벼(Oryza sativa L.)의 가식부인 쌀의 brassinosteroid 활성물질의 존재를 구명하기 위하여 벼를 도정하여 미강과 백미를 얻고 이들을 각각 MeOH로 추출하여 얻어진 추출물을 rice inclination test의 생물검정법으로 검정한 결과 활성이 인정되었다. 각각의 추출물을 생물검정법을 지표로 용매분획, silica gel adsorption chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, charcoal adsorption chromatography 등의 수법으로 brassinosteroid 활성물질을 정제하고, silica gel adsorption chromatography, TLC 등에 의해 활성본체를 분리하고 각 활성획분을 HPLC에 의해 활성본체 구명을 시도한 결과 미강의 활성획분에서는 castasterone과 teasterone이 동정되었다. 완숙된 쌀에서 brassinosteroid 활성물질의 확인 및 동정은 본 연구가 최초로 생각되며, brassinosteroid 활성물질은 주로 미강에 존재하였으며, 그 함량은 g중량당 castasterone이 0.15 ng 이고 teasterone은 0.37 ng 수준이었다.
본 연구에서는 야관문의 열수 및 ethanol추출조건에 따른 항산화활성의 변화를 비교평가 하고자 하였다. 야관문에 존재하는 항산화물질은 용매분획 과정 중에서 열수추출조건에 비해 ethanol 추출조건에서 항산화 성분이 잘 이행되었고, 열수추출조건에서는 상대적으로 활성이 낮게 나타났다. Silica gel adsorption column chromatography 상의 chloroform-methanol의 용매계에서 각 획분에 대해 DPPH-radical scavenging 효과를 측정한 결과, 열수 추출한 경우는 methanol함량이 50% 부근을 중심으로 활성이 나타났다. 반면 ethanol 추출한 경우는 methanol함량이 50-60% 부근을 중심으로 활성이 나타나, 열수 추출물과 ethanol 추출물의 항산화활성 물질의 성질은 약간의 차이를 나타냄을 알 수 있었다. Sephadex LH-20의 gel filtration으로 분획한 결과 두가지 처리조건 모두 bed volumn에 대한 elution volumn의 비(Ve/Vt)가 1.25-1.52의 용출범위(1.1-2.2 g)에 활성이 인정되었다. 열수추출 및 ethanol 추출 조건의 경우 항산화 활성물질의 HPLC retention time은 각각 7.25분 그리고 7.41분으로 나타났지만 두 peak의 HPLC상의 거동이 일치하여 동일한 성분일 것으로 추정하였다.
본 연구에서는 국산배의 기능학적 우수성 증명을 위해 국산배로부터 생리활성 화합물을 밝히고자 하였다. 이에 배 과피 MeOH 추출물을 용매분획하여 얻은 EtOAc-산성획분을 대상으로 Sephadex LH-20 column chromatography와 ODS-HPLC를 이용하여 순차적으로 정제를 행하여 2종의 화합물을 단리하였다. 단리된 화합물 1과 2는 MS 및 NMR 분석을 통하여 각각 quercetin 3-O-${\beta}$-Dglucopyranoside(화합물 1)와 3,5,6,7,8,3',4'-heptahydroxyflavan [(-)-dulcisflavan, 화합물 2)]으로 동정되었다. 단리된 화합물 1은 동양배로부터, 그리고 화합물 2는 배로부터 처음 동정된 화합물이다. 본 연구결과가 국산배의 기능학적 우수성 증명을 위한 기초자료로 활용되길 기대한다.
