• 미생물학회지
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• 제25권1호
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• pp.46-51
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• 1987

In order to increase the production of tryptophan by maximizing expression of recombinant trp plasmid, Klebsiella pneumoniae KC 105(pheA tyrA trpE trpR tyrR) was genetically modified. KC 107, inosine monophospate(IMP) auxotroph from KC 105 and KC 108, histidine(His) auxotroph from KC 107 were also derived respectively to increase phosphoribosylpyrophosphate(PRPP) production which is required for tryptophan biosynthesis. From KC 107 phosphoribosylpyrophosphate consumption which is required for tryptophan biosynthesis. From KC 107 and KC 108, KC 109 and KC 110, both arginine auxotrophs were derived respectively. To investigate the expression of recombinant trp plasmid in the selected K. pneumoniae mutants, the auxotrophic mutants were transformed with recombinant trp plasmids pSC 101-$trpE^{FBR}$, pSC 101-trpL(.DELTA.att) $trpE^{FBR}$ (pSC 101-trp-AF). Amount of tryptophan produced and activities of tryptophan synthase of $trpR^{-}$ mutant (KC 100) and $tyrR^{-}$ mutnat(KC 105) containing recombinant plasmid pSC 101-trp operon were increased by 30-40% as compared with KC 99(pheA tyrA trpE) containing recombinant plasmid pSC 101-trp operon. Activities of tryptophan synthase and production of tryptophan of KC 108 ($His^{-}$) and KC 109($Arg^{-}$) containing recombinant plasmid pSC 101-trp operon were increase by two-fold as compared with KC 107 containing pSC 101-trp operon.

• 미생물학회지
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• 제23권1호
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• pp.9-12
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• 1985

증폭된 재조합 trp operon의 발현을 위한 숙주박테리아 개발의 일환으로 숙수 E. coli에 $aroP^{-}$ 변이를 도입하였다. $aroP^{-}$ 변이의 유도에는 trans po son Tn10을 사용하였으며 P1Kc파아지를 이용하여 숙주박테리아에 형질도입하였다. General aromatic amino acid transport system이 결여된 $aroP^{-}$ 변이주는 $\beta$-thienylalanine ($(2{\times}10^{-4}M)$). p-fluor-phenylalanine ($(2{\times}10^{-4}M)$) 그리고 5-methyltryptophan에 저항성을 가졌다. $aroP^{-}$ 변이주는 $aroP^{-}$ 야생주에 비해서 〔$[^3H]$-tryptophan uptake가 상당히 감소하였다. 또한 NaN, ($(2{\times}10^{-4}M)$)를 처리하였을 때의 ($[^3H]$)-tryptophan uptake 비율은 aroP 변이주가 $aroP^{-}$야생주보다 덜 감소하였다. E. coli $trpR^{-ts}/ColE_1 -trp^+$ 균주에 aroP 형질을 도입하였을 때 트립토판 방출이 $aroP^{-}$ 야생주에 비해서 4 배나 증가하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제22권5호
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• pp.557-560
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• 1994

The optimum medium composition for the production of L-tryptophan with Klebsiella pnuemoniae pheA tyrA trpE trpR/pSC 101-trp$^{+}$ and the effect of precusors in the optimum medium were studied. The specific growth rate in the optimum medium was almost the same as that in the basal medium, the former showing 1.01 and the latter 1.07 hr $$^{-1}$, but the produced tryptophan was increased 45% in the optimum medium. The maximum amount of produced tryptophan was 159 mg/l within 14 hours. Tryptophan production was ceased by casamino acid addition over 4 g/l in medium, but cell maSS increased with its addition. Indole and anthranilate as precusors had toxic effect on growth and tryptophan production at experimented concentration range (over 20 mg/l), but L-serine had good effect on tryptophan production, resulting in 175 mg/l tryptophan within 14 hours.

