본 연구는 조직공학용 지지체로 사용될 막을 개발하기 위한 초도 연구 수행으로, 염화나트륨(NaCl)을 기공형성체로 혼합한 폴리카프로락톤(PCL)용액을 유리 캐스팅판에 분주한 후 필름 어플리케이터를 이용하여 다공성 PCL필름을 성형하였다. 성형된 필름은 건조 후 증류수에 침지시켜 NaCl을 추출하여 최종 멤브레인형 다공성 지지체를 제조하였다. 3차원 다공망을 형성시키기 위하여 NaCl을 기공형성체로 이용하였으며 $4^{\circ}C$, 실온, $40^{\circ}C$의 세 가지 건조조건에 따른 다공망의 형성과 형태를 주사전자현미경(SEM)을 이용하여 관찰 하였으며 기초적인 안전성 확보를 위한 세포독성평가를 시행하였다. 세 가지의 건조조건별 결과에서는 실온 건조조건에서 거대기공과 미세기공이 혼재된 3차원 다공망이 우수하게 형성된 것이 관찰되었으며 세포독성 시험결과 ISO10993-5 규격의 세포독성 판단기준에 따라 grade 2(mildly cytotoxic)로 나타난바 생체용으로 적합하다고 볼 수 있다. 본 연구를 통하여 멤브레인형 다공성 지지체 제조에 건조조건이 3차원 다공망의 형성 및 거대기공과 미세기공이 함께 형성되는 것에도 영향을 미치는 것으로 나타났으며 이 결과는 다공성 멤브레인 지지체의 분해성 조절 및 약물 담지 효과를 개선하기 위한 연구에서 다공도의 조절에 대한 기초적인 공정이 될 수 있다.
목 적 : 대퇴동맥 혈전증은 하지 절단같은 극단적인 재앙뿐만 아니라 하지의 성장 장애를 초래할 수 있는 심도자술의 심각한 합병증이지만, 소아에서 이에 대한 표준적 치료법은 아직 정립되지 못한 상태이다. 저자는 심도자술후 발생한 대퇴동맥 혈전증에서 urokinase의 동맥내 국소 주입요법의 유용성을 검토하고자 본 연구를 시행하였다. 방 법 : 1994년 1월부터 2002년 8월까지 심도자술 후 발생한 대퇴동맥 혈전증으로 동아대학교병원 소아과에서 동맥내 urokinase 국소 주입법을 이용해 혈전용해술을 받은 9명, 12례를 대상으로 하여, 병력지와 혈관조영 소견을 후향적으로 분석하였다. 결 과 : 1) 대퇴동맥을 이용한 심도자술이 행해진 391례 중 전신적 헤파린 또는 urokinase에 반응을 보이지 않았던 대퇴동맥 혈전증의 발생빈도는 2.8퍼센트였다. 2) 대상 환아들의 연령은 기하평균 5.8개월(1-71개월)이었고 체중은 $8.5{\pm}4.6kg$(3.5-20.5 kg)였다. 3) Urokinase는 1,000-4,400 unit/kg/hr로 $50.6{\pm}29.2$시간(18-110시간)에 걸쳐 주입하였는데, 치료중 2례에서 환측의 천자부위로 출혈이 있었으며, 한명은 수혈이 필요했다. 심도자술후 4일 이내에 치료를 시작했던 환아들은 모두 혈전의 완전 소실을 보였다. 혈전 형성후 각각 12일과 19일째 치료를 시작했던 2례는 호전되지 않아 풍선 혈관성형술을 실시하였는데 부분적으로 도움이 되었다. 결 론: 심도자술후 발생한 대퇴동맥 혈전증에서, 전신적 혈전용해제 투여로 회복되지 않으면, 반대측 대퇴동맥을 통한 국소적 동맥내 혈전용해제 투여를 조기에 시행하는 것이 효과적이다.
