Erwinia amylovora and Erwinia pyrifoliae cause fire blight and black-shoot blight, respectively, in apples and pears. E. pyrifoliae is less pathogenic and has a narrower host range than that of E. amylovora. Fire blight and black-shoot blight exhibit similar symptoms, making it difficult to distinguish one bacterial disease from the other. Molecular tools that differentiate fire blight from black-shoot blight could guide in the implementation of appropriate management strategies to control both diseases. In this study, a primer set was developed to detect and distinguish E. amylovora from E. pyrifoliae by conventional polymerase chain reaction (PCR). The primers produced amplicons of different sizes that were specific to each bacterial species. PCR products from E. amylovora and E. pyrifoliae cells at concentrations of 104 cfu/ml and 107 cfu/ml, respectively, were amplified, which demonstrated sufficient primer detection sensitivity. This primer set provides a simple molecular tool to distinguish between two types of bacterial diseases with similar symptoms.
Objectives : Tetrapanacis Medulla and Akebiae Caulis are one of the most frequently adulterated herbal medicines because of their confusability of terms in the ancient writings and the similarity of morphological features of dried herbal products. The major adulterant is Aristolochia manshuriensis (Guanmutong) which has a serious safety concern with its toxicity. To ensure the safety and quality of the two herbal medicines, it is necessary to discriminate the toxic adulterant from authentic species. The aim of this study is to develop SCAR markers and to establish the multiplex-SCAR assay for discrimination of four plant species related to Tetrapanacis Medulla and Akebiae Caulis. Methods : ITS regions of fifteen samples of four species (Tetrapanax papyrifer, Fatsia japonica, Aristolochia manshuriensis, and Akebia quinata) collected from different sites were amplified and sequenced. Fifteen obtained ITS sequences were aligned and analysed for the detection of species-specific sequence variations. The SCAR markers were designed based on the sequence alignments and then, multiplex-SCAR assay enhancing rapidity was optimized. Results : ITS sequences clearly distinguished the four species at the species level. The developed SCAR markers and multiplex-SCAR assay were successfully discriminated four species and detected the adulteration of commercial product samples by comparison of the amplified DNA fragment sizes. Conclusions : These SCAR markers and multiplex-SCAR assay are a rapid, simple, and reliable method to identify the authentic Tetrapanacis Medulla and Akebiae Caulis from adulterants. These genetic tools will be useful to ensure the safety and to standardize the quality of the two herbal medicines.
To study the characteristics of rocky intertidal invertebrate fauna on the coastal areas of the East Sea, seven regions including Dokdo, Ulleungdo, Gyeongju, Pohang, Yeongdeok, Uljin, and Gangwondo, the common species ratio (%) and similarity index using Bray-Curtis similarity matrix were calculated. The contributed species for dissimilarity between Dokdo and the other East Sea's coastal areas were selected by using SIMPER. The common species ratio and the cluster analysis showed that Ulleungdo presented the highest similarity. However, Yeongdeok showed the highest similarity in the eastern costal areas, and Gangwondo showed the lowest one. However the cluster analysis revealed the discrimination of the rocky intertidal invertebrate community on Dokdo with others region caused by the particularity of rocky shores exposed to strong wave action and by the particular distribution of rocky intertidal invertebrate fauna in Dokdo.
Jo, Ick Hyun;Kim, Young Chang;Kim, Dong Hwi;Kim, Kee Hong;Hyun, Tae Kyung;Ryu, Hojin;Bang, Kyong Hwan
Journal of Ginseng Research
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v.41
no.4
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pp.444-449
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2017
The development of molecular markers is one of the most useful methods for molecular breeding and marker-based molecular associated selections. Even though there is less information on the reference genome, molecular markers are indispensable tools for determination of genetic variation and identification of species with high levels of accuracy and reproducibility. The demand for molecular approaches for marker-based breeding and genetic discriminations in Panax species has greatly increased in recent times and has been successfully applied for various purposes. However, owing to the existence of diverse molecular techniques and differences in their principles and applications, there should be careful consideration while selecting appropriate marker types. In this review, we outline the recent status of different molecular marker applications in ginseng research and industrial fields. In addition, we discuss the basic principles, requirements, and advantages and disadvantages of the most widely used molecular markers, including restriction fragment length polymorphism, random amplified polymorphic DNA, sequence tag sites, simple sequence repeats, and single nucleotide polymorphisms.
Sim, Mi-Ok;Jang, Ji Hun;Jung, Ho-Kyung;Hwang, Taeyeon;Kim, Sunyoung;Cho, Hyun-Woo
The Korea Journal of Herbology
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v.34
no.6
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pp.91-97
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2019
Objective : To establish a reliable tool between for the distinction of original plants of Sanguisorbae Radix, we analyzed the complete chloroplast genome sequence of Sanguisorbae Radix and identified single nucleotide polymorphisms (SNPs). Materials and methods : The chloroplast genome sequence of Sanguisorba officinalis, Sanguisorba tenuifolia f. alba (Trautv. & Mey.) Kitam and Sanguisorba tenuifolia Fisch. ex Link obtained using next-generation sequencing technology were described and compared with those of other species to develop specific markers. Candidate genetic markers were identified to distinguish species from the chloroplast sequences of each species using Modified Phred Phrap Consed and CLC Genomics Workbench programs. Results : The structure of the chloroplast genome of each sample that had been assembled and verified was circular, and the length was about 155 kbp. Through comparative analysis of the chloroplast sequences, we found 220 nucleotides, 158 SNPs, and 62 Indel (insertion and/or deletion), to distinguish Sanguisorba officinalis, Sanguisorba tenuifolia f. alba (Trautv. & Mey.) Kitam and Sanguisorba tenuifolia Fisch. ex Link. Finally, 15 specific SNP genetic markers were selected for the verification at positions. Avaliable primers for the dried herb, which is used as medicine, were used to develop the PCR amplification product of Sanguisorbae Radix to assess the applicability of PCR analysis. Conclusion : In this study, we found that Fendel-qPCR analysis based on the chloroplast DNA sequences can be an efficient tool for discrimination of Sanguisorba officinalis, Sanguisorba tenuifolia f. alba (Trautv. & Mey.) Kitam and Sanguisorba tenuifolia Fisch. ex Link.
