추출물에 의해 DNCB로 유발된 아토피 동물 실험군의 경피 및 진피 조직 두께 및 진피에서의 mast cell의 침윤 정도가 감소되었음을 확인하였다. 이상 결과를 종합 해볼 때, 참모자반 물 추출물이 아토피 피부염 치료제로서 이용 가능성이 있을 것으로 사료된다.
It is known that animal-origin medicine could be one of effective treatment to remedy atopic dermatitis (AD) by controlling the cytokines. Cicadidae Periostracum (CP), the slough of Cryptotympana pustulata, has been frequently used for treating AD and skin affliction in traditional Korean Medicine. This study is aimed at investigating the ameliorating effects of CP on AD and its potential mechanism. The dinitrochlorobenzene sensitized mice were treated with CP for 2 weeks. The various biomarkers and the dermatitis scores presented that CP treatment can induce the visual and biological improvements of AD model. Pruritus, the most serious symptom of AD, which can cause repeated scratching behaviors and finally lead to lichenification, was reduced with CP treatment by regulating the inflammatory reactions. In addition, CP treatment diminished the number of mast cells that are known for causing inflammatory reactions. Moreover, it is proven that CP can decline secretion of interleukin-22, which means CP treatment has anti-inflammatory effects. CP treatment can correct the imbalance of helper T (Th)1 and Th2, downregulating thymic stromal lymphopoietin that leads to decrease of mRNA level of inflammatory cytokines. The crucial role of CP treatment is controlling of the Janus kinase 1/signal transducer and activator of transcription 3 pathway. In addition, CP treatment has the inhibitory effects on kallikrein related peptidase (KLK) 5 and KLK7. Taken together, CP treatment can ameliorate most symptoms and problems caused by AD disease, improving the AD patients' life quality.
본 연구는 고욤잎, 감잎 및 뽕잎을 단독으로 사용하기보다 혼합하여 사용할 경우 고욤잎, 감잎 및 뽕잎 복합추출물이 아토피 피부염(AD) 증상을 억제하는지 효과를 밝히고, 항염 효능을 나타내는 기능성 소재로서의 이용 가능성을 알아보고자 하였다. 그 결과 육안 평가를 통해 피부의 건조 상태, 스케일링, 미란, 찰과상 및 홍반 같은 아토피 피부염 증상이 AD 모델에서 증가하였지만, 고욤잎, 감잎 및 뽕잎 각각의 추출물과 복합추출물을 투여하였을 경우 완화되는 것을 확인할 수 있었으며, 복합추출물이 고욤잎, 감잎 및 뽕잎 각각의 추출물보다 더 뛰어난 효과를 나타내었다. 피부 두께와 염증세포 및 비만세포의 침윤은 AD 모델에서 크게 증가하였지만, 고욤잎, 감잎 및 뽕잎 단독추출물과 복합추출물을 투여하였을 경우 감소하는 것을 확인할 수 있었으며, 복합추출물이 단독추출물보다 더 뛰어난 효과를 나타내었다. 혈청중의 IgE와 IL-4의 수치를 측정한 결과 AD 모델에서 많이 증가하였으나, 고욤잎, 감잎 및 뽕잎 단독추출물과 복합추출물을 투여하였을 경우 감소하는 것을 확인할 수 있었으며, 복합추출물이 단독추출물보다 더 뛰어나게 억제하는 효과를 나타내었다. HMC-1 세포에 복합추출물을 처리하였을 경우 염증성 사이토카인인 $TNF-{\alpha}$와 IL-6의 생성량이 유의적으로 감소하였으며, 또한 RAW 264.7 세포에 복합추출물을 처리하였을 경우 염증 매개 인자인 $TNF-{\alpha}$, IL-6, $PGE_2$ 및 NO 생성량이 감소하였고, 이러한 염증 매개 인자 억제 효능은 복합추출물이 단독추출물보다 더 뛰어나게 억제하는 것을 확인하였다. 이러한 결과로 미루어볼 때 고욤잎, 감잎 및 뽕잎을 혼합한 복합추출물을 사용할 때 효능이 더 우수한 것을 확인하였고, 아토피 피부염 증상 개선 및 염증관련 질환 치료를 위한 기능성 천연물 소재 및 제품 개발에 응용이 가능할 것으로 생각한다.
The aim of this study is to investigate the effect of Zizyphus jujuba var. spinosa Composite oil(ZjJ-C_oil) and Aralia cordata var. continentalis Composite oil(ARC-C_oil) to NC/Nga mice induced in Atopic dermatitis-like skin lesions by DNCB. NC/Nga mice which have been induced to Atopic dermatitis-like skin lesions by DNCB are divided into 4 groups, the first is the mice which have been spread with izyphus jujuba var. spinosa Composite oil(ZjJ-C_oil), the second is the mice which have been spread with Aralia cordata var. continentalis Composite oil(ARC-C_oil), the third is which have been spread with dexamethasone (Dexa.) 0.5% on their Atopic lesion, the last is the control group. Then We analyzed skin clinical score, blood sample of each group of measure state of the dorsal skin, the number of immunocytes, and resect the skin lesion to anlayze the state of cells. There are meaningful results of measuring the number of IgE, IL-4, IL-13, $IFN-{\gamma}$, IL-5, the total cells in ALN, dorsal skin, CD4+ Th, CD11b+/Gr-1+ in PBMCs, CD4+ Th, B220+/CD23+ in ALN, $CD4^+$, $CD8^+$ Th in dorsal skin, the level of COX-2, $TNF-{\alpha}$, $TGF-{\beta}1$, IL-4, IL-13 mRNA, the state of the skin lesion and cells in the group with ZjJ-C_oil, ARC-C_oil cream in comprarison with the control group.
