식용버섯으로부터 항보체 활성물질을 탐색하여 새로운 소재화 연구의 일환으로 상황버섯(Phellinus linteus) 균사체로부터 항보체 활성 물질을 분리, 정제를 하였으며 화학적 특성을 검토하였다. 정제는 상황버섯의 열수추출한 후, 열수추출물(PL-0)를 한외여과하여 분자량별로 5개의 획분을 얻었다. 이 중, 300kDa 이상의 획분(PL-5)을 DEAE-Sepharose FF 이온교환 크로마토그래피, Sepharose CL-4B 겔여과 크로마토그래피를 실시하여 PL-5-IIIa 획분을 얻었다. PL-5-IIIa 획분을 HPLC를 행한 결과 단일 피크로 나타났으며 정제다당 PL-5-IIIa의 분자량은 800,000Da으로 측정되었다. 정제다당 PL-5IIIa는 64.2%의 당과 29.6%의 단백질로 구성되었으며 구성당은 galactose가 43.1%, mannose가 40.6%, fucose가 15.8%로 나타났다.
Yun, Ji Young;Jeong, Jin Boo;Eo, Hyun Ji;Kwon, Kun Woo;Hong, Se Chul;Jeong, Hyung Jin;Koo, Jin Suk
대한본초학회지
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제27권6호
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pp.7-13
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2012
Objectives : Reactive oxygen species (ROS) have been associated with pathogenic processes including carcinogenesis through direct effect on DNA directly and by acting as a tumor promoter. Therefore, it has been regarded that ROS may be a major target for cancer prevention. The root of Paeonia lactiflora pall (PL), a traditional Chinese herb, has been a component of effective prescriptions for treatment of liver disease. Also, there are some reports about the antioxidant activities of the extracts from PL. However, little has been known about the effects of PL against oxidative damage. This work aimed to elucidate the anti-oxidant effects of Paeonia lactiflora pall (PL) in the non-cellular system and cellular system. Methods : Antioxidant activities of PL were evaluated by hydroxyl radical scavenging assay and $Fe^{2+}$ chelating assay. Anti-oxidative effect of PL was evaluated by ${\varphi}X$-174 RF I plasmid DNA cleavage assay in non-cellular system. In addition, DNA migration assay, expression level of phospho-H2AX, MTT assay and lipid peroxidation assay were performed for evaluate the anti-oxidative effect of PL in cellular system. Results : PL had a dose-dependent hydroxyl radical scavenging and $Fe^{2+}$ chelating capacity. In addition, PL inhibited oxidative DNA and cell damage induced by hydroxyl radical in non-cellular system and cellular system. Conclusion : Taken together, P. lactiflora pall may be possible for the application to a potential drug for treating the oxidative diseases such as cancer.
최근 농가에서 재배하고 있는 상황버섯 종에 비하여 균사생장이 빠르고 자실체 발생과 생육이 빠른 P. linteus HN1009K (HK1009)가 개발되었다. 본 연구는 HK1009의 균사체와 자실체 에탄올 추출물의 항산화 및 항염증효과를 기존에 재배되고 있는 P. linteus (PL, Korea Sangwhang)과 P. baumii (PB, Jangsu Sanghwang)를 대조구로 하여 비교분석 하였다. HK1009는 균사체와 자실체 추출물 모두 PL과 PB에 비하여 항산화 활성이 높았으며 xanthine oxidase분석에서는 PL, HK1009, PB순으로 항산화 활성이 높게 나타났다. RAW264.7세포를 이용한 상황버섯 균사체 추출물 PB(EX), PL(EX), HK1009(EX)시료의 NO assay 결과는 PB, PL, HK1009 모두 농도 의존적으로 원액 $200{\mu}g/ml$ 에서는 $7{\sim}8{\mu}M$ 정도로 염증 억제 효과가 뛰어났다. RAW 264.7 세포에 대한 MTT assay 결과에서 PB(EX), PL(EX), HK1009(EX) 추출물의 원액처리구 에서도 세포의 생존능이 70% 이상을 유지하여 세포 독성이 없는 것으로 판단되었다.
