This study has been conducted to see the expression of $TGF-{\beta}_1$, c-Myc, Erb-B2 and $Thymosin-{\beta}_4$ genes in ethanol - damaged liver tissues. Experimental groups were divided into 2 groups, one where damaged liver was caused by 25% ethanol and normal group administered with purified water. Results of test showed the expression of $TGF-{\beta}_1$, c-Myc, and $Thymosin-{\beta}_4$ genes was higher in the experimental group treated with 25% ethanol than in the normal group. Erb-B2 gene was not expressed clearly. Thus, it is considered that we can expect to utilize $TGF-{\beta}_1$, c-Myc 및 $Thymosin-{\beta}_4$ as auxiliary data and find clinical meanings of diagnosis on hepatic diseases, In addition to serologic and histological examination by convergence examining the gene expression status by molecular diagnostic techniques in liver-related disease prevention and diagnosis through results of this study.
Jung, Ji Yun;Min, Byung-Gu;Park, Chung A;Byun, Sung Hui;Cho, Il Je;Kim, Sang Chan
Herbal Formula Science
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v.26
no.3
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pp.183-193
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2018
Objectives : In Traditional Korean Medicine, Epimedium koreanum Nakai has diverse pharmacological activities to treat impotence, forgetfulness, cataract and exophthalmos. Present study investigated anti-fibrogenic effects of E. koreanum water extract (EKE) in hepatic stellate cells (HSCs). Methods : To study anti-fibrogenic effects of EKE, LX-2 cells, a human immortalized HSCs, were pre-treated with $3-300{\mu}g/mL$ of EKE, and then subsequently exposed to 5 ng/mL of transforming growth $factor-{\beta}1$ ($TGF-{\beta}1$). Expression level of ${\alpha}-smooth$ muscle actin was determined by immunoblot analysis. Phosphorylation of Smad, transactivation of Smad, and expression of plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) were monitored to investigate the effect of EKE on $TGF-{\beta}1-mediated$ signaling pathway. Results : Up to $100{\mu}g/mL$, EKE did not show any cytotoxicity on LX-2 cells. Pre-treatment of EKE ($100{\mu}g/mL$) significantly inhibited ${\alpha}-smooth$ muscle actin expression induced by $TGF-{\beta}1$. In addition, EKE significantly decreased Smad2 and Smad3 phosphorylations, Smad binding element-driven luciferase activity and PAI-1 expression by $TGF-{\beta}1$. Of three flavonoid compounds found in EKE, only quercertin ($30{\mu}M$) attenuated $TGF-{\beta}1-mediated$ PAI-1 expression. Conclusion : These results suggest that EKE has an ability to suppress fibrogenic process in HSCs via inhibition of $TGF-{\beta}1/Smad$ signaling pathway.
Previous studies have shown that transforming growth factor beta ($TGF-{\beta}$) is a potent regulator of cell growth and differentiation. To study the effects of $TGF-{\beta}$ on cell morphology and cytoskeleton reorganization, we conducted a survey using Mv1Lu mink lung epithelial cells with antibodies to cytoskeletal proteins and an extracellular matrix protein. While the untreated cells showed a cuboidal shape of typical epithelia, the Mv1Lu cells displayed a drastic shape change in the presence of $TGF-{\beta}$. This alteration was most prominent when near-confluent cells were treated with $TGF-{\beta}$. Since the morphology alteration is known to be accompanied by the reorganization of cytoskeletal proteins in other cell types, we investigated the intracellular distribution of the three major cytoskeletal structures: microfilaments, microtubules, and intermediate filaments. In the microfilament system, $TGF-{\beta}$ induced new stress fiber formation, which was caused primarily by the polymerization of cytoplasmic G-actin. However, $TGF-{\beta}$ appeared not to induce any significant changes in microtubular structures and vimentin filaments as determined by indirect fluorescence microscopy. Finally we confirmed the rapid accumulation of fibronectin by immunoblot analysis and chased the protein locations by immunofluorescence microscopy.
