Kim, Jeeyong;Lim, Da Hye;Mihn, Do-CiC;Nam, Jeonghun;Jang, Woong Sik;Lim, Chae Seung
Parasites, Hosts and Diseases
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v.59
no.1
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pp.77-82
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2021
As malaria remains a major health problem worldwide, various diagnostic tests have been developed, including microscopy-based and rapid diagnostic tests. LabChip real-time PCR (LRP) is a small and portable device used to diagnose malaria using lab-on-a-chip technology. This study aimed to evaluate the diagnostic performance of LRP for detecting malaria parasites. Two hundred thirteen patients and 150 healthy individuals were enrolled from May 2009 to October 2015. A diagnostic detectability of LRP for malaria parasites was compared to that of conventional RT-PCR. Sensitivity of LRP for Plasmodium vivax, P. falciparum, P. malariae, and P. ovale was 95.5%, 96.0%, 100%, and 100%, respectively. Specificity of LRP for P. vivax, P. falciparum, P. malariae, and P. ovale was 100%, 99.3%, 100%, and 100%, respectively. Cohen's Kappa coefficients between LRP and CFX96 for detecting P. vivax, P. falciparum, P. malariae, and P. ovale were 0.96, 0.98, 1.00, and 1.00, respectively. Significant difference was not observed between the results of LRP and conventional RT-PCR and microscopic examination. A time required to amplify DNAs using LRP and conventional RT-PCR was 27 min and 86 min, respectively. LRP amplified DNAs 2 times more fast than conventional RT-PCR due to the faster heat transfer. Therefore, LRP could be employed as a useful tool for detecting malaria parasites in clinical laboratories.
Jong-Soo LEE;Weon-Gyu KHO;Hyeong-Woo LEE;Min SEO;Won-Ja LEE
Parasites, Hosts and Diseases
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v.36
no.4
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pp.241-248
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1998
A result of national malaria surveillance in Korean civilians was described. Since a case of indigenous vivax malaria was detected in 1993, a total of 2,198 cases was confirmed by blood smear up to 1997. Of them, 1,548 cases were soldiers serving in the demilitarized zone (DMZ), while 650 cases were civilians. Number of civilian cases was 3 in 1994, 19 in 1995, 71 in 1996, and 557 in 1997. Of them, 239 were ex-soldiers who discharged after military service in the prevalent areas such as Paju, Yonchon, Kimpo, Kangwha, Tongduchon in Kyonggi-do and Chorwon in Kangwon-do while 308 patients were civilian residents in the prevalent areas. Seventy-two patients, living nationwide, had a history of visiting the prevalent areas during transmission season. Only 32 civilian patients denied any relation with the prevalent areas. As a whole, a half of the civilian cases was diagnosed when living in non-prevalent areas. Male patients in their twenties was the highest in number. Annual parasite index is steadily elevated in residents living in the prevalent areas. Monthly incidence showed an unimodal distribution, forming a peak in August. Ex-soldiers exhibited a delayed incubation ranging from 153 to 452 days ($279{\pm}41$ days). The time required for diagnosis was shortened from 23.6 days in 1995 to 13.7 days in 1997. Although the current epidemic of vivax malaria started as a border malaria, it seems highly probable that vivax malaria is established in the local areas and responsible for at least a part of transmission.
Lee, Eun Jin;Chang, Hyen Ho;Lee, Chong Guk;Cho, Chong Rae
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.46
no.8
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pp.821-825
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2003
Malaria is known to have been eradicated for a few decades through the persistent efforts of the national health program in South Korea. However, malaria caused by Plasmodium vivax has started to reappear incidiously among military personnel near to the De-militarized Zone since 1993. From that time on the number of malarial cases have increased abruptly year by year. However, congenital malaria in a neonate is extreamly rare in Korea. We experienced one case of malaria in a neonate who was born from a mother affected by malaria. This neonate was born at $33^{+3}$ weeks of gestational age. Here we present this case with a brief review of the literature.