• BMB Reports
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• 제45권8호
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• pp.452-457
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• 2012

Diketoreductase (DKR) from Acinetobacter baylyi contains two tryptophan residues at positions 149 and 222. Trp-149 and Trp-222 are located along the entry path of substrate into active site and at the dimer interface of DKR, respectively. Single and double substitutions of these positions were generated to probe the roles of tryptophan residues. After replacing Trp with Ala and Phe, biochemical and biophysical characteristics of the mutants were thoroughly investigated. Enzyme activity and substrate binding affinity of W149A and W149F were remarkably decreased, suggesting that Trp-149 regulates the position of substrate at the binding site. Meanwhile, enzyme activity of W222F was increased by 1.7-fold while W222A was completely inactive. In addition to lower thermostability of Trp-222 mutants, molecular modeling of the mutants revealed that Trp-222 is vital to protein folding and dimerization of the enzyme.

• 생명과학회지
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• 제21권2호
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• pp.328-333
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• 2011

동물호르몬으로 알려진 멜라토닌(melatonin)은 동물뿐 아니라 고등 식물을 포함한 다양한 생명체에 존재한다. 식물에서는 쌍떡잎 식물과 외떡잎 식물에 멜라토닌이 널리 존재하며 일부 약용 식물에는 다량으로 함유되어 있지만 아직 그 생합성 과정과 생리학적 기능은 확립되지 않았다. 본 연구에서는 reverse phase HPLC 분석을 통하여 이제까지 분석이 이루어지지 않았던 여러 제비꽃속(Viola) 식물들에 멜라토닌이 고르게 분포한다는 사실을 확인하였다. 그 다음 제비꽃속 식물들의 잎 절편을 배양하며 멜라토닌의 최초 전구체로 제안된 tryptophan (Trp)과 이의 탈카르복시화(decarboxylation) 중간산물인 tryptamine (TAM)을 공급하였다. 그 결과 Trp을 공급하면 멜라토닌 생성에 영향을 미치지 않았지만 TAM을 공급한 경우에는 멜라토닌의 함량이 증가하였다. TAM은 Trp에서 유래하므로 Trp-TAM 경로가 제비꽃속 식물에도 존재하는 것으로 판단되며, Trp 공급이 멜라토닌 함량에 영향을 미치지 않는 결과는 Trp을 TAM으로 전환하는 탈카르복시화 과정이 식물 멜라토닌 생합성 과정의 속도결정 단계일 것이라는 가설을 지지하는 것으로 사료된다.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제5권5호
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• pp.194-198
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• 1984

The UV action spectra and quantum yields for photodestruction of tryptophan (Trp) in peptide such as N-acetylphenylalanyl-L-tryptophan (NAPT) and 3-methyl indole (scatole) were determined in aerated aqueous and organic solvents. The photodestruction of aqueous NAPT was shown to be initiated by photoionization without requirement of threshold energy, as demonstrated by the similarity of fluence effect curves obtained for the action at various wavelengths and the wavelength dependence of quantum yield comparable to that reported for the photoionization of L-Trp. N-formylkynurenine (NFK)-type photoproduct, which is a photodynamic sensitizer, was not found to be involved in the photodestruction of Trp in NAPT in aqueous solution. In contrast, the action spectra of NAPT and scatole in organic solvents have revealed evidences for the significant role of internal photosensitization by NFK-type photoproduct in photolysis of Trp in peptide.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제23권4호
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• pp.229-236
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• 1990

