The optimum annealing conditions of corn starch slurry were studied for RS4 type resistant starch production by phosphorylated cross-linking. When a corn starch slurry was cross-linked by using phosphate salts (STMP/STPP mixture) in the presence of 0.9%, 1.2% and 1.5% NaOH/st.ds, a high concentration of NaOH resulted in a rapid increase of the RS contents at the early reaction stage. However, similar RS contents were obtained after 12 h of cross-linking regardless of NaOH concentrations. The annealing treatment was conducted under various conditions such as pH between 2-10, temperature $40-60^{\circ}C$, time 0-14 h followed by phosphorylated cross-linking. The lower slurry pH was for the annealing treatment, the higher RS contents were obtained after cross-linking. When the slurry annealed for various period of time and temperature, a maximal amount of RS was formed after 2 h of annealing at $50^{\circ}C$ of annealing temperature of the starch slurry (pH 2.0). Therefore, an optimal annealing conditions at pH 2.0 and $50^{\circ}C$ for 2 h were proposed under the cross-linking conditions of sodium sulfate 10%/st.ds, NaOH 1.2%/st.ds and 12 h of the reaction time. The RS contents were linearly increased with the increase of phosphate salt addition. The RS4 prepared under the optimal conditions contained RS 72.3% and its phosphorus content was 0.36%/st.ds, which was below the limit (0.4%/st.ds) of modified starch by Korea Food Additives Code.
Ferimzone Z is a fungicide for effectively controlling rice blast. Under light irradiation conditions, it undergoes a rapid conversion to its E-stereoisomer. Given the importance of isomers in risk assessments of residues in crops, an analytical method was developed for individual isomer quantification. A comparative analysis performed using two columns in HPLC-MS/MS demonstrated that the isomers were successfully separated using the Cadenza column. For the brown rice sample preparation, 5 g of the homogenized sample was saturated with 7 mL of water. The sample was then extracted with a 10 mL mixed solvent of acetonitrile and ethyl acetate (1:1, v/v) that contained 0.1% formic acid, and it was subsequently partitioned with magnesium sulfate and sodium chloride. The upper layer was purified using dSPE containing C18 and PSA sorbents. The established method was subjected to method validation, and it showed recovery rates of 90.6-98.8% (RSD ≤ 3.9%) at concentrations of 0.01, 0.1, 2 mg/kg, with a soft matrix effect (%ME) ranging from -3.1% to +6.5%. This method can be employed in monitoring studies of brown rice to determine the conversion ratio from the Z isomers to the E isomers.
To study the possible use of probiotics in fish farming, we evaluated antagonism of antibacterial strain Bacillus amyloliquefaciens H41 against the fish pathogenic bacterium Vibrio anguillarum NCMB1. The purification of growth inhibition factor produced by B. amyloliquefaciens H41 was achieved by obtaining supernatant of this bacterium. The growth inhibition factor was purified to homogeneity by 70% ammonium sulfate precipitation, DEAE-sephadex A-50 ion exchange chromatography, sephadex G-200 gel filtration column chromatography, and sephadex G-50 gel filtration column chromatography with 40.8 fold of purification and 2.9% yield. The molecular weight of the purified growth inhibition factor was 48 kDa as determined by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis. The optimum pH and temperature for the growth inhibition factor were pH 7.5 and $30^{\circ}C$, respectively. The activity of growth inhibition factor was enhanced slightly by some metal ions, such as $Mg^{+2}$, $Mn^{+2}$, but was inhibited by the addition of $Co^{+2}$, $Hg^{+2}$, $Zn^{+2}$ and $Ag^{+2}$. NaCl stability of the growth inhibition factor was observed with 50% residual activity at 3% NaCl concentration. Toxicity test showed that the purified B. amyloliquefaciens H41 growth inhibition factor did not affect the live of Japanese flounder (Paralichthys olivaceus) and the effectiveness was 78% of residual lethality compared to commercial antibacterial agents.
