해수로부터 Vibrio속 세균 21균주를 분리하여 이들의 표현형적 특성을 조사하고 자동화동정 시스템인 Vitek과 MIDI를 이용하여 동정하고 결과를 비교하였다. Vitek과 MIDI를 이용한 Vibrio속 세균의 동정시 일치하는 결과는 단 1건(TL33, V. alginolyticus)이었으며,Vitek의 경우 21균주중 16균주(76%), MIDI의 경우 21균주 중 6균주 (29%)가 동정되었다. Vibrio속 세균의 동정에는 MIDI에 비하여 Vitek시스템이 유용한 것으로 사료된다.
Acinetobacter baumannii is an aerobic, gram-negative and glucose-non-fermenting bacterium, which has emerged as a serious opportunistic pathogen. Many clinical microbiology laboratories use the Vitek 2 system for the routine antimicrobial susceptibility testing process, including testing on A. baumannii isolates. However, in case of amikacin, it is now recommended to perform additional antimicrobial susceptibility testing for A. baumannii strains due to the relatively lower minimum inhibitory concentration (MIC) in the Vitek 2 system compared to conventional reference methods. In our study, we assessed MIC for amikacin susceptibility testing of A. baumannii isolates in the Vitek 2 system, the agar dilution, Etest, and disk diffusion method. We collected 40 gentamicin-resistant, A. baumannii strains (amikacin MIC by Vitek 2:${\leq}2{\mu}g/mL$, 2 isolates; $4{\mu}g/mL$, 34 isolates; $8{\mu}g/mL$, 4 isolates) from a University hospital and compared the Vitek 2 system to other reference methods for testing susceptibility to amikacin. The Vitek 2 system showed major errors in all of the 40 isolates, yielding a low MIC. The results of our study strongly suggested that the Vitek 2 system was not a reliable method to test the MICs of gentamicin; ranging from ${\geq}16{\mu}g/mL$ for amikacin susceptibility. Other tests, such as agar dilution, Etest, or disk diffusion methods, should be paralleled to determine the MIC of amikacin in A. baumannii.
본 연구에서는 혈액배양에서 신속한 세균 동정과 항생제 감수성 시험(antibiotic susceptibility test, AST) 결과를 얻기 위해 혈액배양 양성배지에서 계대배양 없이 세균을 VITEK MS와 VITEK 2 시스템에 직접 접종하였으며, 도출된 결과를 표준방법과 비교하여, 그 신뢰도와 정확도를 평가하였다. 혈액배양 양성시료에서 직접 결과는 표준방법 AST 결과와 비교하였을 때, 97.9% (1,936/1,978)의 전체적인 일치율을 보였다. 그람양성 세균은 97.2% (1,051/1,081)의 일치율을 나타냈으며, 매우 중대한 오차율은 0.5% (5/1081), 중대한 오차율은 0.1% (1/1,081), 사소한 오차율은 2.2% (24/1,081)의 결과를 나타냈다. 두 방법 간 불일치의 주요 원인균은 Staphylococcus epidermidis이었고, 그 중 gentamicin (N=9)과 fusidic acid (N=8)에서 높은 오류를 나타냈다. 그람음성 세균 중 전체적인 일치율은 98.6%(885/897)였고, 사소한 오류는 1.4% (12/897)였다. 그람음성세균의 불일치 주요 원인균은 Escherichia coli와 Pseudomonas aeruginosa였으며, 그 중 amoxicillin/clavulanic acid(N=3)에서 높은 오류를 나타냈다. 직접법에 의한 AST 방법은 CLSI 기준을 충족하였고, 결과 보고 시간을 24시간 단축할 수 있었지만, 매우 큰 오류가 있는 항생제에 대해서는 디스크확산법으로 추가적인 검사를 시행한 후 보고해야 한다는 것을 알 수 있었다. 이러한 연구 결과들을 토대로 혈액배양 시료에서 직접 AST를 실시하는 방법은 정확하고 결과를 보고하는데 까지 소요되는 시간을 크게 감소시킬 수 있기 때문에 환자의 정확하고 효율적인 치료에 유용하게 활용될 수 있을 것으로 사료된다.
Extended spectrum β-lactamase (ESBL) generated Enterobacteriaceae including Escherichia coli is responsible for resisting antibiotics, which is clinical problem. This study was performed to investigate the isolation rates of 111 strains having positive of VITEK ESBL test 111 ESBL-strains in each month and season and statistically to determine their patterns of antibiotic test. One hundred eleven ESBL-strains were collected among 1,688 strains of E. coli isolated from various clinical specimen of one general hospital in Busan during 2002 to 2003. Month rates of ESBL-strains were 0% to 13.3%, while the seasonal rates were highest at autumns during two years. The resistance to ampicillin, cefazolin, azteronam, ceftriaxone, and cefepime were 100% in 2002. In ampicillin and cefazolin the resistances were 100% during the two years. There were significant differences of cefoxitin and piperacillin/tazobactam between the two years but not significant between specimens. Four groups were divided according to the pattern of resistance and then the highest group had 93∼100% of the resistance to 8 drugs but not resistant to imipenem.