Moths have a well-developed sex pheromone communication system. Male moths exhibit an extremely sensitive and selective sex pheromone detection system so that they can detect the sex pheromone produced by conspecific females and locate them for successful mating. Using the pheromone detection system, male moths display characteristic stereotypic behavioral responses, flying upwind to follow intermittent filamentous pheromone strands in pheromone plume. The chemical composition of female sex pheromone in moths, typically comprised of multiple compounds, is species-specific. Male moths contain specialized pheromone receptor neurons on the antennae to detect conspecific sex pheromone accurately, and distinguish it from the pheromones produced by other species. The signals from pheromone receptor neurons are integrated and induce relevant behavior from the male moths. Male moths also contain olfactory sensory neurons in pheromone sensilla, specialized for pheromone-related behavioral antagonist compounds, which can enhance discrimination between conspecific and heterospecific pheromones. Here we review reports on the sex pheromone detection system in male moths and their related responses, and suggest future research direction.
To determine whether FT-IR spectroscopy combined with multivariate analysis for whole cell extracts can be used to discriminate major leguminous plant at metabolic level, seed extracts of six leguminous plants were subjected to Fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR). FT-IR spectral data from seed extracts were analyzed by principal component analysis (PCA), partial least square discriminant analysis (PLS-DA) and hierarchical clustering analysis (HCA). The PCA could not fully discriminate six leguminous plants, however PLS-DA could successfully discriminate six leguminous plants. The hierarchical dendrogram based on PLS-DA separated the six leguminous plants into four branches. The first branch was consisted of all three Vigna species including Vigna radiata var. radiate, Vigna angularis var. angularis and Vigna unguiculata subsp. Unguiculata. Whereas Pisum sativum var. sativum, Glycine max L and Phaseolus vulgaris var. vulgaris were clustered into a separate branch respectively. The overall results showed that metabolic discrimination system were in accordance with known phylogenic taxonomy. Thus we suggested that the hierarchical dendrogram based on PLS-DA of FT-IR spectral data from seed extracts represented the most probable chemotaxonomical relationship between six leguminous plants.
A discrimination technique for domestic and imported Scutellaria baicalensis was developed using an energy dispersive X-ray fluorescence spectrometer (ED-XRF). Mineral content ratios, of a total of 43 species, including P, S, Cl, K, Ca, Mn, Fe, Cu, and Zn, were measured among 204 samples. Macro element content ratios and trace element content ratios were determined using the standardless fundamental parameters (SLFP) analysis. Inorganic element ratios of P, S, K, Ca, Cl, Mn, and Fe were significantly different between domestic and imported samples. The result from the canonical discriminant analysis showed that the accuracy of geographical origin discrimination was 95.15%; the correlation coefficient was 0.888. It was concluded that this technique could be used as a useful method in discriminating the geographical origins between domestic and imported Scutellaria baicalensis.
The mitochondrial DNA (mtDNA) restriction fragment length polymorphi는 (RFLPs) of five populations were analyzed to delineate the stocks of Penaeus chinensis (Osbeck) in the Yellow Sea. Comparison of P. chinensis with P. japonicus to clarify the nucleotide divergence between two species was also carried out. Based on the fragment patterns, three composite haplotypes were analyzed in P. chinensis mtDNA as four naplotypes were in P. japonicus. Most individuals of each P. chinensis population are shared by one dominant haplotype. Another two haplotypes haying variations at the C/a I and hull sites were also distributed evenly in the Korean and Chinese populations. It is suggested that the gene exchange occurring between populations in the Yellow Sea is frequent. Average length of the mtDNA molecule was estimated to be about 16.44 kb in P. chinensis and 16.31 kb in P. japonicus, Sequence divergence (p) of mtDNA between two species estimated by using Upholt's (1977) fomula was $13.7\%$.
During the floristic survey on Phnom Bokor National Park, Kampot, Cambodia, we encountered Balanophora fungosa var. indica, which is a tropical holoparasitic plant. To identify its host species, we collected host roots and trees nearby and tried to identify them using DNA barcoding approach. We applied plastid rbcL and matK gene regions as DNA barcode markers, and successfully amplified and sequenced the markers from 15 host roots and seven tree samples. Obtained host root sequences were identified as Primulaceae, Celastraceae, Myrtaceae, and Oleaceae, while trees nearby are Oleaceae, Myrtaceae, Sapindaceae, Rosaceae, Clusiaceae, Ericaceae, and Lauraceae. At genus level, host species are identified as Myrsine, Euonymus, Syzygium, and Olea, but failed in species discrimination. Myrsine (Primulaceae) and Olea (Oleaceae) are reported here as host species of B. fungosa var. indica for the first time. Further sampling and comparative work, and DNA barcoding will help recognize the biodiversity of the area and host species of Balanophora, together with their evolution.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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