The purpose of this study was to investigate the effects of green tea catechin on mixed function oxidase system (MFO), lipofuscin contents, carbonyl value, oxidative damage and the antioxidative defense system in lung of microwave exposed rats. Experimental groups were divided to normal group and microwave exposed group. The microwave exposed groups were subdivided into three groups: catechin free diet (MW-0C) group, 0.25% catechin (MW-0.25C) group and 0.5 % catechin (MW-0.5C) group according to the levels of dietary catechin supplementation. The rats were irradiated with microwave at frequency of 2.45 GHz for 15 min. Experimental animals were sacrificed at 6th day after microwave irradiation. The contents of cytochrome P$_{450}$ contents in MW-0C group was increased to 95% , compared with normal group. MW-0.25C and MW-0.5C groups were reduced to 16% and 31%, respectively, compared with MW-0C group. The activity of NADPH-cytochrome P$_{450}$ reductase in MW-0C group was increased to 44%, compared with normal group. MW-0.25C and MW-0.5C groups were reduced to 12% and 17%, respectively, compared with MW-0C group. The activity of superoxide dismutase (SOD) in MW-0C group was decreased to 21 %, compared with normal group. MW-0.25C and MW-0.5C group were significantly (p < 0.05) increased, compared with MW-0C group. The activity of glutathione peroxidase (GSHpx) in MW-0C group was significantly decreased, compared with normal group. MW-0.25C and MW-0.5C groups were recovered to the level of normal group. The thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) content in MW-0C group was increased to 34 %, compared with normal group. Catechin supplementation groups were maintained the level of normal group. The levels of caybonyl value in MW-0C group was increased to 21 %, compared with normal group. MW-0.25C and MW-0.5C groups were reduced to 14% and 12%, respectively, compared with MW-0C group. The lipofuscin contents in MW-0C group were increased to 23.4 %, compared with normal group. That of MW-0.5C group was significantly reduced, compared with MW-0C group. In conclusion, MFO system was activated and the formation of oxidized protein, lipofuscin was increased and antioxidative defense system was weakened of lung tissue in microwave exposed rats, thus oxidative damage was increased. But it was rapidly recovered to normal level by green tea catechin supplementation.n.
조피볼락 (S. schlegeli)의 성분화 과정을 구명하기 위해 시원생식세포의 출현과 원시생식소 형성, 그리고 암${\cdot}$수의 성분화 과정을 조직학적으로 조사하였다. 시원생식세포는 출산후 2일, 전장 6.3mm 개체에서 장관과 중신사이의 섬유성 간충직에 묻혀 식별되었다. 출산 65일 전장 $5.2\~5.9cm$ 개체에서, 생식소의 주변 부위에 강 (cavity)을 형성하고 다수의 생식원세포로 구성된 생식소는 난소로 발달한다. 이 시기에 체세포들이 곡정세관을 형성하는 생식소는 정소로 분화된다. 출산후 115일, 전장 $7.0\~7.2cm$ 치어들에서, 생식소는 흑색소를 함유하는 정소와 흑색소가 없는 난소로 구분된다. 따라서 조피볼락은 초기 성분화 단계에 자상을 거치지 않고 난소와 정소로 분화되는 분화형의 자웅이체에 속한다. 출산후 12개월된 개체들의 성비는 1 : 1이었다.
On the basis of the evidences that electrical stimulation could enhance proliferation and differentiation of bone cells and promote healing and regeneration of bone, this study was performed to investigate the effects of electrical stimulation on human periodontal ligament cells and gingival fibroblasts in vitro, which also have important roles in regeneration of periodontium, and to evaluate the potential of clinical application of electrical stimulation. Human periodontal ligament cells and gingival fibroblasts were primarily cultured from the root surface of extracted premolar and the adjacent gingiva without periodontal diseases. In control group, the cells ($5{\times}10^4$ cells/ml)were incubated only in Dulbecco's Modified Eagle's Medium contained with 10% fetal bovine serum. In test groups, electrical stimulation was given at the current intensity of $0.25{\mu]A$(test group 1), $1.0{\mu}A$(test group 2), and $2.5{\mu}A$(test group 3) for 12 hours to the same culture media with the control group. After 12 hour exposure of electrical stimulation, the cells were incubated for 2 and a half days(60 hours), and then each group of cells was analyzed for cell proliferation, protein level, and activity of alkaline phosphatase. The results were as follows ; 1. The Rate of cell proliferation of every test group increased significantly in both periodontal ligament cells and gingival fibroblasts, and in periodontal ligament cells, test group 3 showed significantly increased proliferation compared to the other test groups(p<0.05). 2. In the protein levels, neither periodontal ligament cell nor gingival fibroblast showed statistically significant differences between control and test groups. 3. The activity of alkaline phosphatase in periodontal ligament cells increased significantly in all test groups(p<0.05), but there were no significant differences between 3 test groups. In gingival fibroblasts, the activity of alkaline phosphatase increased significantly only in test group 3(p<0.05). From the above results, it is concluded that electrical stimulation may have beneficial effects on the regeneration of destructed periodontal tissue in regard of the stimulation of periodontal ligament cells and gingival fibroblasts as well as electrically stimulated bone formation that has been known, and that electrical stimulation may have the potential of clinical application.