Kim, Tae-Hyoung;Kweon, Oh Joo;Kim, Hye Ryoun;Lee, Mi-Kyung
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제26권12호
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pp.2206-2213
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2016
Recently, several studies have revealed that commercial microbial identification systems do not accurately identify the uncommon causative species of candidiasis, including Candida famata, Meyerozyma guilliermondii, and C. auris. We investigated the accuracy of species-level identification in a collection of clinical isolates previously identified as C. famata (N = 38), C. lusitaniae (N = 1 2), and M. guilliermondii (N = 5) by the Vitek 2 system. All 55 isolates were re-analyzed by the Phoenix system (Becton Dickinson Diagnostics), two matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry analyzers (a Vitek MS and a Bruker Biotyper), and by sequencing of internal transcribed spacer (ITS) regions or 26S rRNA gene D1/D2 domains. Among 38 isolates previously identified as C. famata by the Vitek 2 system, the majority (27/38 isolates, 71.1%) were identified as C. tropicalis (20 isolates) or C. albicans (7 isolates) by ITS sequencing, and none was identified as C. famata. Among 20 isolates that were identified as C. tropicalis, 17 (85%) were isolated from urine. The two isolates that were identified as C. auris by ITS sequencing originated from ear discharge. The Phoenix system did not accurately identify C. lusitaniae, C. krusei, or C. auris. The correct identification rate for 55 isolates was 92.7% (51/55 isolates) for the Vitek MS and 94.6% (52/55 isolates) for the Bruker Biotyper, as compared with results from ITS sequencing. These results suggest that C. famata is very rare in Korea, and that the possibility of misidentification should be noted when an uncommon Candida species is identified.
Bovine mastitis (BM) has resulted in enormous economic loss in the dairy industry and coagulase-negative staphylococci (CNS) have caused subclinical BM. Although VITEK 2 GP ID card (VITEK 2) has been used for CNS identification, the probability of identification varies. The rpoB sequence typing (RSTing) method has been used for molecular diagnosis and epidemiology of bacterial infections. In this study, we undertook RSTing of CNS and compared the results with those of VITEK2 and 16S rRNA gene sequencing. As compared VITEK2, the molecular-based methods were more reliable for species identification; moreover, RSTing provided more molecular epidemiological information than that from 16S rRNA gene sequencing.
본 연구에서는 계대배양과 세균 동정 시험에 소요되는 시간을 단축하고, 혈류감염의 새로운 검사 방법을 모색하여 간단하고 신속 정확한 동정 결과를 도출할 목적으로 질량분석기를 이용하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 혈액배양에서 한 가지 세균만 배양된 검체는 총 254개였으며, Vitek 2에서 208주(81.8%)의 세균을 동정되었으며, 45주는 동정되지 않았다. 동정된 세균 중 그람양성 세균이 146개(57.5%), 그람음성 세균이 108개(42.5%)이었다. 전체적으로 233개는 종(species) 수준까지 동정 되었으며, 21개는 속(genus)수준까지 동정 되었다. 동정 오류는 Propionibacterium acnes를 Clostridium bifermentans로 동정 되었다. 균종별로는 enterobacteriaceae, glucose non-fermentative bacilli (GNFB), staphylococci의 정확도는 각각 81/83 (97.6%), 12/15 (80.0%), 72/85 (84.7%)로 나타났다. Vitek 2에 의한 표준법과 Vitek MS에 의한 직접법에 의한 동정의 일치율은 81.8%이었으며, 45주는 동정되지 않았다. 동정되지 않은 세균들의 대부분은 그람양성 세균(n=37)이었고, 그람양성 세균은 streptococci (14), coagulase-negative staphylococci (CNS) (11), enterococci (3), Staphylococcus aureus (2), Micrococcus spp. (2), Bacillus spp. (2) 그리고 Actinomyces odontolyticus, Finegoldia mag na, Peptostreptococcus spp.가 각각 1건씩 이었다. 결과 보고 시간은 기존의 검사 방법보다 24~72시간까지 단축되었다. 산소성 배양과 무산소성 배양 사이의 동정률의 차이는 없었으나 무산소성 배양을 사용하면 용해 과정이 필요 없어 검체 준비 시간을 단축할 수 있었다. 이상의 연구 결과로 혈액배양병에서 직접 동정하는 방법은 정확하고 결과 보고 시간이 신속하여 환자의 치료에 매우 유용할 것이라 생각된다. 향후 추가적인 연구에서는 본 연구에서 정확성이 부족했던 사슬알균(streptococci)과 혈장응고효소 음성 포도알균(CNS)을 동정하기 위한 방법을 더욱 개선할 필요가 있을 것으로 사료된다.