Transforming growth factor-${\beta}$ (TGF-${\beta}$), a hormonally active polypeptide found in normal and transformed tissues. regulates cellular growth and phenotyphic plasticity. We have previously shown that H-ras. but not N-ras. induces invasive phenotype in MCF10A human breast epithelial cells. In this study. we wished to examine the effect of TGF-${\beta}$ on H-ras-induced invasion and motility in MCFI 10A cells by performing in vitro invasion assay and wound migration assay. (omitted)
Objective: This study was carried out to investigate the effects of 3-dimensional co-culture of human endometrial cells decidualized with progesterone and TGF-${\beta}1$ on the development of 2-cell mouse embryos. Methods: Stromal and epithelial cells isolated from human endometrial tissue were immunostained for cytokeratin and vimentin. Expression of TGF-${\beta}1$, its receptor-1, -2, integrin-${\beta}3$ and prolactin in mono or co-culture according to three different hormone conditions was investigated by RT-PCR. Differential staining was used to investigate the number of ICM and trophectoderm of hatched mouse blastocysts in different three conditions. Results: The immunohistochemical study was positive for cytokeratin or vimentin and confirmed that epithelial and stromal cells were isolated from endometrial tissue successfully. In co-culture, TGF-${\beta}1$, its receptor-1, integrin-${\beta}3$ and prolactin except TGF-${\beta}1$-r2 were expressed in progesterone dominant condition. The hatching and attaching rate were higher in the co-culture with decidualized cells (p<0.05). However, we observed that lots of the incomplete hatched blactocysts attached on non-decidualized cells. The ICM number of hatched mouse blastocysts was higher in co-culture with decidualized and non decidualized cells than media only culture (p<0.05). The trophectoderm number of hatched blastocyst was higher in the co-culture with decidualized cells than non-decidualized cells or media only culture (p<0.05). Conclusion: The administration of progesterone, estrogen and TGF-$\beta$ could induce decidualization of stromal and epithelial cells isolated from human endometrial tissue using 3-dimensional co-culture, and the decidualization of human endometrial cells could increase the hatching and attaching rate of 2-cell mouse embryos.
Kim, Joohyung;Kim, Seong-Kyun;Heo, Seong-Joo;Koak, Jai-Young;Lee, Woo-Sung;Lee, Joo-Hee;Park, Ji-Man
The Journal of Korean Academy of Prosthodontics
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v.54
no.2
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pp.120-125
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2016
Purpose: The purpose of this study is to identify the effect of mesenchymal stem cell proliferation on recombinant human transforming growth factor-beta (rhTGF-${\beta}2$) / poly (D,L-lactide-co-glycolide) (PLGA) treated titanium discs by electrospray. Materials and methods: Anodized titanium surface coated with PLGA was used for a control group to compare anodized titanium surface coated with 125 ng/ml and 500 ng/ml rhTGF-${\beta}2$ as test groups. Atomic force microscope (AFM) test was utilized to determine the difference in coating surface roughness, and field-emission scanning electron microscopy (FE-SEM) was taken to visualize even distribution of coating particles on titanium discs. The mesenchymal stem cell proliferation was tested by using MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5 diphenyl-tetrazolium bromide) assay on 1st, 4th, 7th days. Results: According to AFM results, there was no statistically significant difference in titanium discs treated with PLGA and with rhTGF-${\beta}2$/PLGA (P>.05). MTT assay test results showed that there was statistically significant difference in mesenchymal stem cell proliferation on test groups compared to control groups at 7th day, and cell viability on discs coated with rhTGF-${\beta}2$ was significantly higher than control groups (P<.05). Conclusion: Titanium surface coated with rhTGF-${\beta}2$/PLGA shows statistically significant higher cell proliferation and the titanium surface coated with the higher concentration of rhTGF-${\beta}2$ presents faster cell growth activity.
It is well known that unidentified factors in sera, hormones and growth factors promote the proliferation of granulosa cells and nuclear maturation of bovine COCs in vitro. Attemps had been developed the simple composition of culture media and similar system to in vivo conditions has been applied. In the present study, we investigated the effect of TGF-${\beta}$ on in vitro maturation and in vitro development of Hanwoo COCs. When the COCs were matured in TCM 199 containing 0.1, 1 or 10 ng/ml TGF-${\beta}$ for 24 hrs, metaphaseⅡ of COCs were obtained 95.8%, 100% of matured COCs, respectively and there were no differences among the concentrations of TGF-${\beta}$. Matured COCs with TGF-${\beta}$ cultured in maturation medium after in vitro fertilization, developmental rate to blastocyst were 0~0.8%. Matured COCs with TGF-${\beta}$ were cultured in TCM 199+10% FBS, 0.8% BSA, 0.1% PVA, blastocyst formation were showed in 12.4%, 12.8%, 8.5% of those and cultured in IVMD or IVD without serum were 38.4%, 34.8%, respectively. There were significant differences among the media (P<0.05). TGF-${\beta}$ is available for i vitro maturation of bovine COCs, but further investigation would be need for finding the synergistic autocrine/paracrine fashion of other growth factors in early bovine development.
