An antimicrobial substance-producing microorganism was isolated from soil samples. Based of the taxonomic characteristics of its morphological, cultural, physiological properties and 16s rRNA sequence alignment, this microorganism was identified as Pseudomonas aeruginosa, and we named Pseudomonas aeruginosa EL-KM. The optimal culture condition for production of antimicrobial substance was 1% mannitol, 0.4% yeast extract, 0.5% Nacl, 0.2% $K_2SO_4$, 100$\mu$M $MgSO_4$.$7H_2O$, 10$\mu$M $CaCl_2$.$2H_2O$, 1$\mu$M $FeSO_4$.$7H_2O$, 1$\mu$M $MnSO_4$.$4-5H_2O$, initial pH 7 and 200 rpm at 3$0^{\circ}C$. The purification of the antimicrbial substance was performed by silica gel column chromatographys, and fraction with TLC $R_f$ 0.77 value represented good antimicrobial activity. The crude antimicrbial substance was stable within a pH range of 3-10 and temperature range of 4$^{\circ}C$-121$^{\circ}C$ autoclaving. This crude antibacterial substance acted as bacteriolytic agent against Vibrio cholerae non-Ol ATCC 25872, and also exhibited excellent properties, when the substance was demonstrated against many other gram-positive, gram-negative bacteria, yeast and fungi.
A bacterial strain inhibiting the growth of Vibrio anguillarum, the causative agent of vibriosis, was isolated from fish intestines. The isolated strain HS36 was identified as Aerococcus urinaeequi based on the characteristics of the genus according to Bergey's Manual of Systematic Bacteriology and by 16S rRNA sequencing. The growth rate and antibacterial activity of strain HS36 in shaking culture were higher than those in static culture, while the optimal pH and temperature for antibacterial activity were 7.0 and 30℃, respectively. The active antibacterial substance was purified from a culture broth of A. urinaeequi HS36 by Sephadex G-75 gel chromatography, Sephadex G-25 gel chromatography, and reverse-phase high-performance liquid chromatography. Its molecular weight, as estimated by Tricine SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, was approximately 1,000 Da. The antibacterial substance produced by strain HS36 was stable after incubation for 1 h at 100℃. Although its antibacterial activity was optimal at pH 6-8, activity was retained at a pH range from 2 to 11. The purified antibacterial substance was inactivated by proteinase K, papain, and β-amylase treatment. The newly purified antibacterial substance, classified as a class II bacteriocin, inhibited the growth of Klebsiella pneumoniae, Salmonella enterica, and Vibrio alginolyticus.
대두 발효식품으로부터 분리 동정한 B. subtilis HS 25가 생산한 항균물질의 특성을 검토하였다. 열안정성을 검토한 결과, $100^{\circ}C$에서 10분 처리에서는 항균활성이 전혀 떨어지지 않았지만 15분 이상의 처리에서는 항균활성이 약간 떨어지는 경향을 보였다. pH 안정성은 pH $4.5{\sim}5.0$의 산성측보다 pH $7.42{\sim}12.0$까지의 알칼리 범위에서 안정된 항균활성을 유지하였다. 특히, E. coli 및 P. mirabilis에 대한 항균활성은 pH 12.0에서도 대조구와 거의 대등한 활성을 나타내었다. 최소저해농도는 E. coli가 5 mg/mL로 가장 낮았으며, P. mirabilis는 7.5 mg/mL, S. aureus, S. enteritidis, K. pneunoniae 및 V. parahaemolyticus 균주에서는 15mg/mL를 나타내었다. B. subtilis HS 25 균주가 생산한 항균물질을 E. coli, S. enteritidis 및 P. mirabilis에 각각 처리하였을 때 균체의 표면이 불규칙적으로 변형되어 심한 형태적 변화가 일어났음을 관찰할 수 있었다. B. subtilis HS 25균주가 생산한 항균물질은 papain에 의해서는 분해되지 않지만, A. orzae 유래의 protease과 pancreatin 및 pepsin의 효소에 의해서 완전히 분해되어 항균활성이 전혀 나타나지 않았다.
Itching is one of the major diagnostic criteria of atopic dermatitis (AD) and one of its most troublesome symptoms that provokes the desire to scratch. Effective control of itching is believed to be one of the basic approaches in controlling AD. The purpose of this study was undertaken to investigate the antipruritic effect of ethanol extracts from Perillae Japonicae Semen leaves (PJSL) and Chaenomelis Fructus (CF) on the scratching behavior induced by pruritogen such as compound 48/80 or substance P in hairless mice. PJSL or CF treatment inhibited histamine release in HMC-1 stimulated compound 48/80 or substance P in a dose-dependant manner. In particularly, co-treatment PJSL ($50{\mu}g/mL$) plus CF ($100{\mu}g/mL$) significantly inhibited histamine release in HMC-1 stimulated compound 48/80 or substance P. PJSL, CF or PJSL plus CF was administered orally for 2 h and then compound 48/80 ($50{\mu}g/site$) or substance P ($100{\mu}g/site$) was injected into rostral back, and scratching of the injected site by the hind paw was counted for 1 h. PJSL or CF administration reduced the scratching behavior induced by compound 48/80 as well as substance P in a dose-dependent manner. Furthermore, co-administration of PJSL and CF markedly suppressed the scratching behavior induced by compound 48/80 as well as substance P. These suppressive effects were synergistically increased by their combination. From the preliminary observations, we considered that ethanol extracts from PJSL and CF could be an effective natural materials for itching treatment.
