• Macromolecular Research
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• 제13권1호
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• pp.39-44
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• 2005

Ion-exchange polymeric stationary phases presenting amino acid and amino groups were prepared by the surface grafting of glycidyl methacrylate onto a silica gel surface and subsequent amination. Three kinds of amino acids-L-arginine (Arg), D-lysine (Lys), and D-histine (His)-were used in this study. An ion-exchange polymeric stationary phase presenting ethylene diamine (EDA) was also prepared by surface graft polymerization. Separation of the model proteins bovine serum albumin (BSA), chick egg albumin (CEA), and hemoglobin (Hb) was performed using the amino acid- and amine-derived columns. In separating the CEA/BSA mixture, the resolution time of BSA was longer than that of CEA when using the EDA column, whereas the resolution time of BSA was shorter than that of CEA when using the Arg, Lys, and His columns. In the separation of the Hb/BSA mixture, the resolution time of BSA was longer than that of Hb in the EDA column, whereas the resolution time of BSA was shorter than that of Hb in the amino acid columns (D-Lys, L-Arg, and D-His).

• 한국식품과학회지
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• 제22권1호
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• pp.88-93
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• 1990

GLC를 이용 N-TFA n-butyl ester유도제화에 의한 아미노산 분석시 stainless steel packed column으로 효과적인 분리를 할 수 있는 고정상을 찾기 위하여 다음과 같은 2개의 column을 개발하여 표준 아미노산의 N-TFA n-butyl ester 유도체를 분석하였다. Column 1;3.36% OV-17+3.0% SE-30 on chromosorb W HP 100-120 mesh. Stainless steel column $(2m{\times}3mm\;I.D.)$ Column 2;1% NPGS+0.5% OV-17+0.5% SE-30 on chromosorb W HP 100-120 mesh. Stainless steel column $(2m{\times}3mm\;I.D.)$ Column 1에서 histidine을 제외한 19개의 아미노산 peak가 나타났으나 alanine과 valine peak는 분리되지 않았다. Colume 2에서는 15개의 아미노산이 좋은 분리를 이루었고 column 1에서 분리되지 않은 alanine과 valine.이 잘 분리되었으나 column 1에서 분리된 tryptophan, arginine 및 tyrosine이 나타나지 않았다. 분리된 모든 아미노산은 column 1, 2를 막론하고 아미노산 주입량 $1.25{\times}10^{-3}{\mu}mole-1.0{\times}10^{-2}{\mu}mole$의 범위에서 각 아미노산 peak의 높이와 내부표시제 peak 높이와의 비에 대한 주입량으로 나타낸 검정선이 선형을 나타내었고 모두 원점을 지났다. Glutamine, asparagine 및 cystine은 column 1,2에서 모두 glutamic acid, aspartic acid 및 cysteine peak와 일치하는 것으로 보아 N-TFA n-butyl ester 유도체를 만드는 과정에서 염산에 의해 각각 glutamic acid, aspartic acid 및 cysteine으로 전환되는 것으로 사료된다.

• 약학회지
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• 제28권1호
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• pp.21-23
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• 1984

High performance amino acid analyzing method has been developed for the routine analysis of taurine in preparations. Ion-exchange resin #2619 Hitachi Custom Ion-Exchange Resin, $2.6(I.D.){\times}150$(length)mm was used as column, buffer I, pH 3.3 as mobile phase. The retention time of taurine was 7 minutes. Calibration curve by peak height for standard taurine was linear from 2.5ppm to 25ppm. The reproducibility showed relative standard deviation $\pm$1.9% when analyzed 10 times for standard solution. The samples could be continuously analyzed without regenerating the resin between samples. Five samples were applied to column every 12 min. and then the resin was regenerated for 30 min. during one analyzing cycle time, 90 min. The automatic amino acid analyzer has made it possible to assay multiple samples in a relatively short period of time using the analytical magnetic program card. The high sensitivity and specificity of the analytical column of the automatic amino acid analyzer permits the routine analysis of taurine in preparations.

• 대한화학회지
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• 제39권4호
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• pp.257-265
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• 1995

시중에 시판되고 있는 우유를 전처리하여 이 우유에 포함된 유리 아미노산을 dansyl-chloride로 유도체화시켜 C-18 컬럼을 이용한 역상 LC법으로 분리한 다음 표준물 첨가법으로 정량했다. 미량의 D-아미노산의 분리에서는 LC의 Column-Switching System을 이용하였으며 비키랄 컬럼을 통과한 단실 D/L-아미노산에 $Cu(N-benzyl-L-proline)_2$를 이동상에 첨가한 키랄 분리를 수행하여 L-아미노산에서 D-아미노산을 분리 정량했다. 이 방법은 우유시료 중에 존재하는 16가지 아미노산의 정량이 가능하며 이중에 12가지의 D-아미노산이 column switching 방법을 통한 키랄 분리로 정량이 가능하다. 우유 100 mL에 총 유리 아미노선이 41.00 mg 포함되어 있음을 확인했으며, D-아미노산은 D-glutamic acid가 2.05%, D-alanine 2.93%만이 포함되어 있음을 확인했다.

• 분석과학
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• 제22권2호
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• pp.148-151
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• 2009

역상 액체 크로마토그래피에서 다당유도체 선택자가 공유결합된 키랄 컬럼인 Chiralpak IB을 사용하여 N-FMOC $\alpha$-amino acid의 광학 이성질체의 분리를 수행하였다. 공유결합된 키랄 컬럼인 Chiralpak IB에서 여러 역상 이동상 조건들이 광학분할의 선택성과 분리인자, 머무름시간에 미치는 영향을 보여주었다. 또한 역상 액체 크로마토그래피에서 N-FMOC $\alpha$-amino acid의 광학 이성질체의 분리 결과를 순상 액체 크로마토그래피 결과와 비교하였는데 순상이동상을 사용한 것보다는 대체적으로 낮은 광학분할을 보여주었다.