Joe Kih-Soo;Kim Jung-Suck;Han Sun-Ho;Park Yeong-Jai;Kim Won-Ho
Journal of Nuclear Fuel Cycle and Waste Technology(JNFCWT)
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v.4
no.2
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pp.95-102
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2006
Alpha spectrometry was studied for the determination of $^{237}Np$ in spent nuclear fuel samples. The optimum condition for the electrodeposition of $^{237}Np$ was obtained as follows : for $1{\sim}1.5$ hour of deposition time, at the current intensity of $1.2{\sim}1.5$ A and at sodium sulfate electrolyte without organic additive. The deposition yield and its reproducibility on $^{237}Np$ was decreased as the amount of $^{237}Np$ decreased from 4.16 Bq down to 0.0264 Bq(1ng). The recovery yield of $^{237}Np$ determined by alpha spectrometry after separation in synthetic solution was $98.8{\pm}5.1%$(n=4). The contents of $^{237}Np$ in spent nuclear fuel samples were determined and the result showed an agreement within 10% of a difference between the measurement and the calculation.
Detection of pathogenic microorganisms takes several days by conventional methods. It is necessary to assess microorganisms in a timely manner to reduce the risk of spreading infection. For this purpose, bacteriophages are chosen for use as a biosensing tool due to their host specificity, wide abundance, and safety. However, their lytic cycle limits their efficacy as biosensors. Phage proteins involved in binding to bacteria could be a robust alternative in resolving this drawback. Here, a fragment of tail protein J (residues 784 to 1,132) of phage lambda fused with 6X His-tag (6HN-J) at its N-terminus was cloned, overexpressed, purified, and characterized for its binding with microorganisms. The purified protein demonstrated a size of about 38 kDa in sodium dodecyl sulfate - polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and bound with anti-His monoclonal antibodies. It bound specifically to Escherichia coli K-12, and not Salmonella typhimurium, Bacillus subtilis, or Pseudomonas aeruginosa in dot blotting. Binding of the protein to E. coli K-12 inhibited about 50% of the in vivo adsorption of the phage lambda to host cells at a concentration of $1{\mu}g/ml$ 6HN-J protein and almost 100% at $25{\mu}g/ml$ 6HN-J. The results suggest that a fusion viral protein could be utilized as a biosensing element (e.g., protein chips) for detecting microorganisms in real time.
Streptococcus pneumoniae is one of the major pathogens in community-acquired diseases, and it contains several factors that promote its pathogenesis, including pneumolysin (PLY). PLY is a member of the cholesterol-dependent cytolysin family, which attacks cholesterol-containing membranes, thereby forming ring-shaped pores. Thus, it is a major key target for vaccines against pneumococcal disease. We cloned the PLY gene from S. pneumoniae D39 and inserted it into the pQE-30 vector. Recombinant PLY (rPLY) was overexpressed in Escherichia coli M15 and purified by $Ni^{2+}$ affinity chromatography. Similarly, a PLY-EGFP fusion gene was produced by inserting the EGFP gene at the 3' end of the PLY gene in the same vector, and the recombinant protein was purified. Sodium dodecyl sulfate - polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) showed that both recombinant proteins were purified. rPLY exhibited significant hemolytic activity against 1% human red blood cells (RBCs). Complete hemolysis was obtained at 500 ng/ml, and 50% hemolysis was found with a 240 ng/ml concentration. In contrast, rPLY-EGFP did not show hemolytic activity. However, rPLY-EGFP did bind the RBC membrane, indicating that rPLY-EGFP lost hemolytic activity via EGFP fusion, while retaining its membrane-binding ability. These data suggest that PLY's C terminus is important for its hemolytic activity. Therefore, these two recombinant proteins can be extremely useful for investigating the toxin mechanism of PLY and cell damage during pneumonia.
The possibility that DNA could move out of the single cells isolated from geranium (Pelargonium zonale hybrids, 'PintoScarlet') callus was determined by the elechophoretic DNA analysis after treatment of low pH, various concentrations of KNO$_3$, 2,4-D, and GA$_3$ followed by the centrifugal force, all of which are hewn to and the physico-chemical properties of the cell wall. The centrifugal force of l,800 xg was need for DNA migration after the above treatment, but 7k300 xg was required without the treatments. In this experiment the optimum concentration (300 mg/L) of sodium dodecyl sulfate (SDS) used as an anion detergent to collect the negatively charged DNA was very critical not to damage the cell wall It can be concluded that the centrifugal force played a key role for the DNA migration through the cell wall, and the treatments of low pH (4.0), 0.5% KNO$_3$, 1.5 mg/L GA$_3$and 1mg/L 2,4-D further increased the DNA migration.
