Abstract
This study was carried out to select cadmium resistant cell lines from leaf-derived calli of diploid and haploid of Nicotiana tabacum cv. BY4, for understanding adaptation mechanism of plants in cadmium contaminated environment. suspended cell clumps were plated onto selection medium containing 0 to 2,000 $\mu$M cadmium. Cadmium resistant colonies were formed on the selection medium after 3 or 4 weeks of culture. The minimum inhibition concentration (MIC) of cadmium on colony formation were 300 $\mu$M in diploid and 200 $\mu$M in haploid plants, respectively. In order to test the resistance to cadmium, selected cell line on MIC were transferred to medium containing high concentration of cadmium. The selected cell lines, especially haploid cell line, were resistant an the high concentration of cadmium. And dry weight, ash weight, and cadmium contents of cell were increased. These results indicated that the selected cell lines showed higher resistance of cadmium than control cells, and haploid plant is more resistant than diploid plant on medium with cadmium.
담배(Nicotiana tabacum cv. BY4)의 이배체식물과 담배의 약으로부터 유도된 반수체식물의 잎절편을 사용하여 2.4-D를 단독톄처리하여 캘러스를 유도하였다. 캘러스증식은 이배체에서는 2.0 mg/L 2.4-D와 1.0mg/L 카이네틴의 조합처리구에서, 반수체의 경우에 있어서는 2.0mg/L 2.4-D와 0.1mg/L BAP 조합처리구에서 실시하였으며, 현탁배양도 동일조건으로 실시하였다. 현탁배양 세포괴를 배양 15-20일째가 되면 0.8% low melting agarose와 혼합하여 카드a뮴이 0-2,000 $\mu$M의 농도로 처리된 선발배지에 평판배양하여 카드뮴저항성 colony(cell clump)를 조사관찰하였다. 그 결과 본 실험에서는 이배체는 세포의 성장에 있어서 최하저해농도(MIC : Minimum Inhibition Concentration)는 Cd$^{++}$ 300 $\mu$M이었으며 반수체는 Cd$^{++}$ 200 $\mu$M이었다. 이때 반수체 및 이배체의 MIC에서 선발된 세포주를 카드뮴 500, 1,000, 2,000 $\mu$M 농도로 옳겨 경화시킨 후 카드뮴저항성을 선발하였고 그 특성을 조사하였다. 그 결과 카드뮴 저항성을 띤 반수체 및 이배체유래 캘러스의 경우에는 각각 카드a뮴의 농도가 증가할수록 생중량은 감소하였으나, 건조중량은 오히려 증가하였다. 그리고 각각 선발된 세포주내의 카드뮴의 함량을 AAS를 사용하여 측정하였던 바, 카드뮴의 농도가 높을수록 캘러스에 축적된 카드뮴의 양이 높게 나타났다.