Background: Anti-cardiolipin antibody (Anti-CL Ab) is one of the various antiphospholipid antibodies (Anti-PL Abs) and found in the plasma of patients with systemic lupus erythematosus (SLE), atherosclerosis, and other infectious diseases. While anti-PL Abs found in the sera of patients with infectious diseases bind directly to CL, binding of anti-PL Abs to CL circulating in the sera of patients with autoimmune diseases is mediated by $\beta_2-$glycoprotein 1 ($\beta_2-GP1$). The purpose of this study is to investigate the effect of <$\beta_2-GP1$ on the antigen binding assay of anti-CL Abs present in the sera of patients with atherosclerosis, which has been known as one of autoimmune diseases. Methods: ELISA was performed with sera containing anti-CL Abs from three patients with atherosclerosis in the presence or absence of $\beta_2-GP1$ or FBS. Results: Reactivity of anti-CL Abs to CL was increased in the presence of $\beta_2-GP1$ or FBS in a dose dependent manner. Conclusion: <$\beta_2-GP1$ or FBS could be used as co-factor in CL ELISA with anti-CL Abs present in the sera of patients with atherosclerosis. It is suggested that anti-CL Abs found in atherosclerosis patients are similar in terms of antigen binding property to those circulating in the patients with autoimmune diseases, not to infectious diseases.
Piperlonguminine (PL), an important component of Piper longum fruits, is known to exhibit anti-hyperlipidemic, antiplatelet and anti-melanogenic activities. Here, the anticoagulant activities of PL were examined by monitoring activated-partial-thromboplastin-time (aPTT), prothrombin-time (PT), and the activities of thrombin and activated factor X (FXa). The effects of PL on the expressions of plasminogen activator inhibitor type 1 (PAI-1) and tissue-type plasminogen activator (t-PA) were also tested in tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$) activated HUVECs. The results showed that PL prolonged aPTT and PT significantly and inhibited the activities of thrombin and FXa. PL inhibited the generation of thrombin and FXa in HUVECs. In accordance with these anticoagulant activities, PL prolonged in vivo bleeding time and inhibited TNF-${\alpha}$ induced PAI-1 production. Furthermore, PAI-1/t-PA ratio was significantly decreased by PL. Collectively, our results suggest that PL possesses antithrombotic activities and that the current study could provide bases for the development of new anticoagulant agents.
Nam, Mi Na;Lee, Ah Young;Sin, Seung Mi;Goo, Young-Min;Cho, Eun Ju
농업과학연구
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제46권3호
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pp.427-437
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2019
Oxidative stress and overproduction of free radicals have been reported to be a major pathological hallmark of neurodegenerative diseases. Samultang has been known as a beneficial agent to treat liver disease and cardiovascular diseases. However, the anti-oxidant activities and neuro-protective effects of Samultang against oxidative stress still have not been evaluated yet. The aim of the present study was to investigate the anti-oxidant and protective effects of Samultang and its four herbal plants, Paeonia lactiflora (PL), Ligusticum striatum (LS), Rehmannia glutinosa (RG), and Angelica gigas (AG), in vitro system and in SH-SY5Y neuronal cells. The extracts of Samultang strongly increased the radical scavenging activities of 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), hydroxyl radical (${\cdot}OH$), and nitric oxide (NO) in a concentration-dependent manner. Furthermore, we investigated the protective effects of Samultang on cellular damage against oxidative stress induced by hydrogen peroxide ($H_2O_2$) in SH-SY5Y cells. Treatment with Samultang alleviated the oxidative stress from $H_2O_2$ by increasing the cell viability and decreasing the intracellular reactive oxygen species levels. Based on these results, we further investigated the radical scavenging effects of PL, LS, RG, and AG. In our results, PL had the highest DPPH, ${\cdot}OH$, and NO radical scavenging activities. Thus, PL has a crucial role in Samultang, which has anti-oxidative and neuro-protective effects. The present research suggests that Samultang and PL have protective roles against oxidative stress from $H_2O_2$-induced neuronal cell death.