The potato proteinase inhibitor II (PI-II) protein contains chymotrypsin and trypsin inhibitory site. Among several PI-II genes isolated from genomic library, amino acid sequence deduced from PI-IIT gene has 84% identity with that of the polypeptide chymotrypsin inhibitor (PCI). Therefore a gene fragment having homology with the PCI was cloned into a vector using polymerase chain reaction(PCR) from the potato proteinase inhibitor IIT gene. Two different primers were utilized for cloning; primer A contains NdeI restriction site and 30 nucleotides, which has AUG N-terminal methionine codon, primer B contains BclI restriction site and 28 nucleotides, which has TAG translation stop codon. After PCR, about 160 bp-long DNA fragment was cloned into pRT146, derivative of pUC118, and sequenced. The sequenced NdeI/BclI fragment was moved to pET3a, containing bacteriophage T7 promoter and terminator. The expressed proteins in E. coli BL2l(DE3) were determined on a polyacrylamide gel containing sodium dodecyl sulfate. The expected size of protein deduced from the sequenced gene fragment is about 6,500 dalton whose size was similar to the IPTG-induced protein (6,000 dalton) on a gel. However the expression level was much lower than expected.
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.30
no.3
s.47
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pp.369-375
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2004
In this study, liquid crystalline (LC) is formed using Gemini surfactant (GS) type and moisturizing effect in vivo is measured. $3.0\;wt\%$ of sodium dicocoyl ethylene diamine (PEG)-15 sulfate (SCD-PEG-15S) is used as GS and $4.0\;wt\%$ of hydrogenated dimer acid esters (HDAE) as booster. For stabilizers, $2.0\;wt\%$ of behenyl alcohol (BA) and $1.0\;wt\%$ of Iyso-lecithin (LyL) are utilized. It is stabilized in pH from 4.0 to 10.5 and the best condition is in pH 6.5. The value of viscosity is $8,000\pm500$ cP. The most excellent particles are formed within the range of 4.0 to 15.5 um. Formed LC is observed around LC particles using polarization microscope. It is also observed that lamellar gel network structure is formed around LC particles. Moisturizing effect is improved by $13.6\%$ (P<0.05) compared to control when measured 30 min later after coating samples. After 1 h, moisturizing effect is improved by 1$12.6\%$ (P<0.05) than control while showing $28.3\%$ (P<0.05) of improvement after 4 h. These results may be caused from that manufactured LC forms lamellar structure so that it has better water-holding ability and absorbance of oil increases. This formula could be utilized by delivery system (DS) on skin so that this technology can be applied for manufactuing pharmaceuticals and cosmetics.
Park, Seok Man;Lee, Se Hui;Jeong, Da un;Cho, Su-Jung;Shin, Mi-Rae;Park, Hae-Jin;Roh, Seong-Soo
The Korea Journal of Herbology
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v.37
no.1
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pp.19-29
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2022
Objectives : Although the pharmacological effects of anti-inflammatory and antioxidant action of Atractylodes macrocephala Koidzumi water extract (AM) have been proven from many studies, reports on the antioxidant effect of AM on ulcerative colitis (UC) are scarce. Therefore, we aimed at evaluating the anti-oxidant effect of AM on the DSS-induced UC model. Methods : To induce ulcerative colitis, 8-week-old male Balb/c mice received 5% DSS in drinking water for 1 week. After 1 week of adaptation, mice were divided into four groups (n=8 each) for use as normal (Normal), DSS Control (Control), DSS + AM 100 mg/kg (AM100)-treatment, DSS + AM 200 mg/kg (AM200)-treatment. After 1 week of the experiment, the animals were sacrificed, and the extracted colon tissue was analyzed for protein through western blot. Results : As a result of confirming the macroscopic changes in colon tissues to confirm the therapeutic effects of AM, the decrease in colon length was suppressed in the AM treatment group compared to the control group. In addition, as a result of biochemical analysis, AM administration significantly reduced serum glutamic oxalacetic transaminase, glutamic pyruvate transaminase levels and tissue malondialdehyde levels. As a result of confirming the protein expression level through western blot, AM administration significantly decreased the expression of NADPH-related proteins such as NOX2, p22phox, and iNOS, but significantly increased the expression of SOD, catalase, and GPx-1/2. Conclusions : AM may improve DSS-induced UC in mice by modulating NADPH and antioxidant-related proteins. In conclusion, AM showed an antioxidant effect through the improvement of oxidative stress on UC.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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