Viral nervous necrosis (VNN) is a serious disease of sevenband grouper Epinephelus septemfasciatus in Korean aquaculture farms. However, we suggest the following preventative methods for hatcheries: 1) disinfecting rearing water, 2) selecting spawners via ELISA and PCR, 3) selecting eggs via PCR, 4) disinfecting fertilized eggs, and 5) proper facilities management. When these methods are implemented, nervous necrosis virus (NNV)-free fish are produced because vertical and horizontal transmission is prevented. However, horizontal transmission of NNV through rearing seawater sourced from the environment during grow-out stages in sea cages can still occur. Live NNV vaccines with a low rearing temperature or Poly(I:C) immunization are very effective at preventing horizontal transmission of NNV in rearing farms. Furthermore, even after VNN is contracted, fish mortality can be reduced by administering Poly(I:C).
본 연구에서는 2006-2008년 남해안 일대의 해상가두리에서 사육중인 능성어에서 발생하는 viral nervous necrosis (VNN)의 발생양상을 조사하였다. VNN은 사육 수온이 $24-26^{\circ}C$ 범위인 8월부터 발생하기 시작하여 수온이 $20-25^{\circ}C$ 범위인 9-10월까지 지속되었고, 성어보다는 치어에서 폐사율이 높게 나타나는 것으로 확인되었다. 폐사되는 패턴으로는 급성으로 인한 대량폐사와 소량으로 지속적으로 폐사되는 경우가 확인되었다. 능성어로부터 분리된 NNV 분리주들의 coat protein gene을 계통분석한 결과, 분리주들은 모두 RGNNV 유전자형에 속하였다. 이상의 결과로 능성어 양식장에서의 VNN은 RGNNV type의 NNV에 의해 여름철 7-9월(사육수온: 약 $24^{\circ}C$)에 치어뿐만 아니라 성어에서 발생하는 것으로 확인되었다.
1999년 10월에서 11월 사이에 남해안 일대의 홍민어 종묘 생산장에서 20~30열령의 치어가 척추만곡 및 이상유영을 하며 대량 폐사하였다. 병어는 특이 외부 증상이 없었고, 높은 누적폐사량이 바이러스 질병으로 의심되어, 조직학적 및 분자생물학적인 검사를 행하여 폐사원인을 확인하였다. 폐사개체의 조직을 H-E 염색하여 관찰한 결과 뇌와 안구의 신경세포에서 공포와 괴사가 관찰되었고, 전자현미경 관찰에서는 안구와 뇌에서 바이러스 입자가 관찰되었다. RT-PCR 결과에서는 ${\fallingdotseq}426$ bp의 DNA 단편을 확인할 수 있었다. 이러한 결과로 홍민어에서 발생한 대량폐사는 바이러스성 신경괴사증(VNN)으로 진단되었다.
VNN(viral nervous necrosis)는 종묘단계 및 양성장의 해산어 양식장에서 발생하는 바이러스성 질병으로 외견적으로 척추만곡, 이상유영, 체색흑화와 조직학적으로는 뇌와 망막에 공포 및 괴사를 형성하고, 또한 매우 높은 폐사율을 나타내는 질병으로 보고되어 있다. 이러한 질병은 성공적인 종묘의 생산 및 보급을 위해서 반드시 해결해야 할 사항이다. (중략)
This study was performed both to explore the host of nervous necrosis virus (NNV) between mariculturing fish species and to examine the phylogenic position of the NNV in Korea. NNV was confirmed on the basis of histopathological and molecular biological examination, then VNN infection was Preyed from either moribund or dead fishes including red drum, Sciaenops ocellatus; oblong rock fish, Sebastes oblongus and flounder, Paralichthys olivaceus. As a result of sequencing for a part of ms, virus from red drum was showed $98\%, $97\%, $86\% and $74\% homology with oblong rock fish, grouper, Japanese flounder and striped jack, respectively. On the other hand, NNV from oblong rock fish was demonstrated $96\%, $85\% and $72\% homology with grouper, Japanese flounder and striped jack, respectively. NNV from red drum and oblong rock fish was exhibited phylogenically distant from the representative NNV, SJNNV originated from striped jack. On the contrary, the viruses appeared to be similar species with Taiwan NNV isolated from culturing grouper.
능성어의 바이러스성 신경괴사증 바이러스(fish nodavirus)의 병원성을 능성어 및 다른 해산어류를 대상으로 인위감염법에 의해 조사한 결과, 능성어 바이러스성 신경괴사증 바이러스는 능성어에서는 소형어(27 g)부터 대형어(104 g)까지 제사를 일으켜 강한 병원성을 나타냈지만, 실험에 사용한 크기의 방어(537 g), 참돔(207 g), 돌돔(43 g), 넙치(41 g), 자주복(27 g) 및 조피볼락(94 g)에는 폐사를 일으키지 않아 병원성을 나타내지 않았다. 그리고 사육수온별 능성어에 대한 바이러스의 병원성은 수온 $15^{\circ}C$에서는 병원성을 나타내지 않았고, 수온 $20\sim28^{\circ}C$에서는 수온이 높을 수록 병원성을 강하게 나타냈다. 그리고 바이러스는 근육주사, 복강 주사 및 경구감염뿐만 아니라 침지감염과 혼합사육감염에 의해서도 쉽게 능성어에 감염이 되지만, 감염 후 생존한 능성어에 대해서는 바이러스를 재감염시켜도 폐사가 일어나지 않았다.