상황버섯의 지방소화효소 억제와 항산화 활성을 구명하기 위해 상황버섯 메탄올 추출물의 췌장 lipase 억제 활성과 항산화 활성을 in vitro에서 측정하고, 흰쥐에 고지방식이와 함께 상황버섯 분말을 투여하여 지방소화효소 활성 저해를 통한 지방 흡수 억제와 항산화 효과를 in vivo에서 관찰하였다. 메탄올 추출물의 췌장 지방소화효소 활성 저해능과 DPPH 라디칼 소거능을 측정한 결과, $IC_{50}$가 각각 $36.3\;{\mu}g/mL$와 $20.1\;{\mu}g/mL$로 나타났으며, DPPH 소거능은 비타민 C의 $IC_{50}$인 $18.3\;{\mu}g/mL$와 비슷하였다. 상황버섯 분말을 고지방식이에 각각 2%와 5% 첨가한 식이를 공급하고 8주간 사육한 결과, 상황버섯 첨가로 인해 식이섭취량은 증가하였으나 체중과 체지방량에는 차이가 없었으며 따라서 식이효율은 낮았지만 유의적이지는 않았다. 그러나 상황버섯 섭취로 인해 지질의 흡수가 감소되어 분변으로의 지질 배설량이 증가한 것으로 조사되었다. 혈장 지질의 경우, 상황버섯 첨가군에서 혈장 총 콜레스테롤과 LDL 콜레스테롤, 간의 총 지질과 총 콜레스테롤 함량이 대조군에 비해 낮아진 것으로 조사되었다. 혈장 GPT 활성은 상황버섯 2%와 5% 첨가군에서 각각 대조군에 비해 43%와 45% 감소하였다. 혈장, 적혈구 및 간의 항산화 효소 활성을 측정한 결과, 상황버섯의 첨가로 T-SOD 활성은 영향을 받지 않았으나, GSH-Px는 간과 혈장에서 활성이 증가하였다. 실험식이를 공급하고 2주, 4주 및 8주에 림프구를 분리하여 DNA 손상 정도를 측정한 결과, 상황버섯을 2주간 섭취한 후의 림프구 DNA 손상이 대조군에 비해 큰 것으로 조사되었으나, 4주간 섭취한 군에서는 차이가 없었고, 8주에서는 DNA 손상이 억제되었으며 2% 첨가군에서 DNA 손상 억제 정도가 가장 크게 나타났다. 림프구에 $H_2O_2$로 산화스트레스를 가하고 DNA 손상 정도를 측정한 결과, 상황버섯 첨가군의 DNA 손상이 대조군에 비해 식이섭취기간에 비례해서 낮아졌고, 5% 첨가보다는 2% 첨가군에서 억제 효과가 더 높은 것으로 조사되었다. 이상의 결과들로부터, 상황버섯은 생체 내 항산화 효소계의 활성유도와 산화스트레스로 인해 생성된 라디칼의 활발한 소거를 통해 세포의 산화적 손상을 억제하는 효과가 있는 것으로 생각된다.
The present study describes the preliminary evaluation of the anti-inflammatory activities of Phellinus linteus (PL) and Phellinus linteus Grow in Germinated Brown Rice (BRPL). In order to effectively screen for anti-inflammatory agents, we first examined the extracts' inhibitory effects on the expression of pro-inflammatory cytokines activated with lipopolysaccharide. Moreover, we examined the inhibitory effects of the PL and BRPL extracts on pro-inflammatory factors such as NO, iNOS, $TNF-{\alpha}$ and $IFN-{\gamma}$ in murine macrophage RAW 264.7 cells. NO production and iNOS expression was significantly augmented in LPS treated cell, the production of NO and iNOS was greater in the BRPL than in the PL group. In addition, protein and mRNA levels of $TNF-{\alpha}$ and $IFN-{\gamma}$ in BRPL showed relatively more potent pro-inflammatory-activity inhibition compared to that of PL. These results suggest that BRPL may have significant effects on inflammatory factors, and may be a potential anti-inflammatory therapeutic materials.
Xu Bao Jun;Han Li Kun;Zheng Yi Nan;Lee Jeong Hyun;Sung Chang Keun
Archives of Pharmacal Research
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제28권2호
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pp.180-185
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2005
In the process of investigating anti-obesity effect of Platycodi Radix, we found that aqueous extract of Platycodi Radix might inhibit intestinal absorption of dietary fat by inhibiting pancreatic lipase (PL) activity. In order to clarify the anti-obesity mechanism of Platycodi Radix, activity-guided isolation was performed to find active components. The total saponin fraction of Platycodi Radix appeared to have a potent inhibitory activity against the hydrolysis of triolein emulsified with phosphatidycholine by pancreatic lipase in vitro. Based on these results, further purification of active components yielded 10 known triterpenoidal saponins, among these compounds, platycodin A, C, D, and deapioplatycodin D exhibited significant inhibitory effects on PL at the concentration of $500\;{\mu}g/mL$ with 3.3, 5.2, 34.8, and $11.67\%$ pancreatic lipase activity vs control, respectively. Platycodin D was found to inhibit the PL activity in a dose-dependent manner. Therefore, the anti-obesity effect of Platycodi Radix might be due to the inhibition of pancreatic lipase by its saponins.
Objectives: The purpose of this study was to investigate the anti-inflammatory effects of aqueous extract from Picrasmae Lignum(PL). Methods: To evaluate the anti-inflammatory effects of PL extract, the productions of NO, PGE2 and expression of pro-inflammatory cytokine(IL-1b, IL-6 and TNF-a) were measured in LPS-induced RAW 264.7 cells. Furthermore Western blot analysis has been done to look into the inhibitory mechanisms such as MAPKs and NF-kB. Results: PL extract down-regulated LPS-induced NO, PGE2, IL-1b, IL-6 and TNF-a productions mainly through JNK and p38 MAPK pathway and NF-kB pathway. Conclusions: These results suggest that PL extract may be effective for the treatment of inflammatory diseases.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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