Pyricularia oryzae (P. oryzae), the cause of rice blast, is one of the most important fungal pathogens of rice. Seventy strains of marine fungi were isolated from marine algae, and it was measured antifungal activity against P. oryzae. Metabolites of marine fungus A-248 which isolated from marine algae showed strong antifungal activity against P. oryzae. The antifungal substance from the metabolites of marine fungus A-248 was extracted with ethylacetate, and then purified by preparative TLC and reverse-phase HPLC. The minimum inhibitory concentration (MIC) value was $0.18\mu g/mL$ for the antifungal activity of the substance purified from A-248 metabolites. The purified substance was similar to antifungal activity of rhizoxin, which is a commercial antifungal agent.
국내에 아직 연구보고된 바 없는 청국장 점질물의 이화학적 특성을 조사하기 위하여 B. natto와 B. subtilis로 발효시킨 청국장으로부터 각각 6.3%, 5.0%의 점질물을 얻었다. 이 점질물의 조단백질 함량은 모두 약 61% 정도이었으며, 점질물의 단백질 중 아미노태 질소함량은 약 32%이었고, 구성아미노산 중에는 글루탐산이, 무기질 중에는 K함량이 특히 높았다. 점질물의 점도는 5% 농도에서는 설탕 15% 용액의 점도보다도 높게 나타났다. B. natto와 B. subtilis로부터 분리한 점질물은 pH5.0과 7.0, pH5.0에서 각각 최저 투과도를 나타내었고, 280nm에서 측정한 흡광도는 각각 pH 5.5, pH 4.0과 10.5에서 최저흡광도를 나타내었다. 점질물의 fibrinolytic activity는 B. natto가 0.438 unit/mg protein, B. subtilis가 0.163 unit/mg protein이었고, $100^{\circ}C$에서 5분간 열처리하여도 효소활성이 90% 정도 유지되었으며, 30분간 열처리하였을 때도 45% 정도의 효소활성이 남아 있었다.
Dorsal root ganglion(DRG) cells are primary sensory neurons which contain some biologically active neuropeptides which play a role as neurotransmitters or neuromodulators. This study was performed to observe normal distribution of calcitonin gene-related peptide (CGRP) and substance P (SP) immunoreactive cells and colocalization of CGRP and SP in a single DRG cell of the lumbar DRGs($L_1{\sim}L_6$) in the Wistar Kyoto(WKY) rat by immunohistochemistry. About 55.8% of DRG cells contained CGRP-immunoreactivity, while about 12.7% of DRG cells showed SP-immunoreactivity. There was no significant difference in percentage of each neuropeptied-immunoreactive cells between each neuropeptide-immunoreactive cells between each levels of DRGs ($L_1{\sim}L_6$) (p>0.01). In size distribution, CGRP-immunoreactive cells were identified below $1,500{\mu}m^2$; SP-immunoreactive cells below $600{\mu}m^2$. In serial sections, about 86.7% of the SP immunoreactive cells contained CGRP immunoreactivity.
A strain of Streptomyces sp. SK-862, isolated from soil in Wonju city, was able to prodce a biologically active substance that has a strong inhibitory activity against proteolsis by trypsin. The inhyibitory substance was extracted by n-butanol, and then purified by the adsorption chromatography followed by the reverse-phase high performacne liquid chromatography. The purified substance was stable over the pH range from 2 to 10, but was unstable when treated at 8$0^{\circ}C$ for 60 min. This substance was soluble in water, methanol, ethanol nd butanol, but insoluble in chlorofrom and ethylacetate. The Rf value of the purified substance on the thin layer chromatography were 0.56 in n-butanol : methanol : water(5 : 3 : 1v/v) solvent system compare dto 0.23 in ethanol : ammonium hydoxide : water(8 : 1 : 1v/v) solvent system. This substance has maximum absorption at 259 nm. The chemical reaction of the substance was negative for sugar but positive for ninhydrine and iodine reaction.
To investigate the anti-inflammatory and analgesic effects of Herba Chelidoniie, the extracts of Herba Chelidoniie treated in arthritic rat model. Complete Freund,s Adjuvant(CFA) were injected in the subcutaneous tissue of left foot paw of rats to induce arthritis. Herba Chelidonii extracts(HC) was administered immediately into the peritoneal cavity after CFA injection for 12 days. The immunohistochemical stainings for calcitonin gene-related peptide(CGRP) and substance P in the L4, L5 and L6 spinal dorsal horn and ganglia were done, and the paw swelling was measured with a micrometer and the blood leukocytes were counted. The results were as follows : The paw swelling of HC treated group was significantly decreased in 12th day after CFA injection compare to control group. The change of differential leukocytes counts of HC treated group increased the ratio of lymphocytes, and decreased the ratio of neutrophils compare to control group. The extent of CGRP immunoreactive nerve fiber of dorsal horn of HC treated group was weakly stained compare to control group. The number of CGRP immunoreactive neurons of L6 spinal cord of HC treated group was significantly decreased compare to control group. The extent of substance P immunoreactive nerve fiber of dorsal horn of He treated group was weakly stained compare to control group. The number of substance P immunoreactive neurons of L4, L5 and L6 spinal cord of HC treated group was significantly decreased compare to control group. These experimental results suggest that Herba Chelidonii extracts reduce the number of CGRP and substance P immunoreactive neurons and nerve fibers of spinal dorsal horns and ganglia, and decrease paw swelling in arthritic rat model, which may be closely related to analgesic and antiinflammatory effects of Herba Chelidonii.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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