• 제목/요약/키워드: TLC-densitometry

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E.coli ATCC 21990이 생산하는 Aminoglycoside-3'-Phosphotransferase(APH(3')) 의 Densitometric TLC Assay (Densitometric TLC Assay of Aminoglycoside-3'-Phosphotransferase (APH(3')) Produced by E. coli ATCC 21990)

  • 이정환;김계원;김기태;나규흠;김학주;양주익;김수일
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제19권4호
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    • pp.372-379
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    • 1991
  • E.coli ATCC 21990의 aminoglycoside-3'-phosphotransferase(APH(3'))의 신속하고 간편한 정량적 방법을 TLC densitometry를 이용하여 확립하였다. APH(3') 반응생산물인 3' 위치에 인산화된 kanamycin B(3'PKMB)는 silica gel plate에서 cnloroform-methanol-method-ammonia water (3:4:3) 전개용매로 반응물에서 분리되었고, 3'PKMB의 양은 ninhydrin으로 발색 후 densitometry로 측정하였다. APH(3')의 densitometric TLC assay는 좋은 정량적 결과와 재현성을 보였고, 3'-PKMB에 대한 감도는 1.56nmol이었으며 많은 시료의 분석이 한번의 실시로 가능하였다. 이 방법은 aminoglycoside 항생제의 불활화 효소 분석에 응용이 가능하리라 여겨진다.

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Penicillium islandicum에 의한 황변미독(黃變米毒) Luteoskyrin의 생성(生成) (Formation of Luteoskyrin by Penicillium islandicum)

  • 김용화;이서래
    • 한국식품과학회지
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    • 제10권1호
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    • pp.46-51
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    • 1978
  • 황변미독(黃變米毒)의 일종인 luteoskyrin의 동정(同定) 및 정량법(定量法)을 검토한 후 변질미에서 분리된 Pen. islandicum의 luteoskyrin 생성능(生成能)을 추구한 결과는 다음과 같다. 1) Luteoskyrin은 0.5 N oxalic acid impregnated silicagel G plate로서 acetone : n-hexane : water(6:3:1.5, upper layer)를 전개용매로하는 TLC방법에서 분리(分離)가 가장 좋았다. 분리된 황색물질의 최대흡수파장(吸收波長)은 426, 448nm이었으며 chromatogram을 태양광선에 $2{\sim}3$시간 노출시 자색(紫色)으로 변하였다. 2) Luteoskyrin의 정량법으로서 TLC전개(展開)후 용출비색법(溶出比色法)에서는 4 ppm, densitometry에서는 0.1 ppm이 검출한계(檢出限界)이었다. 미곡 중의 허용량(許容量)을 3.68 ppm이하로 정설할 경우 곡류시료 중 luteoskyrin의 검색(檢索)에는 densitometry가 적합할 것이다. 3) Pen. islandicum에 의한 luteoskyrin 생성능은 Czapek 액체배지에서는 균계체(菌系體) 1g당 11mg, 가압살균한 쌀에서는 1g당 40mg이었다.

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석이중 오르시놀 정량 및 급성독성 (Quantitative Analysis of Orcinol and Acute Toxicity of Gyrophora esculenta)

  • 최혁재;김남재;김동현
    • 약학회지
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    • 제45권2호
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    • pp.169-179
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    • 2001
  • In previous study, Gyrophora esculenta showed significant inhibitory effect on $\alpha$-glucosidases in vitro and blood glucose elevation in vivo. In the isolating process of active substance, orcinol was separated from Gyrophora esculenta. Orcinol is known to be toxic, therefore, in this study, it was analysed by the TLC densitometry method for quantitative determination from Gyrophora esculenta. The average amount of orcinol of Gyrophora esculenta was 0.2%. For the purpose of removing orcinol, the water extract of Gyrophora esculenta was sequentially fractionated by organic solvents, and the acute toxicity of each fraction was assessed in mice. Among them, the LD50 of butanol fraction was 1.19 g/kg(p.o.) and the weight increase of mice in that group was somewhat retarded.

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고추나물의 Hypericin 함량 (Hypericin Contents of Hypericum erectum Thunberg)

  • 김선희;정영재;안준철;황백
    • 한국약용작물학회지
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    • 제13권3호
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    • pp.101-104
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    • 2005
  • 2003년 6, 8월에 지리산과 전남 담양군의 병풍산에서 자생하는 고추나물과 물레나물을 채집하여 TLC 분석을 하고, TLC-densitometry를 이용해 정량한 결과, 물레나물에서는 hypericin이 확인되지 않은 반면, 고추나물의 꽃봉오리와 잎에서는 다량의 hyepricin이 확인되었다. 그리고 지리산에 자생하는 고추나물보다 병풍산 고추나물의 hypericin함량이 더 높게 나타났고, 고도가 낮을수록 hypericin 함량이 높은 것으로 나타났다. 채집 시기별로 비교했을 때, 병풍산은 6월보다 7월에서 hypericin함량이 높게 나타났고, 지리산에서는 7월에 가장 진하게 보였다. St. John's wort와 고추나물을 비교하였을 때, 2.22 $mg/{\ell}$ hypericin을 함유한 St. John's wort 보다 3.2 $mg/{\ell}$의 함량을 보이는 병풍산 고추나물에서 hypericin함량이 더 높은 것으로 확인되었다.