대기 $CO_2$ 상승시 인산공급이 대두식물체의 광합성 및 질소고정에 미치는 영향을 살펴보고저 Bradyrhizobium japonicum MN110을 접종한 대두 식물체를 인산결핍구(0.05 m-P) 및 대조구(1.0 mM-P)를 처리하여 정상 $CO_2(400\;{\mu}l/L)$와 상승 $CO_2(800\;{\mu}l/L)$의 조건인 phytotron에서 35일 동안 재배하였다. 인산결핍은 건물량을 정상 $CO_2$ 처리시 51%, 상승 $CO_2$ 처리시 64%를 감소시켰고 총 엽면적도 유의성있게 감소시켰으나 specific leaf weight는 증가시켰다. 광합성 속도 및 잎내부의 $CO_2$농도는 인산결집구에서 감소하였고 그 정도는 $CO_2$ 상승처리시 더욱 컸으며 질소고정능과 근류생체량도 인산결핍시 감소하였으나 잎의 질소농도는 인산대조구가 30% 감소하였다. 이러한 결과는 $CO_2$ 상승조건에서도 인산이 결핍될 경우 식물생육을 촉진시키지 못하며 인산은 정상 $CO_2$ 농도시 보다 $CO_2$ 상승조건에서 근류의 성장과 작용에 더욱 중요한 역할을 하는것으로 유추된다.
담배(Nicotiana tabacum cv. BY4)의 이배체식물과 담배의 약으로부터 유도된 반수체식물의 잎절편을 사용하여 2.4-D를 단독톄처리하여 캘러스를 유도하였다. 캘러스증식은 이배체에서는 2.0 mg/L 2.4-D와 1.0mg/L 카이네틴의 조합처리구에서, 반수체의 경우에 있어서는 2.0mg/L 2.4-D와 0.1mg/L BAP 조합처리구에서 실시하였으며, 현탁배양도 동일조건으로 실시하였다. 현탁배양 세포괴를 배양 15-20일째가 되면 0.8% low melting agarose와 혼합하여 카드a뮴이 0-2,000 $\mu$M의 농도로 처리된 선발배지에 평판배양하여 카드뮴저항성 colony(cell clump)를 조사관찰하였다. 그 결과 본 실험에서는 이배체는 세포의 성장에 있어서 최하저해농도(MIC : Minimum Inhibition Concentration)는 Cd$^{++}$ 300 $\mu$M이었으며 반수체는 Cd$^{++}$ 200 $\mu$M이었다. 이때 반수체 및 이배체의 MIC에서 선발된 세포주를 카드뮴 500, 1,000, 2,000 $\mu$M 농도로 옳겨 경화시킨 후 카드뮴저항성을 선발하였고 그 특성을 조사하였다. 그 결과 카드뮴 저항성을 띤 반수체 및 이배체유래 캘러스의 경우에는 각각 카드a뮴의 농도가 증가할수록 생중량은 감소하였으나, 건조중량은 오히려 증가하였다. 그리고 각각 선발된 세포주내의 카드뮴의 함량을 AAS를 사용하여 측정하였던 바, 카드뮴의 농도가 높을수록 캘러스에 축적된 카드뮴의 양이 높게 나타났다.