Park, Dong-Wook;Choi, Dong-Soon;Kim, Mi-Ran;Hwang, Kyung-Joo;Jo, Mi-Yeong;Ahn, Seong-Hee;Min, Churl-K.;Ryu, Hee-Sug
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.30
no.1
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pp.65-75
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2003
Objectives: To investigate the role of TGF (Transforming growth factor-$\beta$) involved in the paracrinic communication during decidualization between UEC (uterine epithelial cells) and USC (uterine stromal cells), we have employed a co-culture system composed of human endometrial epithelial and stromal cells in defined hormonal conditions. Design: In the co-culture, endometrial epithelial cells cultured in the matrigel-coated cell culture insert are seeded on top of the endometrial stromal cells cultured within a collagen gel. The co-culture was maintained for 48 hours under the following hormonal conditions: progesterone dominant condition (100 nM P4 and 1 nM E2) or estrogen-dominant condition (100 nM E2 and 1 nM P4). 10 ng/ ml HGF and/or 10 ng/ml TGF-$\beta$1 are added. Methods: RT-PCR is utilized to detect mRNAs quantitatively. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and immunohistochemical staining are utilized to detect proteins in the tissue. Results: Prolactin mRNA is expressed in the co-cultured stromal cells under the progesterone dominant condition. TGF-$\beta$1 and its receptors are expressed in both the co-cultured epithelial and stromal cells irrespective of the steroid present, which is in contrast with no or negligible expression of TGF-$\beta$1 or its receptor in cells separately cultured. Both estrogen and progesterone significantly elevate the concentration of hepatocyte growth factor (HGF) in the conditioned medium of the co-culture with the value of 4, 325 pg/ml in E2-dominant and 2, 000 pg/ml in P4-dominant condition compare to 150 pg/ml in no hormone. In separately cultured stromal cells, administration of HGF induces the expression of TGF receptor 1 in both hormonal conditions, but induction of TGF receptor 2 is only manifest in the P4-dominant condition. Administration of TGF-$\beta$ and HGF directly induce the decidualization marker prolactin mRNA in separately cultured stromal cells. Conclusion: It is likely that steroid hormones induces prolactin mRNA indirectly by promoting the cell to cell communication between the stromal and the epithelial cells. TGF-$\beta$ and HGF are two possible paracrine mediators in the human endometrial decidualization.
Ha Il Soo;Um Eun Young;Kang Hee-Gyung;Hahn Hye Won;Park Hye Won;Cheong Hae Il;Choi Yong
Childhood Kidney Diseases
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v.6
no.1
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pp.85-91
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2002
Purpose: Phosphodiesterase (PDE) inhibitor increases the cellular content of cAMP, and cAMP suppresses connective tissue growth factor (CTGF) expression induced by TGF-${\beta}1$. Therefore, we investigated whether PDE inhibitor suppresses renal fibrosis without suppression of TGF-${\beta}1$. Materials and Methods : Renal interstitial fibrosis was produced by ligation of left ureter in Sprague-Dawley rats. Cilostazol, a selective PDE3 inhibitor, and dipyridamole, a hybrid PDE5, PDE6, and PDE8 inhibitor, were provided in drinking water for 7 days. In addition to the Masson-trichrome score of renal tissue, the concentration of fibronectin and TGF-${\beta}1$ in renal tissue- conditioned media was measured by ELISA. Results : Masson- trichrome score and fibronectin concentration were significantly lower in cilostazol-treated group compared to the control group (P<0.05). Though dipyridamole treatment seemed to suppress the Masson- trichrome score and fibronectin concentration too, the decrements were not statistically significant. There was no difference in TGF-${\beta}1$ concentration among the groups. Conclusion: A selective PDE3 inhibitor cilostazol suppresses renal fibrosis without alteration of TGF-${\beta}1$ expression. (J Korean Soc Pediatr Nephrol 2002 ;6 : 85-91)
Lee, Seung Ho;Jee, Hwa Young;Kim, Hwang Min;Yeh, Byung Il
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.51
no.5
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pp.523-527
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2008
Purpose : Several cytokines play important roles in the inflammatory process of Henoch-$Sch\ddot{o}lein$ Purpura (HSP). It is likely that transforming growth $factor-{\beta}$ ($TGF-{\beta}$) is involved in the pathogenesis of HSP. The purpose of this study is to investigate whether $TGF-{\beta}$ promoter polymorphism is associated with the renal involvement of childhood HSP. Methods : Thirty-four patients younger than 15 years, who had been diagnosed with HSP, as well as 27 controls, were examined. Patients and controls were genotyped for $TGF-{\beta}$ C-509T by polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP). Results : The T allelic frequencies in patients and controls showed no difference (45% vs. 48.8%). No allele or genotype differences between the group of HSP group and control group were observed. The frequencies of $TGF-{\beta}$ 509 genotypes TT, TC, and CC were no different between patients and controls (26% vs. 22%). The TT genotype of polymorphism of the $TGF-{\beta}$ C-509T gene had no relation to the susceptibility of children to HSP and renal involvement in HSP. Conclusion : $TGF-{\beta}$ T allele may not be related to the susceptibility of children to HSP. The TT genotype of polymorphism of the $TGF-{\beta}$ C 509T gene does not appear to have an influence on renal involvement in childhood HSP.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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