TLC를 이용한 이소플라본의 신속한 정량 분석 (Rapid Quantitative Analysis of Isoflavones using TLC)

  • 김경선;박관화;백무열;강길진;박천석
    • 한국식품과학회지
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    • 제36권4호
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    • pp.558-562
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    • 2004
  • TLC를 이용하여 간편하고 신속하게 정량적인 이소플라본의 분석을 수행할 수 있는 조건을 개발하였다. 전개 용매로는 chloroform : methanol : water : acetic acid를 각각 60 : 30 : 10 : 0.5의 비율로 하였을 때 최적의 분리를 보였으며, 정량적인 분석은 UV에서의 흡광도를 densitometer를 사용하여 spot의 intensity를 계산함으로 가능하였다. HPLC분석법과의 비교 결과 $0.15-1.80{\mu}g/{\mu}L$의 범위에서 이소플라본을 정량적으로 분석할 수가 있었다. 또한 TLC를 이용하여 일반 콩과 식물에 포함되어 있는 이소플라본의 함량 측정 결과 HPLC의 결과와 상당히 근소한 값으로 일치하여 TLC방법으로 간편하고 빠르게 정량적인 측정이 가능함을 확인하였다.

인삼(人蔘) polyacetylene 조성(組成)의 경시변화(經時變化) (Time Course Change in Composition of Ginseng Polyacetylenes)

  • 한병훈;송병준;노환성
    • 생약학회지
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    • 제7권3호
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    • pp.191-193
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    • 1976
  • It has been known that ginseng extract contains several polyacetylene components. But we found only two polyacetylene components in the freshly prepared ginseng extract. Long-term preservation of ginseng or ginseng extract produced many artifact polyacetylenes. The ratio of artifact/genuine polyacetylene was determined by TLC-densitometry on long-term preserved ginseng samples. The results indicated that the ratio was increased proportionally with the span of preservation.

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생약 복합제제의 품질평가에 관한 연구(제 2 보) -생진산(生賑散)의 품질평가 방법에 관하여- (Studies on Quality Evaluation of Crude Drug Preparation(II) -Analysis of Saengmaek-san by Thin Layer Chromatography and High Performance Liquid Chromatography-)

  • 홍남두;김종우;원도희;강윤상;김남재;주수만
    • Journal of Pharmaceutical Investigation
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    • 제17권1호
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    • pp.22-30
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    • 1987
  • Evaluation method of crude drug preparations was studied in Saengmaek-san. Zig-zag TLC scanning profiles and high performance liquid chromatograms were obtained from Saengmaek-san and its each crude drug. A method using TLC densitometry and high performance liquid chromatography was established for the precise determination of ginsenoside $Rb_1$ in Saengmaek-san containing Ginseng Radix. Consequently, ginsenosicle $Rb_1$ content was 0.45-0.48 mg per g of Saengmaek-san. This method was found to be useful for the quality evaluation of oriental medicinal preparations.

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1990년 제23회 학술발표회 논문초록 (Immunochemical Determination of Plant Constituents)

  • 성철기
    • 한국연초학회지
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    • 제12권1호
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    • pp.29-38
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    • 1990
  • Until relatively recently plant scientists have made little use of immunological techniques. Now, however, more and more researchers are discovering the powder of these techniques for the screening of immunomodulators and for the detection, quantitative determination and localization of compounds in plant materials. Especially, the recent developments in the fields of plant biotechnology and plant genetic engineering make it even more important for forkers in the plant sciences to become acquainted with the more sophisticated methods. The possible methods include onestep purification of antigens, visualization in situ by immunocytochemis try and on polyacrylam ids gel s by ni trocellulose Western blotting and quantification by various immunoassay. Among them, in this reviews, the quantitative determination methods are to be reviewed. There are several kinds of methods for the quantitative determination of plant constituents such as colorimetry, TLC, GLC, DCC, UV derivatization, densitometry and HPLC. When the complexity of plant constituents is considered. densitometry and HPLC have many advantages in sensitivity and separation ability. After a 11 some advarltages of two methods meritiorled above, all of these methods have many disadvantages and inconveniences. Previous purification for the application of all these methods make them less sensitive and more tedious. Immunoassay can solve these problems in part. But immunoassay also has some limitations. Specificity of immunoassay, contrary, can be considered to be disadvantages. Including this the advantages and disadvantages of immunoassay are to be discussed.