수분후 담배의 배에 중이온 beam ($^{14}$ N)을 조사하여 얻은 종자로부터 albino식물체를 분리하여 기내 생장과 분화의 특성을 검토하였다. 기내에서 생장시킨 albino식물체는 엽록소함량이 급격한 감소를 나타내었고 기공수는 잎의 이면 및 표면 표피에서 녹색 식물체 보다 많았다 연속광 조건하의 탄소원을 첨가한 MS배지에서 albino개체는 절간이 신장하지 않았으나 10.0mg/L 의 GA$_3$처리로 절간신장이 회복되었다. 잎절편 배양시 albino식물체는 1.0 mg/L 의 BAP와 kinetin의 단용처리로 다수의 신초를 형성하였고, 1.0mg/L의 2,4-D와 NAA의 단용처리로 다량의 캘러스를 형성하였다. 잎절편에서 유도된 albino 캘러스에 1.0mg/L BAP+0.1mg/L NAA를 혼용처리하면 다수의 식물체가 재분화 되었다. 이와같이 albino 식물체는 다경줄기 형성, 캘러스 형성, 캘러스로부터 재분화율 등이 녹색 식물체와 차이가 없었다. 또한 NAA와 BAP를 혼용처리 하였을 때 잎절편으로부터 기관분화의 유형도 정상주와 비슷하였다. 이러한 결과는 본 albino담배 변이체가 색소체 함량의 급감과 같은 광합성과 관련된 기능에서는 결손을 보이고 있음에도 불구하고 조직수준의 기관분화계에는 이상이 없다는 것을 시사한다.
Liposome was labelled with $^{99m}Tc$ after negative charged liposome was formed with combination of a few lipid components. $^{99m}Tc$ liposome was injected through the tail vein of C3H mice bearing fibrosarcoma and biodistribution of $^{99m}Tc$ liposome was evaluated. The results were as follows: 1) We confirmed formation of liposome which was small unillamellar and multilamellar vesicles. 2) In this experiment the optimal concentration of $SnCl_2$ was $156{\mu}g/ml$ to label liposome with $^{99m}Tc$ and labelling efficiency was 95%. 3) The labelled liposome was stable when it was incubated with human serum for 24 hours. Mean labelling efficiency was 94% at 24 hour. 4) The main uptake sites of Tc-99m liposome were liver and spleen. It showed significantly higher uptake than $^{99m}Tc$ HSA (p < 0.001). 5) $^{99m}Tc$ liposome uptake in tumor tissue was not significantly higher than $^{99m}Tc$ HSA uptake. In conclusion, $^{99m}Tc$ liposome disclosed high labelling efficiency and was highly stable. Liver and spleen were main uptake sites of $^{99m}Tc$ liposome. The uptake mechanism of $^{99m}Tc$ liposome also seemed to be different from that of $^{99m}Tc$ HSA. We conclude that $^{99m}Tc$ liposome would be a promising agents for the imaging of some tumor.
This study was designed to investigate the appearence and the characteristics of the apoptotic cells and the process of the joint cavity formation in mouse knee joint. Fetal mouse knee joints from 15 to 19 days of gestation were used. Paraffin-embedded serial sections, stained with H & E for light microscopic observation, Epon 812 embedded thin sections for electron microscopic observation and Lowicryl HM 20 embedded thin sections for immune-electron microscopic observation were prepared. Monoclonal antibodies to $\beta-tubulin$ and polyclonal antibodies to tissue transglutaminase were used for immune-electron microscopic study. The results obtained were as follows. 1. At 15 days of gestation, blood vessels, which have invaded in the mesenchymal cells, were present in the synovium, to form the joint cavity in the future. 2. At 16 days of gestation, the joint cleft was first appeared and several RBCs were present in the joint cleft. The invasion of blood vessels into the joint cleft was continuing, and apoptotic cells were present in the inner cell layer, adjacent to the joint cleft. Necrotic cells were also present in the outer cell layer; they were present 18 days of gestation, but apoptotic cells did not appear after 17 days of gestation. 3. In the apoptotic cells, transglutaminase were localized around vacuoles and the marginal site of the cytoplasm. 4. In the apoptotic cells, tubulin was around the endoplasmic reticulum and the marginal site of the cytoplasm. In the late stage of apoptotic cells, tubulin was localized diffusely in the cytoplasm. Tubulin was also strongly labeled around in the cytoplasm of the neighboring cell at which the apoptotic body was phagocytosed. Tubulin labeled particles were apparently increased in the seperated apoptotic bodies. On the basis of the above findings, it is proposed that during the development of the mouse knee joint, blood vessel invasion first occurs and then apoptosis and cell necrosis follow it. In the apoptotic cell, present in the synovium of the developing knee joint of the mouse. it is suggested that the redistribution of tubulin is associated with apoptotic process. And transglutaminase overexpressed in the apoptotic cell.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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