Kim, Jong-Oh;Kim, Jae-Ok;Kim, Wi-Sik;Oh, Myung-Joo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제25권10호
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pp.1761-1767
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2015
Sevenband grouper, Epinephelus septemfasciatus, is becoming an important aquaculture species in Korea. However, viral nervous necrosis disease is a large problem causing mass mortality in sevenband grouper aquaculture. Recombinant protein vaccines are one of the best methods to reduce these economic losses. However, the cell-based expression method mainly produces inclusion bodies and requires additional procedures. In this study, we expressed a recombinant viral coat protein of sevenband grouper nervous necrosis virus (NNV) using a cell-free protein synthesis system. The purified recombinant NNV coat protein (rNNV-CP) was injected into sevenband grouper at different doses followed by a NNV challenge. Nonimmunized fish in the first trial (20 μg/fish) began to die 5 days post-challenge and reached 70% cumulative mortality. In contrast, immunized fish also starting dying 5 days postchallenge but lower cumulative mortality (10%) was observed. Cumulative morality in the second trial with different doses (20, 4, and 0.8 μg/fish) was 10%, 40%, and 50%, respectively. These results suggest that rNNV-CP can effectively immunize sevenband grouper depending on the dose administered. This study provides a new approach to develop a recombinant vaccine against NNV infection for sevenband grouper.
PCR (polymerase chain reaction) 법은 신속하고 정확하여 바이러스성 질병진단을 위해 널리 사용되지만 조직병리학적인 정보를 제공하지 못한다. 반면에 in-situ hybridization (ISH) 법을 사용하면 바이러스를 빠르게 검출할 수 있을 뿐 아니라 조직에서의 분포도 알 수 있다. 본 연구에서는 RSIV, VHSV, 그리고 VNN 바이러스들의 조직내 분포 및 조직 병리학적인 특성을 확인하기 위하여 이 바이러스들에 감염된 에 감염된 양식 넙치의 어류의 다양한 조직들을 대상으로 ISH 법을 적용하였다. 그 결과 이들 세 종류의 바이러스가 각각 다른 조직 및 세포들에 감염함을 확인 할 수 있었다. 본 연구 결과는 ISH법이 어류 병원성 바이러스의 신속 검출 뿐 아니라 조직 병리학적인 특성 확인에도 유용함을 제시한다.
2015년 겨울, 우리나라 남해안 소재 육상 양식장에서 사육 중이던 능성어의 약 30%가 폐사하였다. 수온 $9{\sim}12^{\circ}C$의 겨울철에 발생한 능성어 폐사는 신경괴사성바이러스 (NNV) 감염에 의한 바이러스성뇌망망증 (VER)으로 밝혀졌다. 시험어는 비정상적인 유영, 배를 위로한 채 수면을 떠 다니는 현상, 체색흑화, 안구백탁 및 부레의 과도한 팽창 소견을 보였다. 원인 바이러스는 일반적으로 고수온기 능성어에 감염되는 RGNNV genotype이 아닌, 냉수성 어류에서 분리되는 BFNNV genotype으로 밝혀졌으며, NNV 가장 근연관계가 높은 Pacific cod betanodavirus (PCNNV)와 99.7~100% 상동성을 보였다. 병리조직학적 관찰 결과, 바이러스성뇌망망증 (VER)의 특징적인 병변인 뇌조직의 공포화 및 괴사를 수반하였다. 이 연구는 수온 $12^{\circ}C$ 이하의 겨울철에 능성어에 감염된 BFNNV genotype에 대한 첫 보고이다.
The impact of global warming on aquatic systems has been a priority research area in the past decade. However, the possibility that increased temperatures will cause shifts in viral disease outbreaks has not been well addressed. In the present study, with increasing water temperature (WT) in the coastal area of Korea, we estimated the possibility of changes in fish viral diseases. From the present time, WT may rise between 0.62 and $1.7^{\circ}C$ by 2050, and the effect on aquaculture could be more adverse than benefitial. Red seabream iridovirus disease (RSIVD) and viral nervous necrosis (VNN) cause high mortality above 22 and $24^{\circ}C$, respectively, and outbreaks could commence earlier and persist for prolonged periods. Nevertheless, the period of occurrence of viral hemorrhagic septicemia (VHS), which outbreaks at a lower WT (< $18^{\circ}C$), could be shorter than the current infectious period. Thermal stress in fish causes reductions in growth and immunocompetence; thus, increases in summer WT can lead to the development of new viral diseases. WT has a strong influence on fish population dynamics; therefore, entry of new viruses and changes in the prevalence of infection can be expected if carrier fishes are introduced or migrate to Korean waters.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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