Choi, Sang Won;Jang, Yeon Jeong;Lee, Yu Jin;Leem, Hyun Hee;Kim, Eun Ok
Preventive Nutrition and Food Science
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제18권4호
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pp.256-262
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2013
Four functional constituents, oxyresveratrol 3'-O-${\beta}$-D-glucoside (ORTG), oxyresveratrol (ORT), t-resveratrol (RT), and moracin (MC) were isolated from the ethanolic extract of mulberry (Morus alba L.) twigs by a series of isolation procedures, including solvent fractionation, and silica-gel, ODS-A, and Sephadex LH-20 column chromatographies. Their chemical structures were identified by NMR and FABMS spectral analysis. Quantitative changes of four phytochemicals in mulberry twigs were determined by HPLC according to cultivar, producing area, and heat processing. ORTG was a major abundant compound in the mulberry twigs, and its levels ranged from 23.7 to 105.5 mg% in six different mulberry cultivars. Three other compounds were present in trace amounts (<1 mg/100 g) or were not detected. Among mulberry cultivars examined, "Yongcheon" showed the highest level of ORTG, whereas "Somok" had the least ORTG content. Levels of four phytochemicals in the mulberry twigs harvested in early September were higher than those harvested in early July. Levels of ORTG and ORT in the "Cheongil" mulberry twigs produced in the Uljin area were higher than those produced in other areas. Generally, levels of ORTG and ORT in mulberry twigs decreased with heat processing, such as steaming, and microwaving except roasting, whereas those of RT and MC did not considerably vary according to heat processing. These results suggest that the roasted mulberry twigs may be useful as potential sources of functional ingredients and foods.
This study investigated the protective effect of the butanol (BuOH) fraction from fermented Laminaria japonica extract (BFLJ) on AAPH-induced oxidative stress in porcine kidney epithelial cells (LLC-PK1 cells). L. japonica was fermented by Aspergillus oryzae at $35{\pm}1^{\circ}C$ for 72 h. Freeze-dried fermented L. japonica was extracted with distilled water, and the extracted solution was mixed with ethanol and then centrifuged. The supernatant was subjected to sequential fractionation with various solvents. The BuOH fraction was used in this study because it possessed the strongest antioxidant activity among the various solvent fractions. The BuOH fraction of fermented L. japonica had a protective effect against the AAPH-induced LLC-PK1 cells damage and increased cell viability while reducing lipid peroxidation formation and increased activities of antioxidant enzymes such as superoxide dismutase and glutathione peroxidase. The inhibitory effect of BFLJ on lipid peroxidation formation had a higher value of $0.11{\pm}0.01nmol$ MDA at $100{\mu}g/mL$ concentration in comparison with intact BuOH fraction showing $0.22{\pm}0.08nmol$ MDA at the same concentration. Furthermore, BFLJ treatment increased glutathione concentration. GSH concentration in the cell treated with BFLJ of $100{\mu}g/mL$ was $1.80pmol/L{\times}10^5cells$. These results indicate that BFLJ protects the LLC-PK1 cells against AAPH-induced cell damage by inhibiting lipid peroxidation formation and increasing antioxidant enzyme activities and glutathione concentration.
Background: Research on hot water extracts of medicinal plants that are easily applicable in the clinical setting is essential. To confirm the anti-inflammatory-related active compounds present in the hot water extract of Eriobotrya japonica leaves, ability to inhibit nitric oxide (NO) production was measured and active compounds isolated from the extract were analyzed. Methods and Results: Sovent fractionation by solvent was performed to identify the active compounds present in the hot water extract, and the ability of the extract and the fractions obtained to inhibit NO production was measured. Subsequently, based on the results of liquid chromatography (LC) profile analysis of the n-butanol fraction that had a relatively high inhibitory ability of NO production, six subfractions were separated around the main peak. Among the separated subfractions spectra from mass spectroscopy (MS) were analyzed and standard comparisons were performed on the compounds of the three main peaks on the chromatogram. NO production inhibitory activity of subfraction 2 identified as neochlorogenic acid was the highest with an IC50 of 18.49 ㎍/㎖ followed by that of subfraction 5 identified as cryptochlorogenic acid with IC50 of 25.82 ㎍/㎖. Conclusions: Our result, it was confirmed that several caffeoylquinic acids, including neochlorogenic acid and cryptochlorogenic acid present in the hot water extract of E. japonica leaves have an important role as compounds exhibiting anti-inflammatory activity.