A family of calcium-dependent protein kinases (CDPKs) is a unique enzyme which plays crucial roles in intracellular calcium signaling in plants, algae, and protozoa. CDPKs of malaria parasites are known to be key regulators for stage-specific cellular responses to calcium, a widespread secondary messenger that controls the progression of the parasite. In our study, we identified a gene encoding Plasmodium vivax CDPK4 (PvCDPK4) and characterized its molecular property and cellular localization. PvCDPK4 was a typical CDPK which had well-conserved N-terminal kinase domain and C-terminal calmodulin-like structure with 4-EF hand motifs for calcium-binding. The recombinant protein of EF hand domain of PvCDPK4 was expressed in Echerichia coli and a 34 kDa product was obtained. Immunofluorescence assay by confocal laser microscopy revealed that the protein was expressed at the mature schizont of P. vivax. The expression of PvCDPK4-EF in schizont suggests that it may participate in the proliferation or egress process in the life cycle of this parasite.
Erythrocytes deficient in glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) is more susceptible to oxidative damage from free radical derived compounds. The hemolysis triggered by oxidative agents such as primaquine (PQ) is used for the radical treatment of hypnozoites of P. vivax. Testing of G6PD screening before malaria treatment is not a common practice in Thailand, which poses patients at risk of hemolysis. This retrospective study aimed to investigate the prevalence of G6PD in malaria patients who live in Southern Thailand. Eight hundred eighty-one malaria patients were collected for 8-year from 2012 to 2019, including 785 (89.1%) of P. vivax, 61 (6.9%) of P. falciparum, 27 (3.1%) of P. knowlesi, and 8 (0.9%) of mixed infections. The DiaPlexC genotyping kit (Asian type) and PCR-RFLP were employed to determine the G6PD variants. The result showed that 5 different types of G6PD variants were identified in 26 cases (2.9%); 12/26 (46.2%) had Mahidol (487G>A) and 11/26 (42.3%) had Viangchan (871G>A) variants, while the rest had Kaiping (1388G>A), Union (1360C>T), and Mediterranean (563C>T) variants. G6PD Songklanagarind (196T>A) variant was not found in the study. Our result did not show a significant difference in the malaria parasite densities in patients between G6PD-deficient and G6PD-normal groups. According to our findings, testing G6PD deficiency and monitoring the potential PQ toxicity in patients who receive PQ are highly recommended.
Malaria is endemic in the Cukurova region while it is sporadic in other regions of Turkey. Therefore, the laboratory and clinical diagnosis of malaria is important for the treatment of malaria. In this study, 92 blood samples that were taken from the suspected malaria patients for routine diagnosis in a period of 10 years between 1999 and 2009 were analyzed. All of these blood samples were examined by microscopic examinations using Giemsa-stained thick blood films, nested PCR, and real-time PCR. The sensitivity-specificity and positive-negative predictive values for these diagnostic tests were then calculated. It was found that the positive predictive values of microscopic examination of thick blood films, nested PCR, and real-time PCR were 47.8%, 56.5%, and 60.9% for malaria, respectively. The real-time PCR was found to have a specificity of 75% and sensitivity of 100%, while specificity and sensitivity of nested PCR was found 81.2% and 97.7% according to the microscopic examination of thick blood films, respectively.
Vivax malaria reemerged in Korea in 1993 and the outbreak has been continued with fluctuating numbers of annual indigenous cases. Understanding the nature of the genetic population of Plasmodium vivax circulating in Korea is beneficial for the knowledge of the nationwide parasite heterogeneity and in the implementation of malaria control programs in the country. Previously, we analyzed polymorphic nature of merozoite surface protein-1 (MSP-1) and MSP-$3{\alpha}$ in Korean P. vivax population and identified the Korean P. vivax population has been diversifying rapidly, with the appearance of parasites with new genetic subtypes, despite the recent reduction of the disease incidence. In the present study, we developed simple PCR-RFLP methods for rapid subtyping of MSP-1 and MSP-$3{\alpha}$ of Korean P. vivax isolates. These PCR-RFLP methods were able to easily distinguish each subtype of Korean P. vivax MSP-1 and MSP-$3{\alpha}$ with high accuracy. The PCR-RFLP subtyping methods developed here would be easily applied to massive epidemiological studies for molecular surveillance to understand genetic population of P. vivax and to supervise the genetic variation of the parasite circulating in Korea.