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산지별 녹용(鹿茸)류의 성분분석 연구(II) -Ganglioside 및 유리 아미노산의 분석- (Studies on the Analysis of Constituents of Deer Horn(II) -Analysis of gangliosides and free amino acids-)

  • 홍남두;원도희;김남재;장승엽;윤황금;김혜수
    • 생약학회지
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    • 제24권1호
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    • pp.38-46
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    • 1993
  • Two kinds of gangliosides contained in deer horns were determined by integrating the peaks of TLC densitometry. Japanese deer horn originated from China showed the highest gangliosides among tested samples and the upper parts in deer horns showed higher gangliosides than the lower parts. In the case of graded samples, the best grade A showed the highest content and the worst grade E did the lowest content. Sixteen kinds of free amino acids were analyzed by auto amino acid analyzer. The lower region the deer horn was, the more the total content of free amino acids was and several kinds of amino acids were contained quite regularly.

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韓國産 牛膝의 Ecdysterone 抽出과 그 生理活性에 관한 硏究 (Purification and Biological Activity of Ecdysterone from Korean Achyranthes radix)

  • 김정일;이재용;김춘수;박광의
    • 한국잠사곤충학회지
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    • 제25권1호
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    • pp.1-20
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    • 1983
  • 植物界에 昆蟲의 脫皮 호르몬이 存在하고 있는 것은 잘 알려져 있다. 本實驗에서는 韓國에서 栽培또는 自生하고 牛膝(Achyranthes 屬)에서 昆蟲 脫皮 호르몬을 抽出 精製하고 이의 最適抽出條件과 現化學的性狀을 檢討했으며 이 物質의 家蠶에 對한 生理活性을 檢定하였는 바 이 結果를 要約하면 다음과 같다. 1. 乾燥 粉碎한 牛膝뿌리 200g에 對하여 1l의 메탄올로 1時間씩 連續 3回 還流冷却 抽出하는 方法에서 ecdysterone 抽出의 收率이 가장 높았으며 試科의 粉碎 粒度가 重要함을 알았다. 2. 粗結晶의 離分 精製過程은 n-Butyl acetate에 의한 gum 狀의 高分子物質을 沈澱시킨 후 工業用硅素에 吸着을 거쳐 알루미나 chromatography에 의해서 이루어 졌으며 最適狀態에서의 粗結晶의 收率은 牛膝뿌리 kg當 約 500mg程度였다. 3. 원래 野生種이나 現在 栽培되기도 하는 Achyranthes japonica에서는 ecdysterone (20-hydroxyedysone)과 inokosterone이 抽出되었으며 이들의 含量比는 1:1임을 알았다. 이들을 純粹 分離하기 위하여 아세틸化를 한 後, 알루미나 chromatography와 alcohol分解에 의한 脫아세틸化, 이온 交換法을 거쳐 最終結晶을 얻었다. Achyanthes japonica에서는 뿌리 kg當 125mg의 ecdysterone과 小量의 inokosterone이 結晶化 되었고 inokosterone은 分離 精製過程에서 많이 消失됨을 알았다. 4. 野生種으로 알려진 Achyranthes obtusifolia에서는 ecdysterone만이 分離 結晶되었고 收率은 뿌리 kg當 284mg 程度였다. 5. 分離된 ecdysterone과 inokosterone의 理化學的性狀을 얻기 위하여 赤外線 分光分析, 紫外線分光分析, 核子氣共嗚法, 融點測定, 薄層 chromatography를 하여 標準品 또는 文獻値와 一致함을 알았다. 6. 이 物質의 生理活性을 대認하기 위하여 4齡의 家蠶幼蟲을 結紮한 後 ecdysterone을 注射에 의하여 幼蟲脫皮가 誘導되었다. 7. 人工飼科를 利用하여 ecdysterone 給與에 따른 絹物質 增加效果의 臨界期를 알기 위한 試驗結果 ecdysterone 給與는 各齡의 前半部가 效果的임을 알았다. 8. 5齡期 家蠶幼蟲에 5% 뽕잎 분말이 含有된 人工飼科를 利用하여 1, 2, 3, 5ppm의 ecdysterone을 脫皮後72時間동안 給與한 바 2ppm 添加區에서 體重 및 繭層重이 가장 무거웠고 그 以上의 添加濃度에서는 오히려 體重과 繭層重 增加의 沮害效果를 나타내었다. 2ppm 添加區에서 體重은 12%, 繭層重은 12.5% 增加를 보였고 全齡期間中 各齡의 前半部에 ecdysterone 2ppm添加의 人工飼科로 누에를 飼育하여 全繭重 6.6% 繭層重 12.9%의 增加를 보였다. 9. 5齡 後半의 ecdysterone 급여는 5齡 幼蟲期間을 20時間 단축시켰고 結果的으로 繭重 繭層重을 減少시켰다.

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