단백질 분해효소는 아미노산간에 존재하는 peptide결합을 절단하는 효소로 산업적으로 많이 사용된다. 이러한 단백질 분해효소의 새로운 공급원을 찾기 위하여 체외 단백질 분해효소를 생산하는 세균을 둥해 심층수로부터 집식배양으로 분리하였다. 이들 중 빠른 성장과 skim milk를 첨가한 배지에서 가장 큰 투명환을 보여준 균주를 HJ19로 명명하였다. 분리균의 형태학적, 생리생화학적 특성과 16S rRNA gene의 염기서열을 조사한 결과 Micrococcus sp.에 속하는 것으로 나타났다. 분리된 Micrococcus sp. HJ19는 $10^{\circ}C$에서는 자라지 못하였으며 $20^{\circ}C$부터 생육과 효소활성을 보여주었다. 최적 생육 온도는 $37^{\circ}C$였으며, 효소 활성은 $30^{\circ}C$에서 약 480 unit/ml의 활성을 보여 주었다.
변질된 팥앙금에서 분리한 균주는 광학 및 전자현미경을 통하여 관찰한 결과 그람양성 간균으로 포자를 형성하고 형성된 집락은 원형으로 점질성의 물질을 생산하는 mucoid type이었으며, 표면은 smooth 하였고 광택을 나타내었다. 미생물 동정 시스템($MicroLog^{TM}$ System, Release 4)인 VITEK 2 COMPACT을 이용하여 분리된 균주의 46개의 생화학적 분석을 비교한 결과 팥앙금의 부패 원인균은 Bacillus subtilus로 동정 (97.0%)되었으며, 보다 더 정확한 동정을 위하여 부패균의 세포벽 지방산 조성을 분석하여 Midi sherlock시스템의 databank와 비교 분석시 그 유사성이 0.724로 분석되었다. Bacillus subtilus의 포자의 D-value는 $115^{\circ}C$에서의 4.85분이 었고, $121^{\circ}C$에서는 0.69분, $125^{\circ}C$에서는 0.48분이었으며, Z-value는 $9.71^{\circ}C$이었다. $45^{\circ}C$에서 수분활성도에 따른 분리균의 생육 상태를 관찰한 결과 수분활성도 0.92이하에서는 균이 증식되지 않았고, 0.94에서는 증식되는 것으로 관찰되었다.
자연계에서 분리한 Pseudomonas에서 크기가 매우 큰 plasmid (약 180 megadaltons:를 분리하였다. 이 plasmid는 기존의 plasmid 검출방법보다 더 온화한 조건에서 분리되었다. Alkalin., sodium dodecyl sulfate (pH 12. 45)를 사용하여 chromosomal DNA를 변성시킨 뒤 $55^{\circ}C$로 열처리 하여 covalently closed circular DNA 의 손실을 최대한으로 방지하였고, polyethylene glycol을 최종농도 10%로 첨가하여 plasmid DNA를 선택적으로 농축하였다. 한편, 이 plasmid는 mitomycin C를 처리하여 얻은 cured sitrains에서는 나타나지 않아 salicylate를 분해하는 새로운 plasmid로 확인되었다.
본 연구는 제초제의 일종인 glyphosate에 저항성을 갖는 균주를 분리하고 그 유전자를 cloning 함으로써 glyphosate 에 저항성을 갖는 유용작물의 인위적 생성 가능성을 모색코자 하였다. 제초제가 처리된 토양환경으로 부터 glyphosate에 고도의 저항성을 나타내는 균주를 분리하였다. 분리된 균주를 동정한 결과 Pseudomonas cepacia로 밝혀졌으며 10mM의 glyphosate가 처리된 환경에서도 강한 내성을 갖는 것으로 나타났다. Glyphosate 저항성 유전자는 염색체상에 존재하는 것으로 판명되었으며 저항성 유전자를 클로닝한 결과 glyphosate 에 저항성을 나타내는 클론 (E. coli THG-101)을 얻었으며 P. cepacia 에서 유래된 glyphosate 저항성 유전자를 갖고 있는 plasmid pGR19를 확인하였다.