Vibrio 속에 속한 세균에 의한 식중독은 오염된 해산물 식품의 섭취로 인하여 빈번하게 발생하고 있다. 그러므로 해산물을 날것으로 섭취하는 한국인의 특성을 고려할 때, 빠르고 정확한 Vibrio 검출기술은 식품위생 및 공중보건의 측면에서 매우 중요하다. 이와 관련하여 본 연구에서는 전통적인 배지를 이용한 동정방법의 단점을 보완할 수 있는 생화학적 방법인 Vitek 2 system방법과 분자생물학적 방법인 species-specific PCR 방법을 사용하여 얻은 동정결과를 비교 평가하고자 하였다. 본 연구에서는 5개의 Vibrio 표준균주와 16S rRNA gene sequencing 결과에 의하여 Vibrio 속으로 확인된 24개의 분리균주가 이용되었다. Vitek 2 system방법을 이용한 경우, 이와 같이 본 연구에 사용된 29개 균주 중 Vibrio 표준균주 2개(2/5, 40%), 16S rRNA gene sequencing 결과 Vibrio 속으로 확인된 분리균주 15개(15/24, 62.5%) 등의 총 17개 균주(17/29, 58.6%)가 Vibrio 종으로 동정되었다. 그리고 species-specific PCR방법을 이용한 경우, 위의 29개 균주 중 Vibrio 표준균주 5개(5/5, 100%), 16S rRNA gene sequencing 결과 Vibrio 속으로 확인된 분리균주 16개(16/24, 66.7%) 등의 총 21개 균주(21/29, 72.5%)가 Vibrio 종으로 동정되었다. Vitek 2 system방법과 species-specific PCR방법을 이용하여 동정된 결과를 비교하였을 때 표준균주 중 V. parahaemolyticus, V. mimicus 등의 2개(2/5, 40%), 새우분리균주 24개 중에서 16S rRNA gene sequencing 결과 Vibrio 속으로 확인된 분리균주 7개 (7/24, 29.2%) 등의 총 9개(9/29, 31%) 균주들에 대한 동정결과만이 일치하였다.
이 연구에서 VITEK 2 시스템을 사용하여 $6{\mu}g/mL$ vancomycin이 첨가된 Enterococcosel (EV6 agar에서 배양한 327개의 검체 중 74개의 분리균(22.6%)으로 확인하였다. E. faecium은 55주(74.3%), E. gallinarum 16주(21.6%), E. casseliflavus 2주(2.7%) 및 E. avium 1주(1.4%)로 확인되었다. E. faecium의 55가지 표현형 중 vanA가 42주(76.4%), vanB가 9주(16.4%), vanC 표현형이 4주(7.3%)로 나타났다. E. gallinarum 16주와 E. casseliflavus 2주 모두 vanC 표현형을 보였으며 E. avium 1주는 vanB 표현형을 나타내었다. EV4에서만 증식된 E. faecium 1주는 VITEK2 시스템을 이용한 항균제 감수성 검사 결과 vancomycin과 teicoplanin에 모두 감수성이었고 vancomycin 내성 표현형 유전자는 PCR에 의해 검출되지 않았다. 총 327 검체를 $6{\mu}g/mL$ vancomycin (EV6 broth)을 첨가 한 Enterococoscosel broth에서 배양하여 120 균주(36.7%)가 분리되었다. 120균주에서 다중 중합 효소 연쇄반응에 의한 반코마이신 내성 유전형 실험을 실시한 결과, vanA가 51주(42.5%), vanA와 vanC가 5주(4.2%), vanC가 18주(15%), 나머지 46주(38.3%)에서는 vancomycin 내성 유전형 유전자는 검출되지 않았다.
Sin Chin-Su;Lee Gyu-Sang;Lim Kwan-Hun;Kim Jong-Bae
대한의생명과학회지
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제11권4호
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pp.447-453
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2005
A total of 108 strains of MRSA (Methicillin-resistant Staphylococcus aureus) clinical isolates was collected from $121^{st}$ general hospital (U.S. military hospital), Korean healthcare facility from January to March in 2005 and Wonju Christian hospital in 1999. Antimicrobial susceptibility test by Vitek System and MIC test using oxacillin and cephalothin stripes by E-test were executed. PCR based detection of mecA gene was performed on the all of MRSA clinical isolates, too. MRSA clinical isolates were characterized with antimicrobial resistance patterns, PCR based detection of mecA gene and validation of the multiplex PCR strategy of SCCmec among clinical isolates.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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