Sprague-Dawley 숫쥐에게 3.6%의 tryptophan 또는 tyrosine 보강 식이를 4일간 먹여 스트레스로 인한 혈청 cortisol, glucose, free gatty acid(ffa)수준 변화를 조사하였다. Trp-보강 식이를 먹은 쥐들은 혈청 및 뇌의 trp농도가 유의적으로(p<0.05) 증가하였고 cortisol과 ffa 수준은 정상 식이군과 같았으나 glucose는 유의적으로 낮았다. Trp- 보강 식이군이 stress를 받았을 때 혈청 cortisol 수준은 유의적으로 증가하였으나 정상식이군의 stress 반응 정도에는 미치치 못하는 유의적으로 낮은 증가 추세를 보였다. 또한 trp-보강 식이군의 혈청 glucose와 ffa 수준은 정상식이군과는 달리 스트레스로 인한 증가 현상이 나타나지 않았다. 이로서 Trp-보강 식이는 스트레스로 인한 대사적 교란(metabolic disturbance)를 방지하고, 뇌하수체-시상하부-부신 피질계를 통한 호르몬 반응의 강도를 줄이는 효과를 나타내었다. 한편 try-보강 식이를 먹은 쥐들은 혈청 try함량이 증가하였고 유의적이지는 않으나 전반적으로 낮은 cortisol 수준을 보였다. 이들의 giucose와 ffa농도는 정상 식이군과 비교해 차이가 없었다. Try-보강 식이군이 스트레스를 받으면 혈청 cortisol 수준에는 유의적인 변화가 없는 반면 glucose와 ffa함량은 정상 식이군과 동일하게 증가하였다. 즉 try보강 식이는 스트레스로 인한 대사적 교란을 방지할 수는 없었으나 시상하부-뇌하수체-부신 피질게를 통해 이루어지는 hormone 반응을 말소시킬 수 있는 것으로 보여진다.

• 한국응용과학기술학회지
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• 제32권3호
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• pp.451-460
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• 2015

An enantioselective recognition of D- and L-tryptophan (Trp)-b-cyclodextrin (CD) inclusion complex was performed using electrochemical and FT-Raman spectroscopic analysis. From the electrochemical analysis, the selectivity coefficient ($K_{DL}$) of b-CD inclusion complexes was found higher than that of the D- and L-Trp in phosphate buffered saline (PBS, pH=7.0) solution. The percentage of enantioselectivity ($I_{%{ee}}$) for peak current of D-Trp-b-CD inclusion complexes was observed higher than that of L-Trp-b-CD inclusion complexes in PBS solution. From Raman spectroscopy, chemical shift difference (D, $cm^{-1}$) for the C=C stretch, ring vibration, and ring breathing of D-Try-b-CD inclusion complex were observed higher than that of L-Trp-b-CD inclusion complex. The electrochemical and Raman spectroscopic analyses were found very useful for chiral detection of racemic amino acid in the presence of b-CD.

• 한국균학회지
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• 제26권1호통권84호
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• pp.103-107
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• 1998

Coprinus cinereus에서 tryptophan 생합성에 관여하는 trp2 유전자의 이종 버섯에서의 발현여부를 조사하였다. 유전자 상동성을 확인하기 위하여, C. cinereus trp2 유전자를 함유하는 재조합 DNA인 pHIONA8을 probe로 사용하여 southern blot을 한 결과 S. commune 1-71의 tryptophan 생합성 유전자와 상당한 homology가 있는 것으로 나타났다. pHIONA8 DNA를 이용한 S. commune T1(tryptophan 영양요구주)의 상보성 검증에서는 pertri-dish당 약 50개의 형질전환체가 나타났으며, 이들 형질전환체는 다른 S. commune의 다른 화합성 균주와의 교배 실험에서 clamp cell의 유도와 동시에 약 $2{\sim}3$주만에 자실체를 관찰하였다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제33권6호
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• pp.1017-1021
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• 2004

Thr, Trp을 overproduce하는 효모 균주를 분리하기 위하여 Sacchromyces cerevisiae를 UV와 EMS로 mutagenesis한 후 screen하였다. Thr analogue인 hydroxynorvaline이 UV mutagenesis 후 Thr overproducing 하기 위해 사용되었다. 31 mutant 중 아미노산 분석 결과에 의해 TC 5-1이 선정되었고 다시 Trp overproducing 위해 EMS mutagenesis 하였다. 8개의 mutant가 flurotryptophan을 이용하여 Thr, Trp을 overproduce하는 mutant로 선정되었다. 아미노산결과에 의해 그 중 TC 6-1이 최종 효모 균주로 선정되었다.