• KSBB Journal
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• 제30권4호
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• pp.197-201
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• 2015

Liquid chromatographic enantiomer separation of ${\alpha}$-amino acids and their methyl and ethyl esters as fluorenylmethoxycarbonyl (FMOC) derivatives was performed using a recently developed chiral column (Chiralpak IE) based on polysaccharide derivative under simultaneous UV detection and fluorescence detection. The degree of enantiomer separation of ${\alpha}$-amino acid esters as FMOC derivatives is generally higher than that of the corresponding ${\alpha}$-amino acids. Especially, ${\alpha}$-amino acid methyl esters showed the greatest enantioseparation. As this method developed in this study can be applied to determine the chemical and optical purity of ${\alpha}$-amino acids and esters, it is expected to be quite useful for their chiral separation using Chiralpak IE.

• 한국식품영양과학회지
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• 제32권3호
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• pp.320-324
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• 2003

단백질 구성 아미노산 분석을 위한 효과적인 가수분해 방법을 찾기 위하여 0.3% tryptamine을 함유한 6M formic acid와 6M HCI을 표준 아미노산과 단백질 표준품인 bovine serumn albumin 가수분해에 적용하여 표준아미노산의 회수율과 bovine serum albumin의 아미노산 조성을 분석하였고 GC에 의한 효과적인 아미노산 분석을 위하여 새로운 유도체인 butylthiocarbamyl-trimethylsilyl(BTC-TMS)유도체를 개발하여 분석한 결과는 다음과 같았다 표준아미노산의 회수율은 6M formic acid에 의한 가수분해방법이 6M HCI에 의한 가수분해 방법보다 상당히 정확하였고 특히 산 가수분해에서 tryptamine의 존재하에서도 잘 파괴되는 tryptophan의 경우 formic acid가수분해가 HCI가수분해보다 1.5배정도 높은 회수율을 보였다. Bovine serum albumin의 아미노산 조성을 583 아미노산 잔기로 환산하여 나타내었을 경우도 formic acid에 의한 가수분해가 HCI가수분해 경우보다 훨씬 정확하였고 이 때 tryptophan의 회수율도 훨씬 높게 나타났다. 다만 서열분석에서 분석되지 않는 cystine이 formic acid 가수분해시 분석되고 있어 이에 대한 정확한 검정이 필요하였다. BTC-TMS 유도체는 GC분석시 극성이 다소 낮은 DB-l7 column으로 분리가 잘되었고 재현성도 좋았으나 GC분석을 위한 대부분의 유도체에서와 마찬가지로 몇 가지 아미노산에서 두 개의 peak로 나타나는 결점이 있었다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제35권2호
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• pp.132-138
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• 1992

Methylisothiocyanate에 의한 단백질의 아미노산 배열 결정시 순차적으로 분리되어 나오는 methylthiohydantion 아미노산을 기체 크로마토그라피로 효과적으로 정성 및 정량하기위하여 새로운 silylating reagent인 N-methyl-N-(tert.-butyldimethylsily)trifluoroacetamide를 사용하여 N-tert.-butyldimethylsily MTH 유도체로 silylation 한 후 HP-1 capillary column으로 분석하였다. Cystine을 제외한 21개의 단백질 구성 아미노산을 동정할 수 있었고 지금까지 packed column에서 TMS 유도체로 동정할 수 없었던 arginine도 분리 동정되었다. 2개 이상의 peak를 나타낸 것으로는 hydroxyproline, proline, isoleucine, glycine 및 tyrosine이었고 이중 hydroxyproline은 많은 수의 peak들로 분리되었다. Lysine, histidine 및 arginine은 주입량 $5.0\;nmole{\sim}15.0\;nmole$의 범위에서 나머지는 $2.5\;nmole{\sim}7.5\;nmole$의 범위에서 상관관계를 측정한 결과 고도의 직선 상관관계를 나타내었다(p<0.001). TMS 유도체에 의한 분석은 많은 불순 peak들 때문에 정량분석에 이용할 수 없었다.

• 약학회지
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• 제52권1호
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• pp.79-84
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• 2008

Alismatis Rhizoma has been used as diuretics and antiphlogistics in the Chinese oriental medicine. A trypsin inhibitor was isolated from Alismatis Rhizoma using DEAE ion exchange column, trypsin affinity column, and FPLC chromatography, and its activity and characteristics were studied. The purifed Alismatis Rhizoma trypsin inhibitor (ARTI) was estimated to be about 22 kDa. The sequence determination on N-terminal amino acid residues and 84 amino acid residues has been completed, yet no homology has been found with trypsin inhibitors reported at NCBI. ARTI did not show inhibitory activities on chymotrypsin and elastase, however it exhibited a significant inhibitory activity on bovine trypsin, and formed a complex with rat liver 10-formyltetrahydrofolate dehydrogenase.

• KSBB Journal
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• 제29권6호
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• pp.426-431
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• 2014

pH controlled batch reactor and bubble column reactors have been developed in this research. They were used to produce high concentration of GABA and to determine optimal pH for GABA production. Glutamate decarboxylase (GAD) was isolated from recombinant E. coli and used for GABA production from monosodium glutamate (MSG). pH control was inevitable because the pH increased with MSG consumption. GAD showed highest activity at acidic conditions at pH 5.5 but the optimal pH for GABA production was pH 6.0. When 1.5 mole of MSG was used as reactant, the 1.05 mole of GABA was produced after 10 hrs batch reaction. Using bubble column reactors, 80 % of MSG was converted to GABA for 6 hrs reaction and 1.2 mole of GABA was produced.