Detailed description of malaria in low transmission areas is crucial for elimination. The current study aimed to provide a comprehensive description for malaria transmission in Jazan, a low transmission district, southwestern Saudi Arabia. Patients at a tertiary care hospital were recruited in our study between August 2016 and September 2018. Malaria diagnosis was performed through a species-specific nested polymerase chain reaction (nested PCR), microscopy and Paramax-$3^{TM}$ rapid detection test (RDT). Malaria was detected in 30 patients by the PCR, with point prevalence of 10.9%. Of these malaria infections, 80% was imported, 26.6% was asymptomatic and 23.3% was sub-microscopic. Malaria was reported throughout the year, with February/March and September/October peaks. Infection was significantly more in males than in females (P=0.01). Likewise, infections were detected more in febrile than in non-febrile patients (P=0.01). Adult aged 15-24 years, fever and travel were identified as high-risk factors. Malaria was primarily attributed to Plasmodium falciparum mono-infections, followed by P. vivax mono-infections and lastly to falciparum/vivax mixed infections accounting 76.6%, 16.6%, and 6.6% of PCR-confirmed malaria cases, respectively. The nested PCR was superior to the smear microscopy (sensitivity 76.6%; specificity 100%) and the RDT (sensitivity 83.3%, specificity 94.2%). The overall percent agreement between microscopy and the RDT was 92.7% (kappa=0.63). High proportion of imported malaria including sub-microscopic and sub-patent cases were described. We suggest that incorporation of molecular tool into the conventional malaria diagnosis is beneficial in Jazan district.
On .lune and .truly 1994, two cases of vivax wl,Blaria were consecutively diagnosed at the Yongsan Hospital, Chung-Ang University in Seoul. The first patient was a soldier sewing in western parts of the demilitarized zone (DMZ) while the second case was a resident of a village near DMZ. Neither patients had history of being abroad. Republic of Korea (ROK) has been free of malaria since the mid-1970s except for imported cases. The two ivfn malaria cases, together with an additional patient detected in 1993, occurred in relatively small areas near DMZ. This necessitated an epidemiologic surveillance. When medical records and blood smears in the areas were examined, no other cases were found. Of 7,723 mosquitoes collected by a black light trap for ho nights in June, 7,066 (91.5%) were Anopheles sinensis. In order to evaluate a significance of the recent malaria occurrence, a surveillance system should be operated in the areas.
Microscopy is considered as the gold standard for malaria diagnosis although its wide application is limited by the requirement of highly experienced microscopists. PCR and serological tests provide efficient diagnostic performance and have been applied for malaria diagnosis and research. The aim of this study was to investigate the diagnostic performance of nested PCR and a recently developed an ELISA-based new rapid diagnosis test (RDT), NovaLisa test kit, for diagnosis of malaria infection, using microscopic method as the gold standard. The performance of nested-PCR as a malaria diagnostic tool is excellent with respect to its high accuracy, sensitivity, specificity, and ability to discriminate Plasmodium species. The sensitivity and specificity of nested-PCR compared with the microscopic method for detection of Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax, and P. falciparum/P. vivax mixed infection were 71.4 vs 100%, 100 vs 98.7%, and 100 vs 95.0%, respectively. The sensitivity and specificity of the ELISA-based NovaLisa test kit compared with the microscopic method for detection of Plasmodium genus were 89.0 vs 91.6%, respectively. NovaLisa test kit provided comparable diagnostic performance. Its relatively low cost, simplicity, and rapidity enables large scale field application.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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