The methanol extract of the seed of Myristica fragrans (myristicaceae) demonstrated a potent inhibition on the proliferation of cultured human tumor cells such as A549 (non small cell lung), SK-OV-3 (ovary), SK-MEL-2(melanoma), XF498 (central nerve system) and HCT-15(colon). The MeOH extract was fractionated into three portions by serial solvent partition i,e., EtOAc soluble part, BuOH soluble part and remaining water layer. Among them, the EtOAc soluble part of the extract demonstrated a potent inhibition on the proliferation of cultured human tumor cells, Bioassay-guided fractionation of the EtOAc soluble part led to the isolation of six lignan constituents, i.e., safrole(1), machilin A (2), licarin B (3), macelignan (4), mesodihydroguaiaretic acid (5) and myristargenol A (6) as well as a large amount of myristic acid as active ingredients. Structures of the isolated active components (1-6) were established by chemical and spectroscopic means.
Secondary metabolites from the fruit body of Phellinus linteus were evaluated for their proliferative effect on human osteoblast-like cells. 3-[4,5-Dimethylthiazole-2-y1]-2,5-diphenyl-tetraxolium bromide (MTT) assay and alkaline phosphatase (ALP) activity assay were used to assess the effect those isolates on the human osteoblast-like cell line (Saos-2). Activity-guided fractionation led to the isolation of ALP-activating phenolic compounds through the extraction of P. linteus, solvent partitioning, and repeated silica gel and octadecyl silica gel (ODS) column chromatographic separations. From the result of spectroscopic data including nuclear magnetic resonance (NMR), mass spectrometry (MS), and infrared spectroscopy (IR), the chemical structures of the compounds were determined as 4-(4-hydroxyphenyl)-3-buten-2-one(1), 2-(3',4'-dihydroxyphenyl)-1,3-benzodioxole-5-aldehyde (2), 4-(3,4-dihydroxyphenyl)-3-buten-2-one (3), 3,4-dihydroxybenzaldehyde (4), and protocatechuic acid methyl ester (5), respectively. This study reports the first isolation of compounds 1-3 and 5 from P. linteus. In addition, all phenolic compounds stimulated proliferation of the osteoblast-like cells and increased their ALP activity in a dose-dependent manner ($10^{-8}$ to $10^{-1}\;mg/mL$). The present data demonstrate that phenolic compounds in P. linteus stimulated mineralization in bone formation caused by osteoporosis. The bone-formation effect of P. linteus seems to be mediated, at least partly, by the stimulating effect of the phenolic compounds on the growth of osteoblasts.
냉이(Capsella bursa-pastoris)로부터 산소독성에 영향을 미치는 superoxide anion radical에 대하여 소거작용을 하는 물질을 분리하고 이 물질의 이화학적 성질을 검토하였다. 냉이를 에탄올로 추출한 후 용매분획과 각종 column chromatographies (Amberlite XAD-2, Sephadex LH-20, Bio gel P-2, ODS)를 통해 정제하였고, 최종적으로 FPLC (Fast protein liquid chromatography)를 사용하여 활성의 단일물질을 얻었다. 냉이 에탄올추출물 100 g으로부터 0.25 g의 정제물질을 얻었으며, superoxide anion radical을 50% 소거하는 농도$(IC_{50})$는 $0.58\;{\mu}g$이었다. 이 물질에 대해 각종 이화학적 성질을 검토한 결과 phenol성 화합물의 배당체로 추정하였다.
감국에 존재하는 항충치활성 물질 및 glucosyltransferase 저해 효과에 대한 정보를 얻고자 본 연구를 시도하였다. 감국 ethanol 추출물의 항충치활성을 S. mutans 및 구강세균에 대해 검색한 결과, S. mutans와 2종의 구강세균에 대하여 활성이 높게 나타났다. 감국 ethanol 추출물의 농도에 따라 GTase 저해효과는 $78.4{\sim}92.3%$의 범위로 나타나 농도가 증가할 수록 활성도 함께 증가하는 경향을 나타냈다. 감국을 ethanol로 추출, 용매분획하여 얻어진 활성성분을 silica gel adsorption chromatography, Sephadex LH-20 chromatography, TLC 그리고 HPLC 등의 방법으로 분석한 결과, 감국에 존재하는 항충치활성 물질은 약간의 극성을 띠는 중성물질로 분자량이 200-400정도 되는 저분자 물질인 것으로 확인되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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