결명자(Cassia obtusifolia) 및 포공영(Taraxacum platycarpum), 유근피(Ulmus macrocarpa)로 제조된 생약재 추출혼합물이 in vitro와 in vivo상에서 아토피 피부염에 미치는 영향을 실험하였다. HMC-1 cell을 이용하여 비만세포의 $\beta$-hexosaminidase 방출량을 측정한 결과, 단일 추출물보다 추출복합물이 탈과립을 억제하는 효과가 우수한 것으로 측정되었다. 그리고 HMC-1 cell에서 PMA와 A23187로 자극하였을 때 생성되는 염증성 cytokine의 분비에서도 추출혼합물의 저해 효과가 가장 높게 나타났다. 아토피 질환모델인 NC/Nga 마우스를 사용하여 생약재 추출혼합물의 아토피 저감효과를 측정한 결과, 진드기 추출물에 의해 발진된 마우스의 귀두께 및 조직학적인 부종 관찰을 통해 생약재 추출혼합물 농도가 증가함에 따라 대조군에 비해 귀 두께 및 부종의 감소가 관찰되었다. 또한 마우스의 혈중 IgE 농도와 이와 관련된 cytokine의 농도를 측정한 결과, 생약재 추출혼합물 투여농도가 증가함에 따라 IgE의 농도가 유의적으로 감소하였고, IgE의 과발현을 유도하는 IL-4의 분비 억제 및 IFN-$\gamma$의 분비가 증가되는 것으로 나타나 생약재 혼합추출물의 섭취가 아토피 피부염 증세 완화 효과에 도움이 되리라 사료된다.
옥수수수염 추출물에서 분리한 NICS-1 및 NICS-3이 가지고 있는 항염 및 항아토피 활성을 알아보기 위하여 각각 RAW 264.7 및 HaCaT 세포를 이용하여 NO 및 TNF-${\alpha}$ 생성 저해능과 TARC 생성량 정도를 측정하였다. 그 결과 항염활성의 경우 NICS-1 및 NICS-3 두 추출물 모두 NO 및 TNF-${\alpha}$ 생성량이 농도의존적으로 크게 감소하였으며, NICS-3이 더 높은 활성을 나타냈다. 또한 항아토피 활성의 경우도 두 추출물 모두 TARC 생성이 대조구에 비하여 크게 감소하였으며 NICS-3 보다 NICS-1이 더 우수한 활성을 나타냈다.
Wished to examine closely effect that SoPungDoJeokTang-KaMi (SPDJTK) medicines used to atopy dermatitis disease patient get in atopy eruption control experimentally. SPDJTK medicines controlled $CD4^+/IFN-\gamma$, and $CD4^+/CD25^+/foxp3^+$ revelation that an experiment that motive allergy immune reponse because an in vitro experiment stimulates T cells of a NC/Nga mouse same time by anti-CD40/rmIL-4, and interleukin-$1{\beta}$, IL-6, TNF-$\alpha$, and TGF-$\beta$ mRNA outturn that bear in T and B cells decreased remarkably by SPDJTK medicines. Intracellular staining of splenocytes anti-CD40/rmIL-4 plus rmIL-4 stimulated as described in a, assessed after 24 h, SPDJTK exerts a mainly immunosuppressive effect that acts at least partially through suppression of the transcription factor GATA3 expression in $CD4^+$ T cells. Atopic dermatitis (AD) usually develops in patients with an individual or family history of allergic diseases, and is characterized by chronic relapsing inflammation seen specially in childhood, association with IgE hyperproduction and precipitation by environmental factors. However, the exact etiology of AD has been unclear. To further explore the pathogenesis and treatment of AD, a suitable animal model is required. We found that skin lesions, which were clinically and histologically very similar to human AD, mite antigen-induced dermatitis on the face, neck, ears and dorsal skin of inbred NC/Nga mice. Result that Th1 cell and Th2 cell observe to be shifted by cytokine expression with $CD4^+/CD25^+/foxp3^+$ Treg cells induction by SPDJTK medicines could know that SPDJTK medicines can use usefully in allergy autoimmnune diease.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제27권2호
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pp.289-297
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2013
This study was evaluated the antiatopic activity of silkworm feces extracts in DNCBinduced NC/Nga atopy mice. It was found that each level of IgE and histamine in blood was significantly decreased in the silkworm feces extracts treatment groups, compared with the DNCB-induced atopy control group. When the silkworm feces extracts was applied to the atopy mice, it could be observed that its skin recovered to normal condition with the skin surface being clean and smooth without any tissue. The results suggest that the application of silkworm feces extracts effect on atopic model through a inhibition of histamine emissions with reducing the levels of blood IgE in NC/Nga atopy mice.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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