본 연구는 대한민국 서해안 갯벌로부터 알칼리성 단백질 분해 효소를 생산하는 세균을 분리하고 분리된 세균으로부터 생산되는 단백질 분해 효소의 생화학적 특징을 조사하는 것이다. 분리 균주는 16S rRNA의 염기 서열, 그람 염색과 전자 현미경사진을 통해 Celidibacter sp. HK-1으로 명명하였다. 분리 균주의 증식과 pretense 생산을 위한 최적 온도는 $25^{\circ}C$이었다. 분리 균주의 증식은 접종 10시간후에 stationary phase에 도달하였다. 효소 생산은 14시간 후 최대 값을 보였다. 효소 활성의 최적 온도와 pH는 각각 $45^{\circ}C$와 pH 9이었다. Pretense의 분자량은 약 50KD이었고 pretense의 부분적인 아미노산 서열은 Ala-Try-Ala-Leu-Asn-Thr-Ser-Val-Thr-Glu-Thr-Phe-Ala-Lys이었다. Protease의 부분적인 아미노산 서열은 Streptomyces avemitilis의 pretense와 높은 상동성을 보였다.
η$_{evap}$분자량에 따라 다양한 생리활성을 나타내는 아가리쿠스버섯에서 분리한 조단백다당류를 고부가가치 기능성 소재로 개발하기 위하여 막분리 및 분무건조 공정에 따른 특성을 조사하였다. 아가리쿠스버섯 조단백다당류를 분자량 크기에 따라 여과하는 동안 공정온도에 따른 투과플럭스의 변화는 10 kDa와 130 kDa 모두에서 유사하였는데, 막분리 온도 및 압력이 증가함에 따라 비례적으로 증가하였으며, 4$0^{\circ}C$에서의 투과플럭스가 가장 높았다. 시간에 따른 투과플럭스의 변화는 막분리 30분 경과시 급속히 감소하였으며, pore size가 10 kDa와 150 kDa일 때 공정압력이 각각 1.2kgf/$\textrm{cm}^2$와 2kgf/$\textrm{cm}^2$에서 가장 높았다. 한외여과 후 아가리쿠스버섯 조단백다당류의 점도는 여과 전 13.9cP에서 여과후 10kDa이 하와 10∼150 kDa구간은 각각 10.8, 11.9cP로 점도가 저하되었으나, 150 kDa이상은 20.1cP로 점도가 증가되었다. 분자량 크기가 다른 3가지 분획물에 대한 분무건조 공정에서의 열효율성은 가열공기온도, 시료공급속도 및 농도가 증가할수록 열효율성이 증가함을 알 수 있었으며, 시료공급속도가 가장 중요한 영향인자임을 확인하였다.다.
핵융합의 원료로 고려되고 있는 삼중수소는 $^{6}$Li(n,$\alpha$)T의 반응을 이용하여 얻을 수 있는데 이때 이 반응의 정보를 보다 많이 알기 위해서는 삼중수소의 분리는 물론 헬륨의 분리도 필요하다. 이를 위해서 MnC1$_2$로 코팅된 알루미나 컬럼을 이용한 방사선 가스크로마토 그래피의 방법을 이용하였다. 기존의 알루미나 컬럼으로는 수소 동위원소들의 분리가 가능하였는데 헬륨동위원소의 경우 컬럼내에서 같은 체류시간 때문에 분리가 어렵다 이를 위해서 두개의 다른 캐리어 가스를 사용함으로서 이를 분리하였다. 본 연구는 두개의 다른 캐리어 가스를 사용하여 수소 동위원소의 분리는 물론 헬륨 동위원소를 분리하였다. 헬륨동위원소의 분리중 두 원소가 서로 Azeotrophy의 성질을 갖는다는 것을 발견하였으며 따라서 헬륨 동위원소의 분리를 위해서는 반드시 서로 다른 두개의 캐리어 가스를 사용해야만 가능하다는 것을 밝혔다
막분리기술은 분릿대상 성분과 분리매체와의 분자 사이의 힘의 차를 이용하여 분리하는 기술이기 때문에 분리특성을 고도로 기능화시키는 것이 가능하다. 또한 막분리 기술 자체가 에너지 절약기술이기 때문에 차세대 분리기수로서 중요한 역할을 할 수 있다. 이와 같은 분리기술은 역삼투법 등의 수용액계와 상온 부근의 기체분리막은 실용화되어 있다. 그러나 비수용액계 또는 고온 공정에서 특수한 조건하에서 고기능성 분리성능을 가지는 막의 개발에 대한 요구가 증대되고 있다. 이에 대응하여 내열성, 내용제성이 우수한 고분자에 의한 분리성능을 요구한다. 특히 근년에는 방향족 polyimide 수지가 주목을 받고 있으며, 내열성, 내구성 및 기계-전기적 특성이 우수한 재질로 광범위하게 사용되고 있다. 이것은 분자 구성기가 가지는 결합에너지가 크고, 분자의 규칙성에 의한 유리전이온도가 높아서 250-300$\circ$C의 고온에서도 사용이 가능한 재료로서 한외여과막과 기체분리막으로 시판되고 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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